| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·副猪嗜血杆菌 | 第12-16页 |
| ·病原学与流行病学 | 第12-14页 |
| ·致病机理与毒力因子 | 第14-16页 |
| ·自转运蛋白(AUTOTRANSPORTER PROTEIN) | 第16-22页 |
| ·自转运蛋白的结构及跨膜机制 | 第17-20页 |
| ·自转运蛋白的功能 | 第20-22页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 第3章 试验材料与方法 | 第23-45页 |
| ·实验材料 | 第23-29页 |
| ·实验动物,细胞与菌株 | 第23页 |
| ·载体与质粒 | 第23-24页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第25-27页 |
| ·主要缓冲液与试剂及其配制 | 第27-29页 |
| ·实验方法 | 第29-45页 |
| ·副猪嗜血杆菌at1基因的克隆 | 第29-32页 |
| ·原核表达质粒的构建 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第33-34页 |
| ·连接产物的转化 | 第34页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第34-35页 |
| ·蛋白的原核表达及纯化 | 第35-36页 |
| ·AT1-PD单克隆抗体的制备 | 第36-41页 |
| ·AT1蛋白的定位 | 第41页 |
| ·猪气管上皮原代细胞的制备 | 第41-43页 |
| ·AT1蛋白体外功能研究 | 第43-45页 |
| 第4章 实验结果与分析 | 第45-59页 |
| ·AT1基因的克隆、测序及序列分析 | 第45页 |
| ·at1基因的克隆 | 第45页 |
| ·AT1全长及AT1-PD原核表达 | 第45-49页 |
| ·重组表达质粒的构建及鉴定 | 第45-47页 |
| ·蛋白原核表达及纯化 | 第47-49页 |
| ·AT1-PD单克隆抗体的制备 | 第49-52页 |
| ·AT1-PD纯化蛋白免疫Balb/c小鼠 | 第49页 |
| ·分泌抗AT1-PD抗体的杂交瘤细胞筛选 | 第49-50页 |
| ·Western-blot鉴定AT1-PD单克隆抗体 | 第50页 |
| ·抗AT1-PD单克隆抗体的特异性鉴定 | 第50-51页 |
| ·抗AT1-PD单克隆抗体效价测定 | 第51-52页 |
| ·AT1蛋白的定位 | 第52-53页 |
| ·猪气管上皮细胞的制备 | 第53-54页 |
| ·AT1蛋白体外功能研究 | 第54-59页 |
| ·AT1蛋白粘附性研究 | 第54-56页 |
| ·间接免疫荧光检测AT1蛋白与细胞的互作 | 第56-59页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第59-65页 |
| ·讨论 | 第59-64页 |
| ·AT1全长及AT1-PD蛋白原核表达 | 第59-60页 |
| ·AT1-PD单克隆抗体的制备 | 第60-61页 |
| ·猪气管上皮细胞的制备 | 第61页 |
| ·AT1蛋白的定位 | 第61-62页 |
| ·AT1蛋白的体外功能研究 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |