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烟草抗病基因筛选及其高通量RNAi载体库的构建

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
第一章 引言第16-30页
   ·植物抗病基因研究进展第17-21页
     ·R 基因分类与结构域第17-18页
     ·抗病基因作用机制第18-19页
     ·抗病基因克隆第19-21页
   ·转录组测序技术第21-22页
   ·RNA 干涉技术第22-25页
     ·RNAi 作用机制第22-23页
     ·RNAi 技术特征第23页
     ·RNAi 的优势第23-24页
     ·RNAi 技术在植物生物学中的应用第24-25页
   ·RNAi 文库研究进展第25-27页
     ·通过酶学工程方法构建RNAi 文库第25-26页
     ·以重组酶为基础构建 RNAi 文库第26页
     ·利用转移性RNAi(Transitive RNAi, tRNAi)原理构建RNAi 文库第26-27页
     ·利用Gateway Cloning System 的重组反应形成RNAi 文库第27页
   ·研究的目的意义与技术路线第27-30页
     ·研究目的意义第27-28页
     ·技术路线第28-30页
第二章 烟草转录组测序及分析第30-41页
   ·材料与方法第30-31页
     ·烟草主要组织转录组测序第30页
     ·烟草转录组分析第30-31页
   ·结果与分析第31-38页
     ·比对统计第31-32页
     ·随机性评估第32-34页
     ·基因表达注释第34-37页
     ·基因结构优化和预测新转录本第37页
     ·可变剪接分析第37-38页
   ·小结与讨论第38-41页
第三章 烟草抗病基因家族鉴定第41-52页
   ·材料与方法第41-42页
     ·数据库和基因组序列来源第41页
     ·全基因组抗病基因的鉴定第41页
     ·NBS 类型基因的分类第41页
     ·NBS 类基因在染色体上的分布第41-42页
     ·NBS 类基因系统发育分析第42页
   ·结果与分析第42-50页
     ·R 基因保守结构域的鉴定第42页
     ·R 基因的类型第42-45页
     ·NBS 类抗病基因在染色体上的分布第45-46页
     ·NBS 类抗病基因的系统发生分析第46-47页
     ·R 基因表达谱第47-50页
   ·小结与讨论第50-52页
第四章 烟草抗病基因的 RNAi 文库构建与评价第52-66页
   ·材料与方法第52-56页
     ·试验材料第52页
     ·实验方法第52-56页
   ·结果与分析第56-63页
     ·烟草抗病R 基因筛选及引物合成第56-60页
     ·引物合成第60-61页
     ·入门载体库构建第61页
     ·不同浓度的PCR 产物与入门载体的连接效率第61-62页
     ·入门载体库的检测第62-63页
     ·RNAi 文库构建与质量评价第63页
   ·小结与讨论第63-66页
     ·烟草RNAi 文库构建第63-64页
     ·烟草抗病基因同源序列与抗病性第64-65页
     ·干扰片段的选择标准第65-66页
第五章 全文结论第66-68页
   ·烟草转录组水平上的基因表达谱研究第66页
   ·NBS 类抗性基因的筛选与发育系统树研究第66-67页
   ·GATEWAY 表达载体法高通量的烟草 RNAi 载体库的构建第67页
   ·本研究的创新点第67-68页
参考文献第68-77页
致谢第77-78页
作者简介第78页

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