致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
文献综述 | 第10-23页 |
1 禽传染性支气管炎进展 | 第10-12页 |
·病原分类 | 第10页 |
·理化特性 | 第10-11页 |
·生物学特性 | 第11页 |
·宿主系统 | 第11-12页 |
2 IB 的流行病学研究进展 | 第12-16页 |
·IB 不同致病型的研究 | 第12-13页 |
·IB 的流行病学 | 第13-16页 |
·国外IB 的流行病学 | 第13-15页 |
·国内IB 的流行病学 | 第15-16页 |
3 IB 的检测方法 | 第16-17页 |
·血清学检测 | 第16页 |
·病原学检测 | 第16页 |
·分子生物学检测 | 第16-17页 |
4 IBV 的分子生物学研究 | 第17-23页 |
·IBV 基因组 | 第17页 |
·IBV 的结构蛋白基因与生物学功能 | 第17-19页 |
·IBV 的非结构蛋白基因与生物学功能 | 第19-21页 |
·IBV 51 基因研究进展 | 第21-23页 |
·高变区和保守区与抗原决定簇 | 第21-22页 |
·血清型 | 第22页 |
·毒力与组织嗜性 | 第22-23页 |
引言 | 第23-24页 |
试验一 河南部分地区鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定及分子流行病学研究 | 第24-38页 |
1 材料和方法 | 第24-30页 |
·材料 | 第24-25页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·SPF 种蛋及SPF 鸡 | 第24页 |
·病料来源及7 株分离株背景 | 第24页 |
·主要试剂及配制 | 第24-25页 |
·酶和主要试剂 | 第25页 |
·方法 | 第25-30页 |
·病料处理与病毒培养 | 第25-26页 |
·HA 试验 | 第26页 |
·侏儒胚试验 | 第26-27页 |
·l%胰酶处理HN104 株鸡胚尿囊液试验 | 第27页 |
·HN104 株对NDV-LaSota 株干扰试验 | 第27页 |
·HN104 株EID50 测定 | 第27页 |
·HN104 株对SPF 鸡的致病力试验 | 第27页 |
·RT-PCR 试验 | 第27-29页 |
·引物的设计与合成 | 第27页 |
·病毒总RNA 的提取及RT-PCR | 第27-28页 |
·第一链cDNA 合成 | 第28页 |
·基因的PCR 扩增 | 第28-29页 |
·基因的克隆与序列测定 | 第29-30页 |
·PCR 产物的回收与纯化 | 第29页 |
·PCR 纯化产物与载体的连接 | 第29页 |
·连接产物转化于感受态细胞 | 第29页 |
·HN104 株对SPF 鸡的致病力试验 | 第29页 |
·IBV Sl 序列的测定及序列比较分析 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-36页 |
·侏儒胚试验 | 第30页 |
·胰酶处理HN104 株尿囊液后HA 试验及EID50 测定 | 第30页 |
·HN104 株对NDV 干扰试验 | 第30页 |
·HN104 株对SPF 鸡的致病力试验 | 第30-31页 |
·分离株的Sl 与N 基因核苷酸序列Blast 检索结果 | 第31-32页 |
·S1 基因序列分析及遗传进化分析 | 第32-34页 |
·S1 基因序列分析 | 第33页 |
·Sl 基因的遗传进化分析 | 第33-34页 |
·N 基因序列分析及遗传进化分析 | 第34-35页 |
·N 基因序列分析 | 第35页 |
·N 基因遗传进化分析 | 第35页 |
·HN104 株Sl 基因分子特征分析 | 第35-36页 |
3 结论与讨论 | 第36-38页 |
试验二 IBV 分离株HN104 与HN091 全基因组序列测定及遗传进化分析 | 第38-53页 |
1 材料与方法 | 第38-42页 |
·材料 | 第38页 |
·主要仪器设备 | 第38页 |
·酶和主要试剂 | 第38页 |
·毒株和SPF 种蛋 | 第38页 |
·细胞培养相关试剂的配制 | 第38页 |
·试验方法 | 第38-42页 |
·病毒的纯化与增殖 | 第39页 |
·分子生物学软件 | 第39页 |
·分段扩增IBV 全基因组17 对引物的设计与合成 | 第39页 |
·常规分子实验 | 第39页 |
·病毒基因组RNA 的提取方法 | 第39页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第39页 |
·基因的克隆与序列测定 | 第39页 |
·IBV 全基因组的5’端和3’端扩增 | 第39-41页 |
·IBV 全基因组的5’端RACE 扩增 | 第39-40页 |
·IBV 全基因组的3’端RACE 扩增 | 第40-41页 |
·IBV 全基因组全长cDNA 序列的测定及序列比较分析 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-50页 |
·RT-PCR 扩增结果 | 第42-43页 |
·基因组cDNA 序列的测定与BLAST 分析 | 第43页 |
·部分分离株IBV 全基因组序列分析 | 第43-46页 |
·IBV HN104 株全基因组序列特点 | 第43-44页 |
·IBV HN091 株全基因组序列特点 | 第44-45页 |
·分离株HN104 和HN091 全基因遗传进化分析 | 第45-46页 |
·分离株HN104 和HN091 的各个编码基因片段序列比较及遗传进化分析 | 第46-50页 |
·5’UTR 与3’UTR 结构基因片段的序列比较及遗传进化分析 | 第50页 |
3 结论讨论 | 第50-53页 |
全文总结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
英文摘要 | 第60-62页 |
附录 | 第62-69页 |