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阉牛、公牛背最长肌消减cDNA文库的构建和差异表达基因的筛选与鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 文献综述第11-24页
   ·引言第11页
   ·阉割与性激素水平的变化第11-13页
     ·雌激素第12-13页
     ·雄激素第13页
   ·雄激素与骨骼肌作用的分子机制第13-14页
   ·基因差异表达研究方法第14-19页
     ·消减杂交法第14-15页
     ·mRNA差异显示技术第15页
     ·代表性序列差别分析第15页
     ·基因表达系列分析第15-16页
     ·基因鉴定集成法第16-17页
     ·cDNA微阵列第17页
     ·抑制消减杂交第17-19页
   ·实时定量PCR技术第19-22页
     ·定量PCR技术的特点第19-20页
     ·定量PCR技术的原理及参数第20-21页
     ·定量PCR技术的方法第21-22页
   ·本研究的目的与意义第22-24页
第二章 材料和方法第24-42页
   ·饲养试验第24-26页
     ·试验地点第24页
     ·试验材料第24页
     ·样品和数据采集第24-26页
     ·数据处理第26页
   ·抑制消减杂交试验第26-36页
     ·主要仪器和设备第26-27页
     ·试剂盒第27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·总RNA的提取和mRNA的纯化第28-29页
     ·抑制性消减杂交第29-36页
   ·反Northern杂交筛选第36-39页
     ·主要试剂第36-37页
     ·实验步骤第37-39页
   ·克隆与测序第39页
   ·生物信息学分析第39页
   ·荧光定量PCR验证和组织表达特征检测第39-42页
     ·实验所用仪器第39页
     ·试剂和引物第39-40页
     ·实验步骤第40-42页
第三章 结果与分析第42-54页
   ·中国西门塔尔牛公牛与阉牛体尺和屠宰性状分析第42-43页
   ·抑制消减杂交结果与分析第43-48页
     ·背最长肌总RNA的提取和mRNA的分离纯化第43-45页
     ·抑制消减杂交第45-46页
     ·消减杂交、抑制性PCR和消减效率检测第46-47页
     ·消减cDNA文库的构建和筛选第47-48页
     ·阳性克隆测序及序列分析第48页
   ·部分差异表达基因的Q-PCR验证和组织表达特征检测第48-50页
   ·差异表达基因序列分析第50-54页
     ·肌动蛋白2,ACTG2第50-51页
     ·原肌球蛋白 2,TPM2第51-52页
     ·胰岛素样生长因子1,IGF-1第52-53页
     ·激素敏感脂酶,HSL第53-54页
第四章 讨论第54-61页
   ·关于抑制消减杂交第54-55页
   ·关于RNA的提取和mRNA的纯化第55-56页
     ·总RNA提取中的质量控制第55页
     ·mRNA纯化过程中的质量控制第55页
     ·RNA的质量检测第55-56页
   ·差异表达基因的Q-PCR验证第56页
   ·关于差异表达基因第56-61页
     ·肌动蛋白2,ACTG2第56-57页
     ·原肌球蛋白2,TPM2第57-58页
     ·胰岛素样生长因子1,IGF-1第58-59页
     ·激素敏感脂酶,HSL第59-61页
第五章 小结第61-62页
   ·结论第61页
   ·本研究的不足之处第61-62页
参考文献第62-68页
致谢第68-69页
作者简历第69页

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