| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| 1 抗生素简介 | 第10-14页 |
| ·抗生素定义 | 第10页 |
| ·常用抗生素的种类 | 第10-12页 |
| ·抗生素的作用机理 | 第12-13页 |
| ·国内外抗生素的使用情况 | 第13页 |
| ·抗生素在畜禽养殖中的应用现状 | 第13-14页 |
| 2 抗生素的环境行为和影响 | 第14-17页 |
| ·抗生素在环境中的残留水平 | 第14-16页 |
| ·抗生素在水体中的残留水平 | 第14-15页 |
| ·抗生素在土壤中的残留水平 | 第15-16页 |
| ·抗生素在土壤中的环境行为 | 第16-17页 |
| 3 抗生素耐药基因 | 第17-23页 |
| ·环境中抗生素耐药基因来源 | 第18页 |
| ·抗生素耐药基因的传播和扩散 | 第18-19页 |
| ·细菌耐药性的机制 | 第19-20页 |
| ·四环素耐药基因 | 第20-23页 |
| ·外输泵蛋白基因 | 第21-22页 |
| ·核糖体保护蛋白 | 第22页 |
| ·产生钝化或灭活四环素酶 | 第22页 |
| ·其他未知的耐药机制 | 第22-23页 |
| 4 抗生素耐药基因的检测方法 | 第23-26页 |
| ·传统的研究方法 | 第23页 |
| ·分子生物学的研究方法 | 第23-26页 |
| ·PCR方法 | 第24页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第24页 |
| ·DNA微列阵技术(DNA Microarray) | 第24-25页 |
| ·PCR-DGGE技术 | 第25-26页 |
| 第二章 试验的设计与方法 | 第26-28页 |
| 1 试验设计 | 第26-27页 |
| ·供试猪粪、土样及处理 | 第26页 |
| ·试验处理设置 | 第26-27页 |
| ·取样测定 | 第27页 |
| 2 土柱设计与制作 | 第27-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-49页 |
| 第一节 不同处理耐药细菌数量及其动态变化 | 第28-39页 |
| 1 试验方法 | 第28-29页 |
| ·土壤中抗性细菌数量的测定 | 第28页 |
| ·培养基配方 | 第28页 |
| ·测定方法 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-39页 |
| ·猪粪施用水平对土壤耕作层耐药细菌数量的影响 | 第29-30页 |
| ·灭菌猪粪施用水平对土壤耕作层耐药细菌数量的影响 | 第30-31页 |
| ·四环素对猪粪及灭菌猪粪施用土壤耕作层耐药细菌数量的影响 | 第31-34页 |
| ·四环素低浓度处理(TC0.5)对猪粪及灭菌猪粪施用土壤耐药细菌数量的影响 | 第31-32页 |
| ·四环素中浓度处理(TC5)对猪粪及灭菌猪粪施用土壤耐药细菌数量的影响 | 第32-33页 |
| ·四环素高浓度处理(TC50)对猪粪及灭菌猪粪施用土壤耐药细菌数量的影响 | 第33-34页 |
| ·不同施用水平下猪粪对土壤耐药细菌数量垂直分布的影响 | 第34-35页 |
| ·不同施用水平下灭菌猪粪对土壤耐药细菌数量的垂直分布的影响 | 第35-37页 |
| ·不同四环素浓度处理对猪粪(灭菌猪粪)施用土壤耐药菌数量垂直分布的影响 | 第37-39页 |
| 第二节 抗生素耐药基因变化情况 | 第39-49页 |
| 1. 材料与方法 | 第39-43页 |
| ·DNA的提取(CTAB法) | 第39-41页 |
| ·试剂准备 | 第39-40页 |
| ·操作步骤 | 第40-41页 |
| ·PCR扩增 | 第41-43页 |
| ·反应体系(25μl) | 第41页 |
| ·反应程序 | 第41页 |
| ·PCR扩增引物的设计 | 第41-43页 |
| ·取样 | 第43页 |
| 2. 结果与分析 | 第43-49页 |
| ·猪粪样品中的耐药基因定性测定 | 第43-44页 |
| ·土壤样品中的耐药基因定性测定 | 第44-49页 |
| ·CK处理耕作层土壤可培养细菌耐药基因PCR分析 | 第45页 |
| ·PG8-20处理耕作层土壤样品可培养细菌耐药基因PCR分析 | 第45-46页 |
| ·SPG8-20处理耕作层土壤样品可培养细菌耐药基因PCR分析 | 第46页 |
| ·TC50-20处理耕作层土壤样品可培养细菌耐药基因PCR分析 | 第46-47页 |
| ·PG8-40处理20-40cm层土壤样品可培养细菌耐药基因PCR分析 | 第47-48页 |
| ·PG8-60处理40-60cm层土壤样品可培养细菌耐药基因PCR分析 | 第48-49页 |
| 第四章 结论 | 第49-51页 |
| 第五章 讨论 | 第51-54页 |
| 1.施用猪異肥对土壤耕作中耐药细菌数量的影响 | 第51页 |
| 2.施用猪粪肥对土壤耕作层中抗生素抗性基因的影响 | 第51页 |
| 3.四环素胁迫对土壤中抗生素抗性基因的影响 | 第51-52页 |
| 4.耐药细菌和抗性基因在自然状态下的垂直迁移 | 第52页 |
| 5.农业施用猪藥肥的安全性评价 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
