| 中文摘要 | 第1-15页 |
| 英文摘要 | 第15-17页 |
| 1 前言 | 第17-34页 |
| ·食药用菌多糖的提取、分离纯化与结构分析 | 第17-24页 |
| ·食药用真菌多糖的提取 | 第17-18页 |
| ·食药用菌多糖的分离纯化 | 第18-19页 |
| ·分离纯化 | 第18页 |
| ·纯度鉴定 | 第18页 |
| ·分子量测定 | 第18-19页 |
| ·食药用真菌多糖的结构分析 | 第19-24页 |
| ·化学方法 | 第20页 |
| ·波谱学方法 | 第20-24页 |
| ·多糖的抗病毒生物活性 | 第24-28页 |
| ·多糖的抗动物病毒作用 | 第27页 |
| ·多糖的抗植物病毒作用 | 第27-28页 |
| ·抗植物病毒作用机制 | 第28-30页 |
| ·抑制病毒侵染 | 第28-29页 |
| ·钝化病毒 | 第28页 |
| ·作用于病毒侵染位点 | 第28-29页 |
| ·抑制病毒复制 | 第29页 |
| ·诱导寄主产生抗病性 | 第29-30页 |
| ·毛头鬼伞药理活性研究 | 第30-32页 |
| ·降血糖作用 | 第30页 |
| ·降血脂作用 | 第30页 |
| ·提高免疫活性作用 | 第30-31页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第31页 |
| ·抗病毒活性 | 第31页 |
| ·抑菌作用及其毒性 | 第31-32页 |
| ·本研究的目的意义及主要技术路线 | 第32-34页 |
| 2 毛头鬼伞多糖的分离纯化和理化性质 | 第34-60页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-41页 |
| ·毛头鬼伞子实体多糖的制备 | 第35页 |
| ·毛头鬼伞菌丝体多糖的制备 | 第35-36页 |
| ·毛头鬼伞菌株CC969菌丝体液态培养条件研究 | 第35-36页 |
| ·毛头鬼伞菌丝体胞外多糖和胞内多糖的提取 | 第36页 |
| ·毛头鬼伞子实体多糖抗TMV活性成分的分离纯化 | 第36-37页 |
| ·乙醇分级沉淀 | 第36-37页 |
| ·DEAE-Sephadex A-25柱层析 | 第37页 |
| ·多糖的Sepharose6B凝胶柱层析 | 第37页 |
| ·毛头鬼伞多糖中中性糖、还原糖、蛋白和硫酸基含量测定 | 第37-39页 |
| ·多糖中中性糖含量测定 | 第37-38页 |
| ·多糖中蛋白质含量的测定 | 第38页 |
| ·多糖中还原糖含量的测定 | 第38页 |
| ·多糖中硫酸基含量的测定 | 第38-39页 |
| ·毛头鬼伞多糖肝素效价测定 | 第39-40页 |
| ·毛头鬼伞多糖理化性质定性分析 | 第40页 |
| ·多糖纯度鉴定 | 第40页 |
| ·多糖分子量测定 | 第40页 |
| ·紫外光谱分析 | 第40页 |
| ·红外光谱分析 | 第40-41页 |
| ·刚果红实验 | 第41页 |
| ·多糖与天青A作用实验 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-58页 |
| ·毛头鬼伞菌株CC969菌丝体液态培养条件研究 | 第41-46页 |
| ·毛头鬼伞子实体多糖的分离纯化 | 第46-47页 |
| ·多糖中还原糖、中性糖、蛋白和硫酸基含量 | 第47-50页 |
| ·多糖肝素效价测定 | 第50页 |
| ·多糖纯度鉴定 | 第50-51页 |
| ·多糖分子量测定 | 第51-53页 |
| ·多糖的紫外光谱分析 | 第53-54页 |
| ·多糖的红外光谱分析 | 第54-56页 |
| ·多糖的理化性质定性分析 | 第56页 |
| ·多糖CCP60a对刚果红最大吸收波长的影响 | 第56-57页 |
| ·多糖CCP60a与天青A作用 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 3 毛头鬼伞子实体多糖CCP60a的结构鉴定 | 第60-75页 |
| ·材料和方法 | 第60-62页 |
| ·多糖CCP1中单糖组成的气相色谱法(GC) | 第60页 |
| ·多糖CCP60a中单糖组成的高效阴离子色谱法(HPAEC) | 第60-61页 |
| ·甲基化分析(糖残基连接方式分析) | 第61-62页 |
| ·核磁共振分析(NMR) | 第62页 |
| ·结果与分析 | 第62-73页 |
| ·毛头鬼伞多糖CCP1中单糖的气相色谱分析 | 第62-65页 |
| ·多糖CCP60a中单糖组成的高效阴离子色谱法(HPAEC) | 第65-66页 |
| ·多糖CCP60a的甲基化分析 | 第66-70页 |
| ·多糖CCP60a的核磁共振氢谱(~1H NMR)和核磁共振碳谱(~(13)C NMR)分析 | 第70-73页 |
