棉花显微切割技术体系的建立及着丝粒序列探索研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| ·染色体分离技术及其应用研究 | 第11-16页 |
| ·染色体显微切割的技术原理 | 第11-12页 |
| ·染色体显微切割、微克隆技术操作规程 | 第12-15页 |
| ·染色体微切割、微克隆技术在植物中的应用 | 第15-16页 |
| ·植物着丝粒研究进展 | 第16-22页 |
| ·植物着丝粒DNA组成 | 第16-18页 |
| ·植物着丝粒蛋白 | 第18-19页 |
| ·植物着丝粒的进化机制 | 第19-21页 |
| ·着丝粒区序列的分离与克隆方法 | 第21-22页 |
| ·荧光原位杂交技术(FISH)及其在植物中的应用 | 第22-25页 |
| ·荧光原位杂交技术的发展 | 第22-23页 |
| ·荧光原位杂交技术在植物研究中的应用 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-37页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·棉花材料 | 第26页 |
| ·酶和生化试剂 | 第26页 |
| ·切割仪器耗材 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-37页 |
| ·有丝分裂中期染色体玻璃载片的制备 | 第26-27页 |
| ·有丝分裂中期染色体膜载片的制备 | 第27-28页 |
| ·单染色体/片段的显微分离及LA-PCR扩增 | 第28-30页 |
| ·PCR扩增 | 第30-33页 |
| ·克隆及质粒DNA的提取 | 第33-34页 |
| ·荧光原位杂交验证 | 第34-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-48页 |
| ·显微切割及结果验证 | 第37-42页 |
| ·中期染色体玻璃制片 | 第37页 |
| ·显微切割体系的建立 | 第37-42页 |
| ·PCR扩增及产物的验证 | 第42-48页 |
| ·设计引物的PCR扩增 | 第42页 |
| ·PCR产物的FISH验证 | 第42-44页 |
| ·K202产物的克隆及重组子的鉴定 | 第44-45页 |
| ·各片段的进一步检测 | 第45-46页 |
| ·800bp左右的片段阳性克隆序列分析 | 第46-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-52页 |
| ·中期染色体的膜制片 | 第48页 |
| ·单染色体或片段的显微分离 | 第48-49页 |
| ·扩增产物的获得及验证 | 第49-50页 |
| ·K202引物扩增 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
