中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-18页 |
第一章 引言 | 第18-23页 |
第二章 利用 Mxi1 基因敲除鼠观察肾小球系膜细胞增殖的变化 | 第23-42页 |
第一节 前言 | 第23-24页 |
第二节 实验材料 | 第24-26页 |
·实验动物 | 第24页 |
·实验试剂 | 第24-25页 |
·实验仪器 | 第25页 |
·其他材料 | 第25-26页 |
第三节 实验方法 | 第26-33页 |
·Mxi1-/-小鼠的繁殖 | 第26页 |
·Mxi1-/-小鼠的鉴定 | 第26-30页 |
·实验小鼠分组及标本留取 | 第30页 |
·小鼠肾小球蛋白质的提取 | 第30页 |
·PAS 染色 | 第30-31页 |
·免疫组化 | 第31页 |
·Western blot | 第31-32页 |
·统计学方法 | 第32-33页 |
第四节 实验结果 | 第33-39页 |
·Mxi1-/-小鼠的鉴定 | 第33-34页 |
·不同基因型小鼠肾小球病理表现 | 第34-35页 |
·不同基因型小鼠肾小球有核细胞计数 | 第35-36页 |
·不同基因型小鼠肾小球增殖细胞核抗原(PCNA)的表达 | 第36-37页 |
·不同基因型小鼠肾小球缬蛋白(desmin)的表达 | 第37-39页 |
第五节 讨论 | 第39-41页 |
第六节 小结 | 第41-42页 |
第三章 Mxi1 基因敲除鼠与野生鼠肾小球蛋白质表达谱的对比观察 | 第42-64页 |
第一节 前言 | 第42-44页 |
第二节 实验材料 | 第44-46页 |
·实验动物 | 第44页 |
·实验试剂 | 第44页 |
·实验仪器 | 第44-45页 |
·其他材料 | 第45-46页 |
第三节 实验方法 | 第46-50页 |
·实验小鼠分组 | 第46页 |
·小鼠肾小球蛋白质提取 | 第46页 |
·蛋白质上机前处理 | 第46-48页 |
·2D-LC/MS 检测 | 第48-49页 |
·Western blot 验证 | 第49-50页 |
第四节 实验结果 | 第50-59页 |
·鉴定的差异表达蛋白质 | 第50-57页 |
·差异表达蛋白质的功能分析 | 第57-58页 |
·差异表达蛋白质的验证 | 第58-59页 |
第五节 讨论 | 第59-63页 |
第六节 小结 | 第63-64页 |
第四章 Mxi1 在系膜增生性肾炎模型中的作用 | 第64-78页 |
第一节 前言 | 第64-65页 |
第二节 实验材料 | 第65-67页 |
·实验动物 | 第65页 |
·实验试剂 | 第65页 |
·实验仪器 | 第65-66页 |
·其他材料 | 第66-67页 |
第三节 实验方法 | 第67-71页 |
·HSV 诱导系膜增生性肾炎模型的建立 | 第67页 |
·标本留取 | 第67页 |
·血生化检测 | 第67页 |
·PAS 染色 | 第67-68页 |
·PCNA 免疫组化 | 第68-69页 |
·肾组织病理评分 | 第69-70页 |
·Western Blot | 第70页 |
·统计学方法 | 第70-71页 |
第四节 实验结果 | 第71-75页 |
·造模后小鼠一般情况及存活率观察 | 第71页 |
·肾功能检测 | 第71-72页 |
·肾组织病理变化 | 第72-73页 |
·增殖细胞核抗原(PCNA)的表达 | 第73-74页 |
·ERK1/2 在 HSV 诱导的系膜增生性肾炎模型中的表达 | 第74-75页 |
第五节 讨论 | 第75-77页 |
第六节 小结 | 第77-78页 |
第五章 Mxi1 抑制系膜细胞增殖的机制研究 | 第78-98页 |
第一节 前言 | 第78-79页 |
第二节 实验材料 | 第79-82页 |
·实验细胞 | 第79页 |
·实验试剂 | 第79-80页 |
·实验仪器 | 第80-81页 |
·其他材料 | 第81-82页 |
第三节 实验方法 | 第82-88页 |
·pcR3.1-Mxi1 质粒的构建与扩增 | 第82-83页 |
·siRNA 的合成 | 第83-84页 |
·质粒及 siRNA 的转染 | 第84页 |
·realtime RT-PCR | 第84-85页 |
·Western Blot | 第85-86页 |
·细胞增殖能力检测 | 第86页 |
·流式细胞仪检测 | 第86-87页 |
·抑制 ERK1/2 通路 | 第87页 |
·统计学方法 | 第87-88页 |
第四节 实验结果 | 第88-95页 |
·质粒与 siRNA 的转染效率 | 第88页 |
·质粒与 siRNA 的转染效果 | 第88-90页 |
·Mxi1 对细胞增殖能力的影响 | 第90页 |
·Mxi1 对细胞周期的影响 | 第90-92页 |
·Mxi1 对 ERK1/2 通路分子表达的影响 | 第92-93页 |
·抑制 ERK1/2 通路对 Mxi1 调控系膜细胞增殖作用的影响 | 第93-95页 |
第五节 讨论 | 第95-97页 |
第六节 小结 | 第97-98页 |
第六章 全文总结 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
附录 A 文献综述 | 第107-134页 |
References | 第126-134页 |
附录 B 实验所需主要试剂配制 | 第134-136页 |
个人简历在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第136-138页 |