| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-8页 |
| 文献综述 | 第8-21页 |
| 1 奶牛乳房炎的研究进展及奶牛低血钙症对乳房炎的影响 | 第8-14页 |
| ·奶牛乳房炎的研究进展 | 第8页 |
| ·奶牛低血钙症与乳房炎 | 第8-9页 |
| ·乳腺免疫 | 第9页 |
| ·脂多糖免疫 | 第9-14页 |
| ·白细胞介素 | 第11-12页 |
| ·肿瘤坏死因子 | 第12-13页 |
| ·干扰素 | 第13页 |
| ·促分裂素原活化蛋白激酶 | 第13页 |
| ·核转录因子 | 第13-14页 |
| ·Ca~(2+)与细胞免疫 | 第14页 |
| 2 奶牛乳腺上皮细胞的增殖与凋亡 | 第14-17页 |
| ·细胞的增殖与凋亡 | 第14-15页 |
| ·Ca~(2+)与细胞凋亡机制 | 第15-17页 |
| ·线粒体凋亡通路 | 第15-16页 |
| ·死亡受体凋亡通路 | 第16页 |
| ·内质网凋亡通路 | 第16-17页 |
| 3 血乳屏障的研究进展及影响因素 | 第17-20页 |
| ·紧密连接在屏障功能中的作用 | 第17-18页 |
| ·维持屏障功能 | 第18页 |
| ·维持细胞的极性 | 第18页 |
| ·钙离子与紧密连接的调控机制 | 第18页 |
| ·细胞单层紧密性 | 第18-19页 |
| ·紧密连接的研究进展 | 第19-20页 |
| 4 本论文的研究意义及主要内容 | 第20-21页 |
| 试验一 奶牛乳腺上皮细胞的体外培养与单层细胞连接测定 | 第21-32页 |
| 1 材料和方法 | 第21-24页 |
| ·试剂与材料 | 第21-22页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的采集 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·相关试剂配置 | 第21-22页 |
| ·试验仪器 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-24页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的分离培养 | 第22-23页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的纯化 | 第23页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的传代 | 第23-24页 |
| ·乳腺上皮细胞的形态学鉴定 | 第24页 |
| ·单层细胞连接检测 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-29页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的分离培养及形态学观察 | 第24-26页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的纯化与传代 | 第26-28页 |
| ·单层细胞连接检测 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-31页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的分离培养方法 | 第29-30页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的纯化、传代 | 第30页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的鉴定方法 | 第30页 |
| ·低钙处理奶牛乳腺上皮细胞连接的影响 | 第30-31页 |
| 4 小结 | 第31-32页 |
| 试验二 低钙处理对BMEC增殖的影响 | 第32-39页 |
| 1 材料与方法 | 第32-34页 |
| ·试剂和器材 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·相关试剂配制 | 第32-33页 |
| ·试验仪器 | 第33页 |
| ·试验步骤 | 第33-34页 |
| ·试验用的细胞 | 第33页 |
| ·试验用含不同钙离子浓度培养基的配制 | 第33页 |
| ·MTT法检测细胞增殖 | 第33-34页 |
| ·细胞凋亡分析 | 第34页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-36页 |
| ·不同钙离子浓度培养基对奶牛MEC增殖的影响 | 第34-36页 |
| ·不同钙离子浓度培养基刺激奶牛MEC过程中存在细胞凋亡 | 第36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 4 小结 | 第38-39页 |
| 试验三 低钙对奶牛乳腺上皮细胞免疫的影响 | 第39-51页 |
| 1 材料与方法 | 第39-43页 |
| ·试剂和器材 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·刺激用液 | 第39页 |
| ·试验器材 | 第39-40页 |
| ·试验步骤 | 第40-43页 |
| ·低钙培养基刺激经LPS诱导的BMEC细胞因子mRNA的表达 | 第40页 |
| ·RNA提取 | 第40页 |
| ·RNA检测 | 第40页 |
| ·RT-qPCR检测细胞因子的表达 | 第40-42页 |
| ·ELISA法检测细胞上清液中MAPK和NF-κB蛋白的含量 | 第42-43页 |
| ·数据处理 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-48页 |
| ·RNA浓度和完整性 | 第43-44页 |
| ·低钙培养基对经LPS诱导的BMEC细胞因子mRNA表达的影响 | 第44-47页 |
| ·ELISA法检测细胞上清液中MAPK和NF-κB蛋白的表达 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第60-61页 |
