| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-27页 |
| 1 作物耐热性鉴定方法 | 第15-18页 |
| ·外部形态及经济性状指标 | 第15页 |
| ·微观结构指标 | 第15-16页 |
| ·显微结构指标 | 第15页 |
| ·超微结构指标 | 第15-16页 |
| ·生理生化机制 | 第16-18页 |
| ·膜的热稳定性 | 第16页 |
| ·叶绿素含量及叶绿素荧光 | 第16页 |
| ·可溶性蛋白、丙二醛、脯氨酸及可溶性糖含量 | 第16-17页 |
| ·SOD、CAT、POD酶活性 | 第17页 |
| ·高温逆境下植物光合作用及呼吸作用的变化 | 第17-18页 |
| ·分子生物学机制 | 第18页 |
| 2 植物热激蛋白 | 第18-22页 |
| ·HSPs的发现 | 第18-19页 |
| ·HSPs的分类及定位 | 第19页 |
| ·HSPs的分类 | 第19页 |
| ·HSPs的定位 | 第19页 |
| ·HSPs的功能 | 第19-22页 |
| ·植物HSPs的分子伴侣作用 | 第19-20页 |
| ·HSPs与作物的耐热性 | 第20-21页 |
| ·HSPs与植物的耐冷性 | 第21页 |
| ·Hsps对植物正常的生长、发育的作用 | 第21页 |
| ·Hsps的调节功能 | 第21-22页 |
| ·植物Hsps基因表达的调控 | 第22页 |
| ·转录水平的调控 | 第22页 |
| ·翻译后的调控 | 第22页 |
| 3 植物蛋白质组学研究 | 第22-26页 |
| ·蛋白质组学的定义 | 第23页 |
| ·蛋白组学的研究内容及意义 | 第23页 |
| ·蛋白组学在植物研究中的应用 | 第23-26页 |
| ·蛋白质组学在植物发育中的应用 | 第23-24页 |
| ·蛋白质组学在植物逆境中的应用 | 第24-26页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
| 第二部分 研究报告 | 第27-87页 |
| 第一章 高温胁迫下萝卜叶片差异蛋白质组学分析 | 第27-43页 |
| 摘要 | 第27-28页 |
| 1 材料与方法 | 第28-32页 |
| ·幼苗的培养与处理 | 第28页 |
| ·蛋白质的提取 | 第28页 |
| ·蛋白质溶解与定量 | 第28页 |
| ·双向电泳 | 第28-29页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第29页 |
| ·图像采集与分析 | 第29-30页 |
| ·质谱鉴定与数据库检索 | 第30页 |
| ·基因半定量RT-PCR表达特性分析 | 第30-32页 |
| ·总RNA提取 | 第30页 |
| ·RNA纯化 | 第30-31页 |
| ·RNA检测 | 第31页 |
| ·RNA反转录 | 第31页 |
| ·基因的表达特性分析 | 第31-32页 |
| 2 结果分析 | 第32-39页 |
| ·高温胁迫条件对萝卜叶片生长发育的影响 | 第32-33页 |
| ·高温胁迫下萝卜叶片蛋白表达谱的双向电泳分析 | 第33-37页 |
| ·差异蛋白点的质谱鉴定及功能分析 | 第37-38页 |
| ·mRNA水平上的基因表达分析 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-43页 |
| ·高温胁迫对萝卜叶片形态影响 | 第39页 |
| ·高温胁迫下萝卜叶片蛋白质组学分析 | 第39-42页 |
| ·热激蛋白 | 第39-40页 |
| ·氧化还原相关蛋白 | 第40页 |
| ·能量与代谢相关蛋白 | 第40-41页 |
| ·信号转导相关蛋白 | 第41-42页 |
| ·mRNA水平上的基因表达 | 第42-43页 |
| 第二章 高温胁迫下萝卜肉质根差异蛋白质组学分析 | 第43-55页 |
| 摘要 | 第43-44页 |
| 1 材料与方法 | 第44-45页 |
| ·幼苗的培养与处理 | 第44页 |
| ·蛋白质的提取 | 第44页 |
| ·蛋白质溶解与定量 | 第44页 |
| ·双向电泳 | 第44页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第44页 |
| ·图像采集与分析 | 第44页 |
| ·质谱鉴定与数据库检索 | 第44-45页 |
| ·基因半定量RT-PCR表达特性分析 | 第45页 |
| 2 结果分析 | 第45-52页 |