| ·小结 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| 4 毛头鬼伞(Coprinus comatus)多糖抗烟草花叶病毒(TMV)活性 | 第75-83页 |
| ·材料与方法 | 第75-78页 |
| ·材料 | 第75-76页 |
| ·供试药剂 | 第75页 |
| ·供试烟草品种 | 第75页 |
| ·供试TMV毒源 | 第75页 |
| ·TMV抗血清 | 第75页 |
| ·试剂 | 第75页 |
| ·仪器 | 第75-76页 |
| ·方法 | 第76-78页 |
| ·TMV的提纯 | 第76-77页 |
| ·毛头鬼伞多糖对TMV的体外抑制作用 | 第77页 |
| ·毛头鬼伞多糖对TMV侵染位点的影响 | 第77页 |
| ·毛头鬼伞子实体多糖抑制TMV复制作用的测定 | 第77-78页 |
| ·数据分析方法 | 第78页 |
| ·结果与分析 | 第78-82页 |
| ·烟草花叶病毒(TMV)的提纯 | 第78页 |
| ·毛头鬼伞多糖对TMV的体外抑制作用 | 第78-79页 |
| ·毛头鬼伞多糖对TMV侵染位点的影响 | 第79-80页 |
| ·毛头鬼伞子实体多糖CCP60a抑制TMV复制作用的结果分析 | 第80-82页 |
| ·小结与讨论 | 第82-83页 |
| 5 毛头鬼伞多糖CCP60a对TMV病毒粒体的影响 | 第83-87页 |
| ·材料和方法 | 第83页 |
| ·毛头鬼伞多糖与TMV病毒粒子互作的紫外光谱分析 | 第83页 |
| ·电镜下观察毛头鬼伞多糖对TMV粒子形态的影响 | 第83页 |
| ·样品处理方法 | 第83页 |
| ·电镜观察 | 第83页 |
| ·结果与分析 | 第83-85页 |
| ·毛头鬼伞多糖与病毒粒子的紫外光谱 | 第83-84页 |
| ·电镜下观察毛头鬼伞多糖对TMV粒体结构的影响 | 第84-85页 |
| ·小结 | 第85页 |
| ·讨论 | 第85-87页 |
| 6 毛头鬼伞多糖CCP60a对游离TMV-RNA的降解作用 | 第87-91页 |
| ·材料与方法 | 第87页 |
| ·TMV-RNA的提取及电泳检测 | 第87页 |
| ·对TMV-RNA的降解作用 | 第87页 |
| ·结果与分析 | 第87-89页 |
| ·TMV-RNA的制备及检测 | 第87-88页 |
| ·对TMV-RNA的降解作用 | 第88-89页 |
| ·小结 | 第89页 |
| ·讨论 | 第89-91页 |
| 7 应用Real Time PCR鉴定毛头鬼伞多糖CCP60a对TMV-RNA含量的影响 | 第91-112页 |
| ·材料与方法 | 第91-95页 |
| ·材料及设备 | 第91页 |
| ·样品处理方法 | 第91页 |
| ·引物的设计与合成 | 第91-92页 |
| ·目的基因的克隆 | 第92-95页 |
| ·Trizol法提取烟草总RNA | 第92页 |
| ·RNA的反转录及PCR反应 | 第92-93页 |
| ·目的条带回收 | 第93页 |
| ·连接 | 第93页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的简易制备 | 第93-94页 |
| ·转化 | 第94页 |
| ·质粒提取 | 第94页 |
| ·重组克隆的 PCR鉴定 | 第94页 |
| ·重组克隆的酶切鉴定 | 第94页 |
| ·测序 | 第94-95页 |
| ·目的基因与管家基因的Real Time PCR检测 | 第95页 |
| ·RNA的提取 | 第95页 |
| ·cDNA的合成的反应体系 | 第95页 |
| ·目的基因与管家基因Real Time PCR反应 | 第95页 |
| ·结果与分析 | 第95-107页 |
| ·目的基因克隆 | 第95-98页 |
| ·PCR扩增 | 第95-96页 |
| ·克隆 | 第96-97页 |
| ·测序 | 第97-98页 |
| ·标准品Real Time PCR结果分析 | 第98-104页 |
| ·目的基因(replicase和cp)和管家基因(actin)PCR扩增曲线 | 第98-99页 |
| ·目的基因(replicase和cp)和管家基因(actin)融解曲线分析 | 第99-100页 |
| ·目的基因(replicase和cp)和管家基因(actin)标准曲线制作 | 第100-104页 |
| ·样品Real Time PCR结果分析 | 第104-107页 |
| ·目的基因与管家基因Real Time PCR扩增曲线 | 第104-105页 |
| ·目的基因与管家基因的原始定量结果 | 第105-106页 |
| ·目的基因与管家基因的相对定量结果 | 第106-107页 |
