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MicroRNA-34a靶向抑制Notch1对浸润性膀胱尿路上皮癌生物学效应的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-23页
第一章 引言第23-34页
第二章 浸润性膀胱尿路上皮癌 miRNA-34a 与 Notch1 表达检测第34-58页
 第一节 实验材料第34-37页
     ·组织标本来源和病例资料第34-35页
     ·主要试剂和溶液第35-36页
     ·主要仪器和设备第36-37页
 第二节 实验方法第37-47页
     ·qRT-PCR 检测组织 miRNA-34a(探针法)第37-40页
     ·qRT-PCR 检测组织 Notch1(SybrGreen 染色法)第40-42页
     ·Western Blot 检测组织 Notch1第42-47页
     ·统计学方法第47页
 第三节 实验结果第47-54页
     ·miR-34a 在浸润性膀胱尿路上皮癌中的表达第47-50页
     ·Notch1 在浸润性膀胱尿路上皮癌中的表达第50-53页
     ·miR-34a 与 Notch1 在浸润性膀胱尿路上皮癌中的表达关系第53-54页
 第四节 讨论第54-58页
第三章 miRNA-34a 与 Notch1 作用靶点的预测和验证第58-86页
 第一节 实验材料第58-60页
     ·细胞株第58页
     ·主要试剂和溶液第58-59页
     ·主要仪器和设备第59-60页
 第二节 实验方法第60-75页
     ·生物信息学分析和预测第60-61页
     ·细胞培养第61-63页
     ·荧光素酶实验第63-67页
     ·转染 miR-34a 表达质粒第67-68页
     ·质粒 DNA 的分离和纯化第68-69页
     ·qRT-PCR 检测细胞 miRNA-34a(探针法)第69-71页
     ·qRT-PCR 检测细胞 Notch1(SybrGreen 染色法)第71-73页
     ·Western Blot 检测细胞 Notch1第73-74页
     ·统计学方法第74-75页
 第三节 实验结果第75-81页
     ·生物信息学软件分析和靶点预测第75-76页
     ·miR-34a 与 Notch13’UTR 荧光素酶报告结果第76-79页
     ·过表达 miR-34a 对 Notch1 mRNA 和蛋白影响第79-81页
 第四节 讨论第81-86页
第四章 miRNA-34a 靶向 Notch1 对浸润性膀胱尿路上皮癌细胞生物学效应的影响第86-127页
 第一节 实验材料第86-88页
     ·细胞株第86页
     ·主要试剂和溶液第86-87页
     ·主要仪器和设备第87-88页
 第二节 实验方法第88-98页
     ·转染 miR-34a 表达质粒第88页
     ·转染 siRNA Notch1第88-90页
     ·qRT-PCR 检测细胞 miRNA-34a(探针法)第90页
     ·Western Blot 检测细胞 Notch1(SybrGreen 染色法)第90页
     ·细胞增殖实验(MTS 法)第90-91页
     ·细胞增殖实验(血球计数板法)第91-93页
     ·细胞周期实验第93-95页
     ·细胞迁移实验第95-96页
     ·细胞侵袭实验第96-98页
     ·统计学方法第98页
 第三节 实验结果第98-119页
     ·miR-34a 转染和 si-Notch1 转染第98-101页
     ·miR-34a 对膀胱尿路上皮癌细胞的细胞增殖能力的影响第101-106页
     ·miR-34a 对膀胱尿路上皮癌细胞的细胞周期的影响第106-111页
     ·miR-34a 对膀胱尿路上皮癌细胞的细胞迁移能力的影响第111-115页
     ·miR-34a 对膀胱尿路上皮癌细胞的细胞侵袭能力的影响第115-119页
 第四节 讨论第119-127页
第五章 结论第127-129页
参考文献第129-146页
文献综述第146-224页
 参考文献第184-224页
致谢第224-227页
附录 1 个人简历第227-228页
附录 2 在学期间科研成果第228-230页

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