| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-16页 |
| ·血宵生成和血管内皮生长因子及其受体 | 第11页 |
| ·VEGF、VEGFR在治疗肿瘤中的作用 | 第11-12页 |
| ·蛋白药物半衰期延长策略 | 第12-13页 |
| ·哺乳动物细胞表达系统 | 第13-14页 |
| ·血管生成抑制剂蹄选模型 | 第14-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-38页 |
| ·常用仪器 | 第16-17页 |
| ·质粒、菌株和细胞 | 第17页 |
| ·工具酶及其他试剂 | 第17-18页 |
| ·模板化学合成与引物 | 第18页 |
| ·常用溶液的配制 | 第18-22页 |
| ·方法 | 第22-38页 |
| 第3章 结果 | 第38-44页 |
| ·VEGFR1D2-VEGFR2D3、人IgG1Fc和VEGFR-Fc基因扩增产物的鉴定 | 第38页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第38-39页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第39页 |
| ·Western blot分析 | 第39-40页 |
| ·ELISA法测定细胞培养上清中VEGFR-Fc蛋白的表达量 | 第40-41页 |
| ·纯化VEGFR-Fc蛋白的鉴定 | 第41-42页 |
| ·显微镜观察法检测VEGFR-Fc的生物活性 | 第42页 |
| ·血管内皮细胞ECV304模型检测VEGFR-Fc的生物活性 | 第42-44页 |
| 第4章 讨论 | 第44-48页 |
| ·设计VEGFR-Fc基因序列及研究意义 | 第44页 |
| ·通过Overlap PCR扩增VEGFR-Fc基因 | 第44-45页 |
| ·DG44细胞DHFR扩增系统和筛选标记MTX | 第45-46页 |
| ·细胞培养上清中VEGFR-Fc蛋白的鉴定 | 第46页 |
| ·VEGFR-Fc的生物活性检测 | 第46-48页 |
| 第5章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 附录(DNA序列分析图谱) | 第52-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 目前已发表和待发表的论文 | 第57页 |