| 目录 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 主要缩写符号说明 | 第16-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-36页 |
| ·植物二萜类化合物生物合成途径及其关键酶研究 | 第17-24页 |
| ·植物萜类化合物共同生源途径 | 第17-19页 |
| ·植物二萜类化合物生物合成途径及相关酶分析 | 第19-22页 |
| ·植物二萜类化合物GGPP下游生物合成途径研究现状及关键酶分析 | 第22-24页 |
| ·丹参二萜类化合物丹参酮类成分的研究进展 | 第24-32页 |
| ·丹参研究概况 | 第24-26页 |
| ·丹参酮类化合物化学成分研究 | 第26-31页 |
| ·丹参酮类化合物生物合成途径及关键酶研究现状 | 第31-32页 |
| ·丹参酮类化合物生物合成相关酶基因克隆及功能研究 | 第32-36页 |
| ·研究意义 | 第32-33页 |
| ·研究背景 | 第33-34页 |
| ·研究思路及技术路线 | 第34-36页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第36-60页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·植物材料来源 | 第36页 |
| ·菌株和质粒 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-60页 |
| ·植物材料培养及处理方法 | 第37-38页 |
| ·核酸实验技术与方法 | 第38-50页 |
| ·蛋白实验技术与方法 | 第50-60页 |
| 第3章 丹参柯巴基焦磷酸合酶基因cDNA全长克隆及其分析 | 第60-78页 |
| ·实验材料与方法 | 第60-63页 |
| ·菌株、载体和试剂盒 | 第60-61页 |
| ·丹参总RNA提取 | 第61页 |
| ·引物设计及合成 | 第61页 |
| ·cDNA末端快速扩增 | 第61页 |
| ·全长cDNA的克隆和测序 | 第61-62页 |
| ·SmCPS的序列分析 | 第62页 |
| ·SmCPS基因组序列扩增 | 第62-63页 |
| ·丹参柯巴基焦磷酸合酶基因表达分析 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-77页 |
| ·丹参总RNA | 第63-64页 |
| ·5`RACE | 第64-65页 |
| ·3`RACE | 第65页 |
| ·SmCPS全长序列 | 第65-66页 |
| ·SmCPS序列分析 | 第66-75页 |
| ·SmCPS基因组序列扩增 | 第75页 |
| ·丹参柯巴基焦磷酸合酶基因表达分析 | 第75-77页 |
| ·讨论与小结 | 第77-78页 |
| 第4章 丹参类贝壳杉烯合酶基因cDNA全长克隆及分析 | 第78-90页 |
| ·实验材料与方法 | 第78-80页 |
| ·菌株、载体和试剂盒 | 第78页 |
| ·丹参总RNA提取 | 第78页 |
| ·引物设计及合成 | 第78-79页 |
| ·cDNA末端快速扩增 | 第79页 |
| ·全长cDNA的克隆和测序 | 第79-80页 |
| ·SmKSL序列特征性分析 | 第80页 |
| ·丹参类贝壳杉烯合酶基因表达分析 | 第80页 |
| ·结果与分析 | 第80-89页 |
| ·丹参总RNA | 第80页 |
| ·5`RACE | 第80-81页 |
| ·3`RACE | 第81-82页 |
| ·SmKSL全长序列 | 第82页 |
| ·SmKSL生物信息学分析 | 第82-88页 |
| ·丹参类贝壳杉烯合酶表达分析 | 第88-89页 |
| ·讨论与小结 | 第89-90页 |
| 第5章 丹参柯巴基焦磷酸合酶基因表达、纯化及功能鉴定 | 第90-110页 |
| ·材料和方法 | 第90-96页 |
| ·菌株、载体、质粒和试剂 | 第90-92页 |
| ·丹参柯巴基焦磷酸合酶原核表达载体构建 | 第92页 |
| ·pET32CPS诱导表达 | 第92-93页 |
| ·表达条件的优化 | 第93页 |
| ·重组SmCPS蛋白的纯化 | 第93页 |
| ·重组SmCPS蛋白的蛋白免疫印迹 | 第93页 |
| ·重组SmCPS蛋白LC-ESI-MS/MS分析鉴定 | 第93-94页 |
| ·酶促反应 | 第94-95页 |
| ·反应产物GC-MS检测 | 第95页 |
| ·丹参CPS蛋白多克隆抗体的制备及鉴定 | 第95-96页 |
| ·结果与分析 | 第96-108页 |
| ·丹参柯巴基焦磷酸合酶原核表达载体的构建 | 第96-97页 |
| ·E.coli[pET32CPS]的诱导表达 | 第97页 |
| ·E.coli[pET32CPS]表达条件的优化 | 第97-103页 |
| ·重组蛋白纯化及免疫印迹 | 第103-104页 |
| ·重组SmCPS氨基酸序列LC-ESI-MS/MS分析鉴定 | 第104-105页 |
| ·丹参柯巴基焦磷酸合酶的功能鉴定 | 第105-107页 |
| ·重组CPS蛋白抗血清的制备及鉴定 | 第107-108页 |
| ·讨论与小结 | 第108-110页 |
| 第6章 丹参类贝壳杉烯合酶基因原核表达及功能研究 | 第110-122页 |
| ·材料和方法 | 第110-114页 |
| ·菌株、载体、质粒和试剂 | 第110页 |
| ·SmKSL基因原核表达载体构建 | 第110-112页 |
| ·pET32KSL诱导表达 | 第112页 |
| ·重组SmKSL蛋白LC-ESI-MS/MS分析鉴定 | 第112-113页 |
| ·SmKSL催化反应酶的制备 | 第113页 |
| ·酶促反应 | 第113-114页 |
| ·反应产物的结构鉴定 | 第114页 |
| ·结果与分析 | 第114-120页 |
| ·丹参类贝壳杉烯原核表达载体的构建 | 第114-115页 |
| ·E.coli[pET32KSL]的诱导表达 | 第115-116页 |
| ·重组pET32KSL氨基酸序列LC-ESI-MS/MS分析鉴定 | 第116-117页 |
| ·丹参类贝壳杉烯功能鉴定 | 第117-120页 |
| ·讨论与小结 | 第120-122页 |
| 第7章 结论 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 个人简历、博士期间发表论文和研究成果 | 第135页 |