| ·小结 | 第107页 |
| ·讨论 | 第107-112页 |
| ·关于植物总RNA的提取 | 第107-108页 |
| ·关于Real Time PCR的引物 | 第108页 |
| ·关于Real Time PCR检测 | 第108-110页 |
| ·关于House keeping Gene(管家基因)的选择 | 第110-112页 |
| 8 毛头鬼伞多糖CCP60a对TMV外壳蛋白的影响 | 第112-118页 |
| ·材料和方法 | 第112-114页 |
| ·TMV的提纯 | 第112页 |
| ·TMV外壳蛋白(TMV-CP)的制备 | 第112页 |
| ·外壳蛋白(CP)的检测 | 第112页 |
| ·外壳蛋白的紫外检测 | 第112页 |
| ·外壳蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第112页 |
| ·多糖对病毒外壳蛋白体外聚合过程的影响 | 第112-113页 |
| ·Western Blotting方法鉴定毛头鬼伞多糖对TMV外壳蛋白含量的影响 | 第113-114页 |
| ·样品前处理 | 第113页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第113页 |
| ·转膜 | 第113页 |
| ·Westren Blotting | 第113-114页 |
| ·结果与分析 | 第114-117页 |
| ·外壳蛋白的检测 | 第114-115页 |
| ·外壳蛋白的紫外检测 | 第114页 |
| ·外壳蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第114-115页 |
| ·毛头鬼伞多糖对TMV外壳蛋白体外聚合过程的影响 | 第115-116页 |
| ·Western Blotting方法鉴定毛头鬼伞多糖对TMV外壳蛋白含量的影响 | 第116-117页 |
| ·小结与讨论 | 第117-118页 |
| 9 毛头鬼伞多糖CCP60a对寄主诱导抗病性的影响 | 第118-131页 |
| ·材料与方法 | 第118-120页 |
| ·毛头鬼伞多糖CCP60a对烟草防御酶活性测定 | 第118-119页 |
| ·酶液提取 | 第118页 |
| ·酶活测定 | 第118-119页 |
| ·毛头鬼伞多糖CCP60a对烟草POD、PPO同工酶谱的影响 | 第119页 |
| ·毛头鬼伞多糖CCP60a对寄主叶绿素含量的影响 | 第119页 |
| ·HPLC法测定毛头鬼伞多糖CCP60a对烟草叶片水杨酸含量的影响 | 第119-120页 |
| ·烟草叶片中SA的提取 | 第120页 |
| ·测定波长的选择 | 第120页 |
| ·HPLC检测条件 | 第120页 |
| ·标准曲线建立 | 第120页 |
| ·结果与分析 | 第120-129页 |
| ·毛头鬼伞多糖CCP60a对烟草防御酶活性测定 | 第120-123页 |
| ·不同处理对烟草叶片POD活性的影响 | 第120-121页 |
| ·不同处理对烟草叶片PPO活性的影响 | 第121页 |
| ·不同处理对烟草叶片PAL活性的影响 | 第121-122页 |
| ·不同处理对烟草叶片β-1，3-葡聚糖酶活性的影响 | 第122-123页 |
| ·不同处理对烟草叶片几丁质酶活性的影响 | 第123页 |
| ·不同处理对烟草叶片POD、PPO同工酶谱的变化 | 第123-124页 |
| ·毛头鬼伞多糖CCP60a对烟草植株叶绿素含量的影响 | 第124-125页 |
| ·HPLC法测定毛头鬼伞多糖CCP60a对烟草叶片水杨酸(SA)含量的影响 | 第125-129页 |
| ·SA的紫外波谱扫描 | 第125-126页 |
| ·标准曲线制作 | 第126页 |
| ·烟草叶片中SA的HPLC检测 | 第126-128页 |
| ·方法的添加回收率 | 第128-129页 |
| ·CCP60a对感病品种普通烟烟K_(326)叶片中SA含量的影响 | 第129页 |
| ·小结与讨论 | 第129-131页 |
| 10 总讨论 | 第131-137页 |
| ·关于食(药)用菌的液体深层发酵 | 第131-132页 |
| ·关于毛头鬼伞多糖的分离纯化与结构鉴定 | 第132-134页 |
| ·关于多糖的抗病毒特性和作用机制 | 第134-135页 |
| ·有待于进一步探讨的问题 | 第135-136页 |
| ·食用菌多糖的应用前景 | 第136-137页 |
| 11 总结 | 第137-138页 |
| 参考文献 | 第138-146页 |
| 附录1 缩略词表 | 第146-148页 |
| 附录2 攻读博士学位期间发表(投稿)论文目录 | 第148-149页 |
| 致谢 | 第149页 |
