| 目录 | 第1-7页 |
| 英文縮写 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 奶牛乳腺炎概况 | 第13-15页 |
| ·乳腺炎的发生及危害 | 第13页 |
| ·乳腺炎的治疗 | 第13页 |
| ·体细胞评分在乳腺炎抗性育种中的应用 | 第13-14页 |
| ·乳腺炎抗性候选基因分子标记辅助选择技术研究现状 | 第14-15页 |
| 2 miRNA与免疫反应 | 第15-17页 |
| ·miRNA-16对炎症反应的调控 | 第16页 |
| ·miRNA-181a对CD4+T细胞激活和B细胞分化的调控 | 第16-17页 |
| ·miRNA-146a对先天性免疫反应的负调控 | 第17页 |
| ·miRNA-223参与调控中性粒细胞的增殖与激活 | 第17页 |
| 3 本研究中生物信息学的应用概述 | 第17-20页 |
| ·启动子序列的预测 | 第17-18页 |
| ·转录因子的预测 | 第18页 |
| ·CpG岛的预测 | 第18页 |
| ·miRNA靶基因预测 | 第18-20页 |
| 4 HMGB3和HMGB1基因研究进展 | 第20-22页 |
| ·HMGB蛋白家族简介 | 第20-21页 |
| ·HMGB1基因的位置和功能 | 第21-22页 |
| ·HMGB3基因的位置和功能 | 第22页 |
| 5 研究目的和意义 | 第22页 |
| 参考文献 | 第22-27页 |
| 试验研究 | 第27-77页 |
| 实验1 HMGB3基因及其剪接体在奶牛体组织中的表达分析 | 第27-39页 |
| 摘要 | 第27-28页 |
| 1 材料与方法 | 第28-31页 |
| ·试验材料 | 第28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·奶牛组织样品总RNA提取和cDNA合成 | 第28页 |
| ·用于RT-PCR和Q-PCR反应的引物设计 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR | 第29页 |
| ·Q-PCR | 第29-31页 |
| ·数据统计 | 第31页 |
| 2 试验结果 | 第31-34页 |
| ·奶牛各组织中RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·标准曲线的生成 | 第32页 |
| ·组织样品中HMGB3基因的扩增 | 第32-33页 |
| ·基因的熔解曲线 | 第33页 |
| ·基因表达结果分析 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 4 本章小结 | 第35页 |
| 参考文献 | 第35-37页 |
| ABSTRACT | 第37-39页 |
| 实验2 奶牛HMGB3基因启动子活性分析与功能性SNP鉴定 | 第39-55页 |
| 摘要 | 第39-40页 |
| 1 材料与方法 | 第40-45页 |
| ·试验动物 | 第40页 |
| ·血液DNA的提取 | 第40页 |
| ·HMGB3基因生物信息学分析 | 第40-41页 |
| ·HMGB3基因启动子区序列真核表达载体的构建及SNPs的筛选 | 第41-42页 |
| ·瞬时转染及荧光分析 | 第42-44页 |
| ·启动子核心序列的定位 | 第44页 |
| ·对牛的SNP(g.+2690 C>T)位点进行基因分型 | 第44-45页 |
| ·数据处理及分析 | 第45页 |
| 2 试验结果 | 第45-51页 |
| ·启动子的生物信息学分析及SNP的鉴定 | 第45-48页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第48页 |
| ·239T细胞转染前后的变化 | 第48页 |
| ·HMGB3基因启动子活性分析 | 第48-49页 |
| ·SNP(g.+2690 C>T)对启动子活性的影响 | 第49-50页 |
| ·基因分型及数据统计分析 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 4 本章小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-54页 |
| ABSTRACT | 第54-55页 |
| 实验3 奶牛HMGB3基因靶标miRNAs的表达分析 | 第55-63页 |
| 摘要 | 第55-56页 |
| 1 材料与方法 | 第56-57页 |
| ·试验材料及仪器设备 | 第56页 |
| ·乳腺组织样品总RNA的提取及cDNA的合成 | 第56页 |
| ·生物信息学分析HMGB3基因3’UTR靶标miRNAs | 第56页 |
| ·Q-PCR方法进行miRNAs定量 | 第56-57页 |
| ·数据处理及分析 | 第57页 |
| 2 试验结果 | 第57-58页 |
| ·生物信息学预测结果 | 第57-58页 |
| ·乳腺组织靶标miRNAs表达量分析 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58页 |
| 4 本章小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| ABSTRACT | 第61-63页 |
| 实验4 奶牛HMGB1基因靶标miRNA表达分析及SNP功能研究 | 第63-77页 |
| 摘要 | 第63-64页 |
| 1 材料与方法 | 第64-67页 |
| ·乳腺组织样品总RNA的提取及cDNA的合成 | 第64页 |
| ·试验动物 | 第64页 |
| ·试验方法 | 第64-67页 |
| ·数据处理及分析 | 第67页 |
| 2 试验结果 | 第67-72页 |
| ·SNP的发现及生物信息学分析 | 第67-68页 |
| ·HMGB1基因mRNA和bta-miR-223在乳腺组织中的表达 | 第68页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第68-69页 |
| ·荧光分析 | 第69-70页 |
| ·HMGB1基因多态性分析结果 | 第70-72页 |
| 3 讨论 | 第72页 |
| 4 本章小结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| ABSTRACT | 第75-77页 |
| 全文结论 | 第77-79页 |
| 附录 | 第79-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 作者简介 | 第85-87页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第87页 |
