摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-23页 |
第一章 引言 | 第23-34页 |
第二章 浸润性膀胱尿路上皮癌 miRNA-34a 与 Notch1 表达检测 | 第34-58页 |
第一节 实验材料 | 第34-37页 |
·组织标本来源和病例资料 | 第34-35页 |
·主要试剂和溶液 | 第35-36页 |
·主要仪器和设备 | 第36-37页 |
第二节 实验方法 | 第37-47页 |
·qRT-PCR 检测组织 miRNA-34a(探针法) | 第37-40页 |
·qRT-PCR 检测组织 Notch1(SybrGreen 染色法) | 第40-42页 |
·Western Blot 检测组织 Notch1 | 第42-47页 |
·统计学方法 | 第47页 |
第三节 实验结果 | 第47-54页 |
·miR-34a 在浸润性膀胱尿路上皮癌中的表达 | 第47-50页 |
·Notch1 在浸润性膀胱尿路上皮癌中的表达 | 第50-53页 |
·miR-34a 与 Notch1 在浸润性膀胱尿路上皮癌中的表达关系 | 第53-54页 |
第四节 讨论 | 第54-58页 |
第三章 miRNA-34a 与 Notch1 作用靶点的预测和验证 | 第58-86页 |
第一节 实验材料 | 第58-60页 |
·细胞株 | 第58页 |
·主要试剂和溶液 | 第58-59页 |
·主要仪器和设备 | 第59-60页 |
第二节 实验方法 | 第60-75页 |
·生物信息学分析和预测 | 第60-61页 |
·细胞培养 | 第61-63页 |
·荧光素酶实验 | 第63-67页 |
·转染 miR-34a 表达质粒 | 第67-68页 |
·质粒 DNA 的分离和纯化 | 第68-69页 |
·qRT-PCR 检测细胞 miRNA-34a(探针法) | 第69-71页 |
·qRT-PCR 检测细胞 Notch1(SybrGreen 染色法) | 第71-73页 |
·Western Blot 检测细胞 Notch1 | 第73-74页 |
·统计学方法 | 第74-75页 |
第三节 实验结果 | 第75-81页 |
·生物信息学软件分析和靶点预测 | 第75-76页 |
·miR-34a 与 Notch13’UTR 荧光素酶报告结果 | 第76-79页 |
·过表达 miR-34a 对 Notch1 mRNA 和蛋白影响 | 第79-81页 |
第四节 讨论 | 第81-86页 |
第四章 miRNA-34a 靶向 Notch1 对浸润性膀胱尿路上皮癌细胞生物学效应的影响 | 第86-127页 |
第一节 实验材料 | 第86-88页 |
·细胞株 | 第86页 |
·主要试剂和溶液 | 第86-87页 |
·主要仪器和设备 | 第87-88页 |
第二节 实验方法 | 第88-98页 |
·转染 miR-34a 表达质粒 | 第88页 |
·转染 siRNA Notch1 | 第88-90页 |
·qRT-PCR 检测细胞 miRNA-34a(探针法) | 第90页 |
·Western Blot 检测细胞 Notch1(SybrGreen 染色法) | 第90页 |
·细胞增殖实验(MTS 法) | 第90-91页 |
·细胞增殖实验(血球计数板法) | 第91-93页 |
·细胞周期实验 | 第93-95页 |
·细胞迁移实验 | 第95-96页 |
·细胞侵袭实验 | 第96-98页 |
·统计学方法 | 第98页 |
第三节 实验结果 | 第98-119页 |
·miR-34a 转染和 si-Notch1 转染 | 第98-101页 |
·miR-34a 对膀胱尿路上皮癌细胞的细胞增殖能力的影响 | 第101-106页 |
·miR-34a 对膀胱尿路上皮癌细胞的细胞周期的影响 | 第106-111页 |
·miR-34a 对膀胱尿路上皮癌细胞的细胞迁移能力的影响 | 第111-115页 |
·miR-34a 对膀胱尿路上皮癌细胞的细胞侵袭能力的影响 | 第115-119页 |
第四节 讨论 | 第119-127页 |
第五章 结论 | 第127-129页 |
参考文献 | 第129-146页 |
文献综述 | 第146-224页 |
参考文献 | 第184-224页 |
致谢 | 第224-227页 |
附录 1 个人简历 | 第227-228页 |
附录 2 在学期间科研成果 | 第228-230页 |