摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
第一章 引言 | 第14-30页 |
1. 文献综述 | 第14-27页 |
·抗逆相关基因 | 第14-17页 |
·晚期胚胎发生丰富蛋白 | 第14页 |
·水通道蛋白 | 第14-15页 |
·抗冻蛋白 | 第15页 |
·抗氧化酶 | 第15页 |
·转录因子 | 第15-17页 |
·植物逆境应答调控 | 第17-27页 |
·逆境应答的转录调控网络 | 第18-20页 |
·逆境应答中的蛋白激酶调控 | 第20-23页 |
·ABA 与逆境应答 | 第23-25页 |
·活性氧与逆境应答 | 第25-27页 |
2. 研究背景、目的及意义 | 第27-29页 |
3. 实验设计 | 第29-30页 |
第二章 玉米内源系统中NCP1 与ABP9 基因的表达谱分析 | 第30-38页 |
1 材料与方法 | 第30-33页 |
·材料 | 第30页 |
·植物材料 | 第30页 |
·化学试剂和试剂盒 | 第30页 |
·仪器 | 第30页 |
·引物 | 第30页 |
·方法 | 第30-33页 |
·玉米材料的处理 | 第30-31页 |
·植物材料总RNA 的提取 | 第31页 |
·RNA 电泳 | 第31页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第31-32页 |
·实时荧光定量PCR(Real-Time Quantitative PCR) | 第32-33页 |
2 结果与分析 | 第33-37页 |
·玉米逆境处理后RNA 提取结果 | 第33页 |
·CDNA 中基因组DNA 污染检测 | 第33页 |
·NCP1、ABP9 和ACTIN1 基因引物的效率验证实验 | 第33-34页 |
·实时荧光定量PCR 分析结果 | 第34-37页 |
·10μM ABA 处理后玉米幼苗中ABP9 和NCP1 的表达 | 第34-35页 |
·0.8% NaCl 处理后玉米幼苗中ABP9 和NCP1 的表达 | 第35页 |
·16% PEG6000 处理后玉米幼苗中ABP9 和NCP1 的表达 | 第35-36页 |
·60mM H_2O_2处理后玉米幼苗中ABP9 和NCP1 的表达 | 第36页 |
·4℃冷处理后玉米幼苗中ABP9 和NCP1 的表达 | 第36-37页 |
3. 本章小结 | 第37-38页 |
第三章 转NCP1 基因拟南芥的逆境生理分析 | 第38-51页 |
1. 材料与方法 | 第38-44页 |
·材料 | 第38-39页 |
·实验材料 | 第38页 |
·菌株 | 第38页 |
·载体 | 第38页 |
·工具酶和修饰酶 | 第38页 |
·分子量标准 | 第38页 |
·化学试剂 | 第38页 |
·试剂盒 | 第38页 |
·测序 | 第38-39页 |
·引物 | 第39页 |
·方法 | 第39-44页 |
·植物稳定转化表达载体pCHF3-NCP1 的建构 | 第39页 |
·农杆菌GV3101 电击感受态细胞的制备和农杆菌转化 | 第39-40页 |
·农杆菌质粒DNA 的提取及农杆菌转化子的PCR 检测方法 | 第40-41页 |
·拟南芥转化 | 第41页 |
·纯系筛选 | 第41-42页 |
·转基因拟南芥的抗逆性鉴定 | 第42-43页 |
·ROS 染色 | 第43-44页 |
2. 结果与分析 | 第44-50页 |
·转NCP1 基因拟南芥纯系植株的获得 | 第44-45页 |
·转NCP1 基因拟南芥的抗逆性鉴定 | 第45-50页 |
·抗旱性鉴定 | 第45-46页 |
·抗盐性鉴定 | 第46-48页 |
·抗寒性鉴定 | 第48-49页 |
·ROS 染色 | 第49-50页 |
3. 本章小结 | 第50-51页 |
第四章 转NCP1 和ABP9 拟南芥的逆境生理及基因表达分析 | 第51-66页 |
1. 材料与方法 | 第51-53页 |
·材料 | 第51页 |
·植物材料 | 第51页 |
·引物 | 第51页 |
·试剂 | 第51页 |
·方法 | 第51-53页 |
·NCP1 转基因植株和ABP9 转基因植株的杂交 | 第51-52页 |
·ABA 实验 | 第52页 |
·转基因拟南芥植株的抗逆性鉴定 | 第52页 |
·ROS 染色 | 第52页 |
·逆境相关基因的实时荧光定量PCR 分析 | 第52-53页 |
2. 结果与分析 | 第53-64页 |
·NCP1 转基因植株和ABP9 转基因植株的杂交实验结果 | 第53-54页 |
·杂交株系的表达分析 | 第53-54页 |
·ABA 实验 | 第54-58页 |
·ABA 对转基因拟南芥种子萌发的影响 | 第54页 |
·ABA 对转基因拟南芥根伸长的影响 | 第54-56页 |
·ABA 对转基因拟南芥幼苗生长的影响 | 第56-57页 |
·ABA 对转基因拟南芥气孔开度的影响 | 第57-58页 |
·NCP1 和ABP9 基因双表达株系的抗逆性鉴定 | 第58-60页 |
·抗旱实验 | 第58-59页 |
·抗盐实验 | 第59-60页 |
·ROS 染色实验 | 第60-62页 |
·NBT 染色实验 | 第60-61页 |
·DAB 染色实验 | 第61-62页 |
·开花表型统计 | 第62页 |
·逆境相关基因的实时荧光定量PCR 分析 | 第62-64页 |
·ROS 代谢相关功能和调控基因的实时荧光定量PCR 分析 | 第62-63页 |
·逆境相关基因的实时荧光定量PCR 分析 | 第63-64页 |
3. 本章小结 | 第64-66页 |
第五章 结论与讨论 | 第66-69页 |
参考文献 | 第69-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简历 | 第74页 |