| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-21页 |
| ·肿瘤生成中的关键信号转导通路 | 第9-17页 |
| ·p150~(sal2)抑制肿瘤生长 | 第17-19页 |
| ·课题意义及研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 实验材料 | 第21-24页 |
| 1 质粒、菌株和细胞 | 第21页 |
| 2 主要实验试剂 | 第21-22页 |
| 3 主要实验仪器 | 第22-24页 |
| 第三章 实验方法 | 第24-32页 |
| 1 质粒构建 | 第24-28页 |
| 2 细胞培养 | 第28页 |
| 3 PEI 介导的瞬时转染 | 第28页 |
| 4 基因芯片 | 第28-29页 |
| 5 双荧光素酶报告基因检测系统检测 | 第29-30页 |
| 6 免疫印记 | 第30-31页 |
| 7 流式细胞仪检测细胞周期 | 第31-32页 |
| 第四章 实验结果 | 第32-57页 |
| 1 利用基因芯片初步筛选 p1 50~(sal2)下游基因 | 第32-36页 |
| ·芯片初步筛选得到约 2000 个表达差异 1.5 倍以上基因 | 第32-33页 |
| ·差异基因 GO(Gene Ontology)分类分析 | 第33-35页 |
| ·与肿瘤生成密切相关的表达差异基因 | 第35-36页 |
| 2 双荧光素酶报告基因检测系统对 p150~(sal2 )下游基因的筛选 | 第36-42页 |
| ·promoter-pGL3-Luc 启动子 - 报告基因重组质粒的构建 | 第36-39页 |
| ·筛选得到的下游基因 | 第39-42页 |
| 3 p150~(sal2)对 p16 启动子的调控及其作用位点 | 第42-49页 |
| ·p150~(sal2) 上调 p16 并呈质量正相关 | 第42-43页 |
| ·p16 启动子突变质粒的构建 | 第43-45页 |
| ·p150~(sal2) 通过 GGGNGGG 位点上调 p16 | 第45-47页 |
| ·进一步证实 p150~(sal2)通过 GGGNGGG 位点上调 p16 | 第47-49页 |
| 4 p150~(sal2) 通过 p16 对细胞生长的调控 | 第49-57页 |
| ·Western blot 验证 p150~(sal2) 上调 p16 表达 | 第49-51页 |
| ·p150~(sal2) 通过 p16 调控细胞周期 | 第51-57页 |
| 第五章 讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 附录一 构建报告基因-启动子巢式 PCR 引物 | 第62-64页 |
| 附录二 p16 启动子突变体的引物设计 | 第64-65页 |
| 附录三 符号说明 | 第65-67页 |
| 附录四 溶液配制 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
