| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-46页 |
| ·黄素依赖型双组分单加氧酶简介 | 第16-18页 |
| ·生物脱硫和二苯并噻吩单加氧酶 | 第18-22页 |
| ·生物脱硫的背景 | 第18-19页 |
| ·碳碳键裂解途径 | 第19-20页 |
| ·硫氧化途径 | 第20页 |
| ·硫专一性代谢途径 | 第20-21页 |
| ·DszC简介 | 第21-22页 |
| ·活性氧的产生和清除 | 第22-24页 |
| ·活性氧的来源 | 第23页 |
| ·超氧化物歧化酶和过氧化氢酶 | 第23-24页 |
| ·抗氧化体系和外源有机物代谢的关系 | 第24页 |
| ·生物催化合成靛蓝和靛玉红简介 | 第24-28页 |
| ·催化吲哚羟基化的微生物和酶 | 第25页 |
| ·吲哚羟基化的区域选择性 | 第25-26页 |
| ·靛蓝和靛玉红的生产 | 第26-28页 |
| ·氧化还原反应辅因子再生的研究 | 第28-30页 |
| ·全细胞生物催化简介 | 第30-31页 |
| ·本文主要研究内容 | 第31-32页 |
| ·参考文献 | 第32-46页 |
| 第二章 二苯并噻吩单加氧酶催化DBT特性研究 | 第46-72页 |
| ·材料与方法 | 第46-52页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·菌株和培养基 | 第48-50页 |
| ·DszC蛋白纯化 | 第50页 |
| ·DszD蛋白纯化 | 第50页 |
| ·DszC对于DBT的活力分析 | 第50-51页 |
| ·DszC对于吲哚的活力分析 | 第51页 |
| ·DszD活力测定 | 第51-52页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第52页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第52页 |
| ·过氧化氢浓度测定 | 第52页 |
| ·序列分析 | 第52页 |
| ·结果和讨论 | 第52-66页 |
| ·蛋白质的表达和纯化 | 第53-54页 |
| ·DszC既可以利用FMNH_2也可以利用FADH_2 | 第54-58页 |
| ·还原黄素的自氧化 | 第58-61页 |
| ·过氧化氢酶对反应的影响 | 第61-63页 |
| ·DszC催化吲哚的反应 | 第63-66页 |
| ·本章小结 | 第66页 |
| ·参考文献 | 第66-72页 |
| 第三章 脱硫基因的表达对菌体抗氧化蛋白产生的影响 | 第72-88页 |
| ·材料和方法 | 第72-77页 |
| ·主要试剂 | 第72-73页 |
| ·主要仪器 | 第73页 |
| ·菌株和质粒 | 第73-75页 |
| ·粗酶液的制备 | 第75页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第75页 |
| ·超氧化物歧化酶的活性染色 | 第75-76页 |
| ·过氧化氢酶活力的测定 | 第76-77页 |
| ·结果和讨论 | 第77-84页 |
| ·E.coli BL21(DE3)(pECD1)的构建 | 第77页 |
| ·硫源对于超氧化物歧化酶表达谱的影响 | 第77-80页 |
| ·脱硫基因表达对菌体过氧化氢酶活力的影响 | 第80-84页 |
| ·本章小结 | 第84-85页 |
| ·参考文献 | 第85-88页 |
| 第四章 利用葡萄糖脱氢酶构建辅因子再生体系 | 第88-100页 |
| ·材料和方法 | 第88-93页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第88-89页 |
| ·菌株和培养基 | 第89页 |
| ·分子操作 | 第89-91页 |
| ·葡萄糖脱氢酶的制备 | 第91-92页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第92页 |
| ·葡萄糖脱氢酶活力测定 | 第92页 |
| ·辅因子循环体系的建立 | 第92-93页 |
| ·吲哚转化产物的测定 | 第93页 |
| ·结果和讨论 | 第93-97页 |
| ·GDH的基因克隆、表达和纯化 | 第93-94页 |
| ·利用GDH构建辅因子再生体系 | 第94-97页 |
| ·本章小结 | 第97-98页 |
| ·参考文献 | 第98-100页 |
| 第五章 全细胞共表达DszC和DszD催化吲哚及取代吲哚的转化 | 第100-118页 |
| ·材料和方法 | 第100-103页 |
| ·实验材料 | 第100-101页 |
| ·主要实验仪器 | 第101页 |
| ·菌株 | 第101页 |
| ·生物催化剂的制备 | 第101-102页 |
| ·生物转化过程 | 第102页 |
| ·样品分析 | 第102页 |
| ·靛玉红的制备 | 第102-103页 |
| ·结果和讨论 | 第103-114页 |
| ·三种全细胞形式的催化剂的比较选择 | 第103-105页 |
| ·IPTG诱导时机的选择 | 第105-106页 |
| ·转化吲哚生成靛蓝的条件优化 | 第106-109页 |
| ·吲哚浓度对转化的影响 | 第109-110页 |
| ·靛玉红的产生 | 第110-113页 |
| ·全细胞转化取代吲哚 | 第113-114页 |
| ·本章小结 | 第114-115页 |
| ·参考文献 | 第115-118页 |
| 附录 | 第118-161页 |
| 结束语 | 第161-164页 |
| 致谢 | 第164-165页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第165页 |
