| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 1. 引言 | 第12-18页 |
| ·CBF1与植物冷胁迫 | 第13-16页 |
| ·CRT/DRE的发现 | 第13-14页 |
| ·CBF转录因子的家族成员 | 第14-15页 |
| ·CBF的表达特性 | 第15页 |
| ·CBFI基因及其产物蛋白的特性 | 第15-16页 |
| ·CBF在植物冷驯化中的作用 | 第16页 |
| ·肌动蛋白简介 | 第16-17页 |
| ·研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 2. 材料和方法 | 第18-36页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌种 | 第18页 |
| ·试药和试剂 | 第18页 |
| ·实验仪器 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-30页 |
| ·幼苗的培养及低温胁迫处理 | 第19页 |
| ·兴安落叶松核酸的提取 | 第19-21页 |
| ·兴安落叶松总RNA的提取(改良的CTAB法) | 第19页 |
| ·总RNA质量的检测与浓度、纯度的测定 | 第19-20页 |
| ·兴安落叶松基因组DNA的提取(改良的CTAB法) | 第20-21页 |
| ·兴安落叶松基因组DNA质量的检测与浓度测定 | 第21页 |
| ·总RNA的反转录 | 第21-22页 |
| ·兴安落叶松LgAct基因的克隆 | 第22-26页 |
| ·兴安落叶松LgAct基因目的片段的克隆 | 第22-23页 |
| ·LgAct基因末端的克隆 | 第23-26页 |
| ·LgAct全长的扩增 | 第26-27页 |
| ·AXYGEN凝胶回收试剂盒回收目的片段 | 第27-28页 |
| ·目的DNA片段与载体连接 | 第28页 |
| ·TB法制备感受态细胞 | 第28-29页 |
| ·转化 | 第29页 |
| ·重组子的筛选与鉴定 | 第29-30页 |
| ·阳性重组子的菌液的制备及测序 | 第30页 |
| ·兴安落叶松LgCBF1基因的克隆 | 第30-36页 |
| ·兴安落叶松LgCBF1基因的克隆 | 第30-36页 |
| ·兴安落叶松LgCBF1基因的克隆 | 第30-32页 |
| ·LgCBF1表达量的检测 | 第32-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-46页 |
| ·兴安落叶松LgAct基因的克隆及序列分析 | 第36-39页 |
| ·获取兴安落叶松LgAct基因的克隆 | 第36-38页 |
| ·LgAct序列及基因结构分析 | 第38-39页 |
| ·兴安落叶松LgCBF1基因的克隆及表达分析 | 第39-46页 |
| ·兴安落叶松LgCBF1基因的克隆 | 第40-44页 |
| ·LgCBF1的半定量-PCR表达分析 | 第44-46页 |
| 4. 讨论 | 第46-49页 |
| ·简并-PCR技术要点 | 第46页 |
| ·RACE技术要点 | 第46-47页 |
| ·CBF1基因的表达 | 第47页 |
| ·LgCBF1两端序列的克隆 | 第47-49页 |
| 5. 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58页 |