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猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP1、NSP2和NSP4免疫抑制研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
第一章 PRRSV及PRRSV结构蛋白研究进展第12-20页
   ·PRRS及宿主对PRRSV免疫应答第12-13页
   ·PRRSV结构蛋白及其对宿主反应调节作用第13-17页
     ·GP2第14页
     ·GP3第14-15页
     ·GP4第15页
     ·GP5第15-17页
     ·M蛋白第17页
     ·N蛋白第17页
 结语第17-20页
第二章 PRRSV非结构蛋白研究进展第20-52页
     ·PRRSV非结构蛋白调节宿主免疫反应功能第21-23页
       ·PRRSV NSP调节体液免疫应答反应第22-23页
     ·PRRSV NSPs调节固有免疫应答第23页
   ·PRRSV细胞质蛋白质对固有免疫调节作用第23-24页
     ·多功能PRRSV NSP2在不同水平上调节宿主免疫反应第23-24页
     ·NSP11免疫调节作用第24页
   ·PRRSV非结构蛋白在疫苗和诊断技术发展中的作用第24-26页
     ·PRRSV NSP2的遗传标记对重组标记疫苗的启示第24-25页
     ·确定PRRSV毒力因子对发展PRRS疫苗的重要性第25页
     ·PRRSVNSPs作为潜在的诊断指标第25-26页
   ·PRRSV非结构蛋白1(NSP1)研究进展第26-29页
     ·NSP1作为干扰素反应调节器第27-29页
 参考文献第29-52页
第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP1、NSP2(1-484)和NSP4原核表达与免疫特性鉴定第52-68页
 摘要第52-53页
 1 材料与方法第53-59页
   ·病毒、细胞及其它材料第53页
   ·引物的设计与合成第53页
   ·NSP1、NSP2(1-484)、NSP4基因PCR扩增及纯化第53-56页
   ·NSP1、NSP2(1-484)、NSP4原核表达重组质粒的构建、表达及重组蛋白的纯化第56-58页
   ·Western blotting第58-59页
   ·NSP1、NSP2(1-484)和NSP4蛋白多克隆抗体制备第59页
   ·间接免疫荧光试验(IFA)第59页
 2. 结果第59-62页
   ·NSP1、NSP2(1-484)和NSP4基因片段重组质粒的构建第59-61页
   ·NSP1、NSP2(1-484)和NSP4重组蛋白表达与Western blotting鉴定第61-62页
   ·间接免疫荧光试验第62页
 3 讨论第62-65页
 Abstract第65-66页
 参考文献第66-68页
第四章 猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP1、NSP2和NSP4重组腺病毒的构建与鉴定第68-90页
 摘要第68-69页
 1 材料与方法第69-80页
   ·质粒、菌株、病毒与细胞第69页
   ·试剂第69页
   ·PRRSV SY0608株NSP、NSP2及NSP4基因的扩增第69-71页
   ·重组穿梭载体的构建第71-74页
   ·重组穿梭载体与腺病毒骨架载体在BJ5183大肠杆菌中同源重组第74-76页
   ·重组腺病毒的包装第76-77页
   ·重组腺病毒的鉴定第77-79页
   ·重组腺病毒的滴度测定第79-80页
 2 结果第80-85页
   ·NSP1、NSP2及NSP4基因的扩增第80页
   ·重组穿梭载体的构建与鉴定第80-81页
   ·重组腺病毒质粒的鉴定第81-82页
   ·重组腺病毒的收获第82-83页
   ·重组腺病毒的表达鉴定第83-85页
   ·重组腺病毒的滴度第85页
 3 讨论第85-87页
 Abstract第87-88页
 参考文献第88-90页
第五章 猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP1、NSP2和NSP4重组腺病毒的小鼠免疫抑制作用研究第90-100页
 摘要第90-91页
 1 材料与方法第91-92页
   ·病毒与细胞第91页
   ·主要试剂第91页
   ·小鼠分组与免疫试验第91页
   ·淋巴细胞增殖试验第91-92页
   ·细胞因子测定第92页
   ·数据处理与统计分析第92页
 2 结果第92-94页
   ·小鼠免疫后T淋巴细胞增殖指数测定第92-93页
   ·淋巴细胞上清中IFN-γ和IL-10测定结果第93-94页
 3 讨论第94-96页
 Abstract第96-97页
 参考文献第97-100页
第六章 猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP1对猪体免疫抑制作用第100-112页
 摘要第100-101页
 1 材料与方法第101-103页
   ·细胞、毒株第101页
   ·rAd-NSP1间接免疫荧光试验鉴定第101页
   ·rAd-NSP1体外试验设计第101-102页
   ·rAd-NSP1对猪体细胞免疫的影响第102-103页
   ·rAd-NSP1对猪体体液免疫应答的影响第103页
   ·数据处理与统计分析第103页
 2 结果第103-108页
   ·重组腺病毒的鉴定第103-104页
   ·rAd-NSP1对PAM细胞因子的影响第104-105页
   ·rAd-NSP1对猪体细胞免疫反应的影响第105-107页
   ·rAd-NSP1对猪瘟体液免疫反应的影响第107-108页
 3 讨论第108-109页
 Abstract第109-110页
 参考文献第110-112页
全文总结第112-114页
致谢第114-116页
攻读博士学位期间发表的论文第116页

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