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克螟稻cry1Ab基因LAMP检测方法研究

致谢第1-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-12页
目次第12-15页
图清单第15-17页
表清单第17-18页
缩略词汇总第18-19页
1. 绪论第19-33页
   ·转基因植物及其检测技术第19-22页
     ·转基因植物第19页
     ·转基因作物的应用价值与潜在危害第19-20页
     ·各国关于转基因作物和食品的法规第20-21页
     ·转基因植物的检测方法现状第21-22页
   ·Bt 基因第22-23页
     ·Bt 基因概述第22页
     ·用于转基因的 cry1Ab 基因第22-23页
   ·Bt 基因的检测研究进展第23-25页
     ·基于蛋白质水平的检测第23-24页
     ·基于基因水平的检测第24-25页
   ·LAMP 技术及其应用概述第25-31页
     ·LAMP 技术方法概述及基本特点第25页
     ·LAMP 技术反应原理第25-27页
     ·LAMP 引物设计原则第27-28页
     ·LAMP 方法的反应体系和反应条件第28页
     ·LAMP 反应的结果判断方法第28页
     ·荧光指示剂钙黄绿素第28-29页
     ·LAMP 方法扩增核酸的特点第29-30页
     ·LAMP 方法的应用第30-31页
   ·本论文的研究内容及意义第31-33页
     ·本论文研究内容第31页
     ·本论文研究意义第31-33页
2. 克螟稻 cry1Ab 基因的 LAMP 反应体系的建立及应用第33-55页
   ·实验材料第33-34页
     ·材料第33页
     ·主要试剂第33页
     ·主要仪器设备第33-34页
     ·试剂配制第34页
   ·实验方法第34-43页
     ·克螟稻基因组 DNA 的提取第34-36页
     ·LAMP 引物和 PCR 引物设计第36-37页
     ·目标片段的 PCR 扩增第37页
     ·PCR 产物切胶回收及纯化第37-38页
     ·PCR 产物切胶回收及纯化第38-39页
     ·cry1Ab 基因阳性质粒的构建第39-40页
     ·LAMP 反应体系、荧光定量 PCR 和普通 PCR 反应体系的建立第40-41页
     ·LAMP 反应结果的几种检测方法第41页
     ·LAMP 反应体系的优化第41-42页
     ·LAMP、荧光定量 PCR 与普通 PCR 反应体系的特异性比较研究第42页
     ·LAMP、荧光定量 PCR 和普通 PCR 反应体系的灵敏度比较研究第42页
     ·转基因成分中 cry1Ab 基因的检测第42页
     ·水稻不同组织中的 cry1Ab 基因的检测第42页
     ·叶片样品快速前处理用于田间转基因水稻植株的快速检测第42-43页
   ·结果与分析第43-54页
     ·克螟稻基因组 DNA 的提取第43-44页
     ·cry1Ab 基因标准质粒的构建与鉴定第44-45页
     ·检测 cry1Ab 基因的荧光定量体系的标准曲线的建立第45-46页
     ·cry1Ab 基因的 LAMP 反应体系的建立与优化第46-49页
     ·LAMP、荧光定量 PCR 和普通 PCR 反应体系的特异性比较第49-50页
     ·LAMP 反应体系、荧光定量 PCR 和普通 PCR 反应体系的灵敏度比较第50-51页
     ·cry1Ab 基因 LAMP 检测方法的实际应用第51-54页
   ·讨论第54-55页
3. 克螟稻 cry1Ab 基因的可视化 LAMP 反应体系的建立及应用第55-69页
   ·材料与方法第55-57页
     ·材料第55-56页
     ·主要试剂第56页
     ·主要仪器设备第56页
     ·试剂配制第56-57页
   ·实验方法第57-60页
     ·克螟稻 cry1Ab 基因的可视化 LAMP 反应体系的建立第57页
     ·可视化 LAMP 反应体系中荧光染料的优化第57-58页
     ·克螟稻 cry1Ab 基因的可视化 LAMP 反应体系的特异性第58页
     ·克螟稻 cry1Ab 基因的可视化 LAMP 反应体系的灵敏度第58页
     ·克螟稻 cry1Ab 基因的可视化 LAMP 快速检测试剂盒的制备第58-59页
     ·可视化 LAMP 反应体系的应用第59-60页
   ·结果与分析第60-67页
     ·克螟稻中 cry1Ab 基因的可视化 LAMP 反应体系的建立与优化第60-63页
     ·克螟稻 cry1Ab 基因的可视化 LAMP 反应体系的特异性第63-64页
     ·克螟稻 cry1Ab 基因的可视化 LAMP 反应体系的灵敏度第64-65页
     ·可视化 LAMP 检测试剂盒的制备第65页
     ·可视化 LAMP 反应体系的检测应用第65-67页
   ·讨论第67-69页
4. 总结、创新与展望第69-71页
   ·全文总结第69页
   ·创新点第69-70页
   ·课题展望第70-71页
参考文献第71-76页
作者简介第76页

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