| ·高温胁迫下萝卜肉质根蛋白表达谱的双向电泳分析 | 第45-50页 |
| ·差异蛋白点的质谱鉴定及功能分析 | 第50-51页 |
| ·mRNA水平上的基因表达分析 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| ·萝卜肉质根响应高温胁迫的蛋白质组学分析 | 第52-54页 |
| ·热激蛋白 | 第52-53页 |
| ·代谢相关蛋白 | 第53页 |
| ·蛋白合成相关蛋白 | 第53页 |
| ·氧化还原相关蛋白 | 第53-54页 |
| ·表达调控相关蛋白 | 第54页 |
| ·转录水平与翻译水平的一致性 | 第54-55页 |
| 第三章 利用DDRT技术分离萝卜高温胁迫相关基因 | 第55-65页 |
| 摘要 | 第55-56页 |
| 1 材料与方法 | 第56-57页 |
| ·植物材料与胁迫处理 | 第56页 |
| ·总RNA提取 | 第56页 |
| ·cDNA第一条链的合成和DDRT-PCR | 第56页 |
| ·PCR产物的聚丙烯酰胺电泳展示 | 第56页 |
| ·差异cDNA的二次扩增与克隆、测序 | 第56-57页 |
| ·差异片段的RT-PCR表达分析 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-63页 |
| ·萝卜高温响应mRNA差异显示分析 | 第57-58页 |
| ·差异表达基因片段的再扩增 | 第58-59页 |
| ·萝卜高温响应基因片段的DDRT分析 | 第59-61页 |
| ·响应高温胁迫的差异表达基因片段的功能分类 | 第61-62页 |
| ·差异片段的RT-PCR表达分析 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| ·mRNA差异显示技术的优缺点 | 第63页 |
| ·差异表达片段在高温胁迫下的功能 | 第63-65页 |
| 第四章 萝卜热激蛋白基因的克隆与表达分析 | 第65-87页 |
| 摘要 | 第65-66页 |
| 1 材料与方法 | 第66-69页 |
| ·植物材料 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-67页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第66页 |
| ·引物的合成 | 第66-67页 |
| ·热激蛋白基因的特异扩增 | 第67页 |
| ·PCR产物的检测 | 第67页 |
| ·热激蛋白基因克隆与分析 | 第67-69页 |
| ·热激蛋白基因的特异性扩增 | 第67页 |
| ·目的片段的回收 | 第67页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第67-68页 |
| ·重组质粒的构建 | 第68页 |
| ·重组质粒的转化 | 第68页 |
| ·质粒的提取及重组质粒的鉴定 | 第68-69页 |
| ·序列测定及分析 | 第69页 |
| ·热激蛋白基因的RT-PCR分析 | 第69页 |
| ·总RNA的提取及纯化 | 第69页 |
| ·cDNA的合成 | 第69页 |
| ·热激蛋白基因的表达特征分析 | 第69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-84页 |
| ·扩增和克隆结果 | 第69-71页 |
| ·萝卜RsHSP22、RsHSC70、RsCPN10基因的DNA与cDNA克隆及序列分析 | 第71-84页 |
| ·萝卜RsHSP22基因的cDNA克隆及序列分析 | 第71-73页 |
| ·萝卜RsHSC70基因的基因组DNA和cDNA克隆及序列分析 | 第73-79页 |
| ·萝卜RsCPN10基因的基因组DNA和cDNA克隆及序列分析 | 第79-84页 |
| ·萝卜RsHSP22、RsHSC70、RsCPN10基因的表达分析 | 第84页 |
| 3讨论 | 第84-87页 |
| ·RsHSP22基因的结构、功能及表达特性分析 | 第85页 |
| ·RsHSC70基因的结构、功能及表达特性分析 | 第85-86页 |
| ·RsCPN10基因的结构、功能及表达特性分析 | 第86-87页 |
| 全文结论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-101页 |
| 发表论文情况 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
