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陆地棉核雄性不育基因的分子标记定位及相关基因的克隆和功能分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
主要缩略词表第13-15页
第一章 棉花核雄性不育的研究与应用第15-31页
 1 棉花雄性不育的类型第15-17页
 2 棉花核雄性不育类型第17-18页
 3 棉花核雄性不育的获得第18-20页
   ·自然突变体选择第18页
   ·基因重组第18-19页
   ·人工诱变第19页
   ·杂交转育第19页
   ·回交转育第19页
   ·生物技术创造第19-20页
 4 棉花核雄性不育败育的时期和细胞学特征第20-21页
   ·核雄性不育败育的时期第20页
   ·棉花核雄性不育败育细胞学特征第20-21页
 5 棉花核雄性不育生理生化机理第21-22页
   ·棉花核雄性不育与碳水化合物第21页
   ·棉花核雄性不育与游离氨基酸第21-22页
   ·棉花核雄性不育与酶第22页
   ·棉花核雄性不育与激素的关系第22页
 6 棉花核雄性不育的分子机理第22-23页
 7 棉花核雄性不育在育种上的应用第23-31页
   ·利用棉花核雄性不育生产杂交种子的途径第23-27页
   ·棉花核雄性不育在育种上的应用第27-29页
   ·棉花核雄性不育在群体改良中的应用第29-31页
第二章 植物雄性不育基因克隆和功能基因组学技术的研究进展第31-39页
 1 转座子标签法第31-32页
   ·转座子的原理第31-32页
   ·转座子技术的主要步骤第32页
   ·转座子技术在植物雄性不育基因克隆上的应用第32页
 2 T-DNA标签法第32-34页
   ·T-DNA标签法的原理第32-33页
   ·T-DNA标签法的主要步骤第33页
   ·T-DNA标签法在植物雄性不育基因克隆上的应用第33页
   ·T-DNA标签法应用的前景第33-34页
 3 图位克隆法第34-35页
   ·图位克隆法的原理第34页
   ·图位克隆法的主要步骤第34页
   ·图位克隆技术的局限性及应用前景第34-35页
   ·图位克隆技术在植物育性恢复基因克隆上的应用第35页
 4 mRNA差异展示第35-37页
   ·mRNA差异展示的原理和步骤第36页
   ·mRNA差异展示的改进第36-37页
   ·mRNA差异展示的优缺点第37页
 5 本研究的目的、意义和内容第37-39页
第三章 陆地棉核不育基因ms_(15)和ms_5ms_6的分子标记定位第39-57页
 1 材料与方法第39-46页
   ·试验材料第39-40页
   ·作图群体的构建第40-42页
   ·育性调查第42-43页
   ·棉花基因组DNA(微量)提取第43-44页
   ·SSR标记第44-45页
   ·SRAP标记第45-46页
   ·数据分析和遗传图谱的构建第46页
 2 结果与分析第46-53页
   ·阆A的定位结果与分析第46-49页
   ·中抗A的核雄性不育遗传分析及基因定位第49-52页
   ·ms_5和ms_(15)整合图谱的构建第52-53页
 3 讨论第53-55页
   ·棉花杂种优势利用中核不育系与人工去雄、胞质不育系的比较第53-54页
   ·ms_5和ms_(15)是否为同一个基因第54页
   ·与ms_(15)连锁标记的应用第54-55页
   ·双隐性核不育系的应用第55页
   ·与ms_5和ms_6紧密连锁分子标记的应用第55-57页
第四章 DDRT-PCR技术克隆陆地棉阆A核雄性不育表达的相关基因第57-89页
 1 材料与方法第58-62页
   ·材料第58页
   ·细胞学观察第58-59页
   ·RNA的提取与CDNA第一链的合成第59页
   ·DDRT-PCR第59-60页
   ·差异片段的回收、连接和测序第60页
   ·实时定量PCR分析第60-61页
   ·显著性分析第61-62页
   ·同源性分析第62页
 2 结果与分析第62-85页
   ·棉花总RNA提取及质量检测第62页
   ·差异显示(DDRT-PCR)第62-64页
   ·差异片段的BLAST结果第64-69页
   ·DDRT克隆出的片段序列代谢分析第69-70页
   ·实时荧光定量PCR第70-79页
   ·部分阳性克隆的生物信息学分析第79-85页
 3 讨论第85-89页
第五章 棉花过氧化酶基因Ghpod的克隆与特征分析第89-105页
 1 材料与方法第90-96页
   ·材料第90页
   ·方法第90-96页
 2 结果与分析第96-102页
   ·Ghpod全长cDNA和基因组序列的获得与功能分析第96-99页
   ·Ghpod与棉花中已报道的20个过氧化酶的多重比较第99-101页
   ·Ghpod的进化树分析第101页
   ·Ghpod的表达分析第101-102页
 3 讨论第102-105页
第六章 棉花磷酸诱导蛋白Phi-1基因的克隆及功能分析第105-123页
 1 材料与方法第105-111页
   ·实验材料第105-107页
   ·方法第107-111页
 2 结果与分析第111-121页
   ·棉花Phi-1基因的获得及序列分析第111-113页
   ·棉花Phi-1基因的多重序列比对第113-114页
   ·棉花Phi-1基因的表达分析第114-115页
   ·正义载体PBI121-Phi-1的构建及其转化第115-117页
   ·转正义phi-1基因植株的培育及分子检测第117-119页
   ·WT与转PHI-1基因拟南芥的生长素合成酶基因ipdc的RT-PCR和实时荧光定量PCR分析第119-121页
 3 讨论第121-123页
全文总结第123-125页
参考文献第125-141页
攻读博士期间发表论文第141-143页
致谢第143页

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