| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-32页 |
| ·研究目的和意义 | 第14-15页 |
| ·大豆蛋白 | 第15-18页 |
| ·大豆蛋白的分类 | 第15-17页 |
| ·大豆蛋白的营养价值与应用 | 第17-18页 |
| ·大豆致敏蛋白 | 第18-21页 |
| ·β-伴球蛋白α亚基 | 第18-19页 |
| ·P34/Gly m Bd 30K | 第19-20页 |
| ·Gly m Bd 28K | 第20页 |
| ·大豆球蛋白酸性多肽 | 第20页 |
| ·其他致敏蛋白 | 第20-21页 |
| ·大豆抗原蛋白与食物过敏 | 第21-24页 |
| ·食物过敏 | 第21-22页 |
| ·大豆致敏蛋白引起的过敏反应 | 第22-23页 |
| ·大豆抗原蛋白脱敏处理 | 第23-24页 |
| ·大豆抗原蛋白检测研究 | 第24-27页 |
| ·免疫印记 | 第25页 |
| ·酶联免疫吸附检测(ELISA) | 第25-26页 |
| ·免疫组织化学技术 | 第26页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第26页 |
| ·高效液相(HPLC) | 第26-27页 |
| ·大豆抗原蛋白抗体制备 | 第27-30页 |
| ·过敏病人血清 | 第27页 |
| ·过敏动物血清 | 第27页 |
| ·重组表达抗原蛋白制备抗体 | 第27-28页 |
| ·合成肽制备抗体 | 第28-30页 |
| ·存在的问题、解决方案及技术路线 | 第30-32页 |
| ·存在问题及解决方案 | 第30-31页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 β-伴球蛋白α亚基cELISA 检测方法建立 | 第32-57页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料 | 第32-34页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第32页 |
| ·实验动物和植物材料 | 第32-33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·B 细胞表位预测软件 | 第33页 |
| ·主要缓冲液配制 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-41页 |
| ·蛋白提取 | 第34页 |
| ·Bradford 法蛋白定量 | 第34页 |
| ·β-伴球蛋白的α亚基切胶回收 | 第34-35页 |
| ·免疫兔子 | 第35-36页 |
| ·Western blotting | 第36-37页 |
| ·β-伴球蛋白的α亚基B 细胞表位预测 | 第37页 |
| ·抗β-伴球蛋白α亚基PcAb 和McAb 制备 | 第37-40页 |
| ·PcAb-60K-A、B 和McAb-60K 特异性分析 | 第40页 |
| ·cELISA 检测方法的建立 | 第40-41页 |
| ·β-伴球蛋白α亚基含量测定 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-54页 |
| ·α亚基切胶纯化 | 第41-42页 |
| ·α亚基B 细胞表位预测 | 第42-45页 |
| ·抗原制备 | 第45页 |
| ·PcAb-60K-A 和B 特异性 | 第45页 |
| ·McAb 的制备 | 第45-50页 |
| ·cELISA 检测方法 | 第50-53页 |
| ·大豆和豆粕中 β-伴球蛋白 α 亚基含量检测 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 第三章 P34 蛋白iELISA 检测方法建立 | 第57-74页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第57页 |
| ·实验动物和植物材料 | 第57页 |
| ·质粒和菌株 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·培养基和主要缓冲液配制 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-64页 |
| ·P34 基因和引物合成 | 第58页 |
| ·E.coli 感受态制备 | 第58-59页 |
| ·P34 原核表达载体构建 | 第59-61页 |
| ·重组P34 蛋白的原核表达 | 第61-62页 |
| ·PcAb 制备 | 第62-63页 |
| ·Western blotting 检测 | 第63页 |
| ·iELISA 检测方法的建立 | 第63页 |
| ·P34 蛋白含量测定 | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-71页 |
| ·P34 基因合成 | 第64页 |
| ·P34 原核表达载体构建 | 第64-65页 |
| ·P34 融合蛋白的原核表达 | 第65页 |
| ·P34 融合蛋白的纯化 | 第65-66页 |
| ·PcAb 制备 | 第66-68页 |
| ·Western blotting 检测 | 第68页 |
| ·iELISA 检测方法 | 第68-70页 |
| ·P34 蛋白含量 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 第四章 Gly m Bd 28K 蛋白iELISA 检测方法建立 | 第74-88页 |
| ·引言 | 第74页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-77页 |
| ·Gly m Bd 28K 基因和引物合成 | 第74页 |
| ·Gly m Bd 28K 原核表达载体构建 | 第74-75页 |
| ·重组Gly m Bd 28K 蛋白的原核表达 | 第75-76页 |
| ·PcAb 制备和效价测定 | 第76-77页 |
| ·Western blotting 检测 | 第77页 |
| ·iELISA 检测方法的建立 | 第77页 |
| ·Gly m Bd 28K 蛋白含量测定 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-86页 |
| ·Gly m Bd 28K 基因合成 | 第77-78页 |
| ·Gly m Bd 28K 原核表达载体构建 | 第78-79页 |
| ·Gly m Bd 28K 融合蛋白的原核表达 | 第79-82页 |
| ·PcAb 制备 | 第82页 |
| ·Western blotting 检测 | 第82-83页 |
| ·iELISA 检测方法 | 第83-85页 |
| ·Gly m Bd 28K 蛋白含量 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86页 |
| ·小结 | 第86-88页 |
| 第五章 大豆球蛋白酸性多肽分析和表达 | 第88-98页 |
| ·引言 | 第88页 |
| ·材料 | 第88页 |
| ·质粒和菌株 | 第88页 |
| ·主要试剂 | 第88页 |
| ·分析软件 | 第88页 |
| ·方法 | 第88-91页 |
| ·11S 球蛋白酸性多肽序列分析 | 第88页 |
| ·基因和引物合成 | 第88-89页 |
| ·原核表达载体构建 | 第89-90页 |
| ·重组蛋白的原核表达 | 第90页 |
| ·Western blotting 检测 | 第90-91页 |
| ·结果与分析 | 第91-97页 |
| ·11S 球蛋白酸性多肽同源性分析 | 第91页 |
| ·基因合成 | 第91页 |
| ·原核表达载体构建 | 第91-94页 |
| ·重组蛋白的原核表达 | 第94-97页 |
| ·Western blotting 检测 | 第97页 |
| ·讨论 | 第97页 |
| ·小结 | 第97-98页 |
| 第六章 结论 | 第98-100页 |
| 1.本研究的主要结论 | 第98-99页 |
| 2.本研究主要创新点 | 第99页 |
| 3.后续工作设想 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 作者简历 | 第112页 |
