| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词(ABBREVIATION) | 第12-13页 |
| 1. 文献综述 | 第13-21页 |
| ·甲型H1N1流感研究进展 | 第13-18页 |
| ·甲型H1N1流感的流行现状 | 第13-15页 |
| ·甲型H1N1流感病毒的生物学特性 | 第15-17页 |
| ·流感诊断方法 | 第17-18页 |
| ·单克隆抗体研究 | 第18-19页 |
| ·研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 2. 抗甲型H1亚型流感病毒血凝素单抗克隆抗体的制备及鉴定 | 第21-36页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·生物材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要材料及仪器设备 | 第21-22页 |
| ·主要试剂配制 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·抗原制备 | 第22-23页 |
| ·小鼠免疫 | 第23页 |
| ·细胞融合 | 第23-25页 |
| ·阳性杂交瘤细胞筛选 | 第25页 |
| ·阳性杂交瘤细胞克隆化 | 第25页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第25-27页 |
| ·结果 | 第27-33页 |
| ·融合后筛选及克隆化培养结果 | 第27-28页 |
| ·染色体计数结果 | 第28页 |
| ·单抗亚类鉴定结果 | 第28-29页 |
| ·单抗HI效价 | 第29-30页 |
| ·单抗特异性试验结果 | 第30-31页 |
| ·TCID50的测定 | 第31页 |
| ·间接免疫荧光结果 | 第31-32页 |
| ·稳定性检测 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| ·抗原的制备及免疫 | 第33页 |
| ·细胞融合和筛选 | 第33-34页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆及冻存复苏 | 第34页 |
| ·杂交瘤细胞株建立过程污染控制 | 第34页 |
| ·单克隆抗体特异性的鉴定 | 第34页 |
| ·染色体计数 | 第34-35页 |
| ·间接免疫荧光 | 第35-36页 |
| 3 甲型H1亚型流感病毒双抗体夹心ELISA方法的建立及应用 | 第36-50页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·生物材料 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要试剂的配制 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-42页 |
| ·单克隆抗体腹水的纯化 | 第37页 |
| ·抗体浓度及效价的测定 | 第37-38页 |
| ·辣根过氧化物酶(HRP)标记单克隆抗体 | 第38页 |
| ·甲型H1亚型流感病毒双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第38-42页 |
| ·结果 | 第42-48页 |
| ·单克隆抗体的提纯及检测 | 第42-43页 |
| ·双抗体夹心ELISA检测方法包被抗体和酶标抗体配对的确定 | 第43页 |
| ·方阵滴定的方法确定包被抗体及酶标抗体浓度 | 第43-44页 |
| ·临界值的确定 | 第44页 |
| ·封闭液的选择 | 第44-45页 |
| ·特异性试验 | 第45页 |
| ·敏感性实验 | 第45-46页 |
| ·临床试验 | 第46-47页 |
| ·甲型H1亚型流感病毒双抗体夹心ELISA试剂盒的组装 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·辣根过氧化物酶标记单克隆抗体 | 第48页 |
| ·包被抗体和酶标抗体最佳配对的选择 | 第48页 |
| ·封闭物的选择 | 第48页 |
| ·临界值的确定 | 第48-49页 |
| ·试剂盒特异性、敏感性试验 | 第49页 |
| ·本试剂盒创新处 | 第49-50页 |
| 4 甲型H1型流感病毒免疫胶体金检测方法的建立 | 第50-61页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·生物材料 | 第50页 |
| ·主要试剂及材料 | 第50页 |
| ·主要试剂的配制 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-55页 |
| ·试验器皿的清洁 | 第51页 |
| ·胶体金的制备 | 第51页 |
| ·金标抗体的制备 | 第51页 |
| ·结合垫、样品垫的预处理 | 第51页 |
| ·金垫制备及抗体喷涂 | 第51页 |
| ·免疫胶体金测试条的组装 | 第51-52页 |
| ·免疫胶体金层析法各种最佳条件的选择 | 第52-54页 |
| ·特异性试验 | 第54页 |
| ·敏感性试验 | 第54-55页 |
| ·对本实验室现有甲型H1型流感病毒检测 | 第55页 |
| ·稳定性试验 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-59页 |
| ·免疫胶体金层析法各种最佳条件的选择 | 第55-56页 |
| ·特异性试验 | 第56-58页 |
| ·敏感性试验 | 第58-59页 |
| ·对本实验室现有甲型H1型流感病毒检测 | 第59页 |
| ·稳定性试验 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·胶体金的制备 | 第59-60页 |
| ·免疫胶体金标记 | 第60页 |
| ·材料的选择 | 第60页 |
| ·检测线和质控线划膜浓度的掌握 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 附录 | 第70页 |
