| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-26页 |
| ·研究背景 | 第17-25页 |
| ·基因的表达调控 | 第17-20页 |
| ·家蚕基因启动子的研究进展 | 第20-22页 |
| ·家蚕 Bmlipase-1 基因的研究进展 | 第22-25页 |
| ·本文的主要内容 | 第25-26页 |
| ·家蚕 Bmlipase-1 基因启动子的初步分析 | 第25页 |
| ·家蚕 Bmlipase-1 基因在不同家蚕品系中的表达差异 | 第25-26页 |
| 第2章 家蚕脂肪酶 1 基因(Bmlipase-1)5’侧翼区的克隆与序列分析 | 第26-37页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·材料与试剂 | 第26-29页 |
| ·实验材料的准备 | 第26页 |
| ·菌株、工具酶和其他试剂 | 第26页 |
| ·常用试剂的配制 | 第26-28页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第28页 |
| ·生物信息学软件 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-32页 |
| ·引物的设计 | 第29页 |
| ·家蚕基因组 DNA 的提取 | 第29页 |
| ·PCR 法克隆家蚕 p50 的 Bmlipase-1 基因 5’侧翼区片段及其纯化 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶的制备与电泳 | 第30页 |
| ·玻璃奶回收 DNA | 第30页 |
| ·目的片段与 pMD18-T 载体的连接 | 第30-31页 |
| ·质粒 DNA 的转化 | 第31页 |
| ·快速破碎法鉴定重组质粒 | 第31页 |
| ·碱裂解法少量提取质粒 DNA | 第31-32页 |
| ·重组质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第32页 |
| ·甘油菌的制备及序列测定 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-35页 |
| ·家蚕 Bmlipase-1 基因 5’侧翼区片段的扩增 | 第32-33页 |
| ·重组质粒 T-lipF1R1 的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组质粒 T-lipF1R1 的测序结果与序列分析 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 家蚕脂肪酶 1 基因(Bmlipase-1)启动子的初步分析 | 第37-63页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·材料与试剂 | 第37-40页 |
| ·实验材料的准备 | 第37页 |
| ·菌株、病毒、质粒、细胞系和工具酶 | 第37页 |
| ·常用试剂和缓冲液 | 第37-38页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第38页 |
| ·数据分析软件 | 第38页 |
| ·所用引物及序列 | 第38-40页 |
| ·实验方法 | 第40-46页 |
| ·常规 PCR 反应；DNA 片段的回收；质粒的提取、酶切鉴定、连接与转化 | 第40页 |
| ·重组 Bacmid 的产生 | 第40页 |
| ·Bacmid DNA 的抽提 | 第40页 |
| ·重组 Bacmid 的鉴定和纯化 | 第40-41页 |
| ·昆虫细胞的培养 | 第41页 |
| ·Bacmid 转染 BmN 培养细胞 | 第41-42页 |
| ·病毒的大量扩增与荧光检测 | 第42页 |
| ·病毒液中 DNA 的抽提 | 第42页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第42-43页 |
| ·病毒的接种 | 第43页 |
| ·家蚕中肠组织的解剖观察 | 第43页 |
| ·报告基因在转录水平的检测 | 第43-45页 |
| ·报告基因在翻译水平的检测 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-61页 |
| ·载体质粒 pFastBac1-MCS-EGFP 的构建 | 第46-48页 |
| ·构建缺失不同启动子元件的报告质粒 | 第48-51页 |
| ·重组杆状病毒的 PCR 鉴定 | 第51-53页 |
| ·重组杆状病毒转染细胞后的荧光检测 | 第53-55页 |
| ·重组杆状病毒对家蚕的感染 | 第55-57页 |
| ·报告基因在蚕体中的转录水平 | 第57-59页 |
| ·报告基因在蚕体中的翻译水平 | 第59-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第4章 家蚕脂肪酶 1 基因(Bmlipase-1)在不同家蚕品系中的表达差异 | 第63-72页 |
| ·引言 | 第63页 |
| ·材料与试剂 | 第63-64页 |
| ·实验材料的准备 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63页 |
| ·试剂配制 | 第63页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第63页 |
| ·数据分析软件 | 第63-64页 |
| ·所用引物及序列 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-65页 |
| ·BmNPV 对家蚕的半数致死剂量(LC50)测定 | 第64页 |
| ·家蚕组织分离及中肠组织总 RNA 的提取 | 第64-65页 |
| ·反转录 PCR 和实时定量 PCR | 第65页 |
| ·结果与分析 | 第65-70页 |
| ·供试家蚕品系对 BmNPV 的抗性比较 | 第65-66页 |
| ·Bmlipase-1 在 5 龄幼虫不同组织的表达差异 | 第66页 |
| ·不同家蚕品系 5 龄幼虫中肠组织的 Bmlipase-1 表达差异 | 第66-67页 |
| ·BmNPV 诱导不同家蚕品系中肠组织中 Bmlipase-1 的表达变化 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·本章小结 | 第71-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 附录 | 第78-82页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 详细摘要 | 第84-88页 |
