| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-29页 |
| ·神经干细胞概述 | 第11-16页 |
| ·干细胞的定义 | 第11页 |
| ·神经干细胞的定义 | 第11-12页 |
| ·神经干细胞存在位点和鉴定 | 第12-15页 |
| ·神经干细胞的体外培养 | 第15-16页 |
| ·低温保存技术概述 | 第16-26页 |
| ·低温保存技术的发展历史 | 第17-18页 |
| ·低温冷冻保护剂 | 第18-20页 |
| ·低温冷冻保存的方法 | 第20-24页 |
| ·低温损伤机理及假说 | 第24-26页 |
| ·神经干细胞低温保存面临的问题 | 第26-28页 |
| ·神经干细胞面临的问题 | 第26页 |
| ·低温保存神经干细胞及其需要解决的问题 | 第26-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 2 神经干细胞的获得及体外培养 | 第29-41页 |
| ·实验材料与方法 | 第29-37页 |
| ·实验动物 | 第29页 |
| ·实验药品及试剂 | 第29-30页 |
| ·实验药品及试剂 | 第30-31页 |
| ·实验所需溶液和试剂的配制 | 第31-33页 |
| ·原代取材 | 第33-34页 |
| ·原代接种 | 第34页 |
| ·神经干细胞传代操作及继代培养 | 第34-35页 |
| ·神经干细胞的免疫细胞化学鉴定 | 第35-36页 |
| ·诱导分化及免疫细胞化学 | 第36-37页 |
| ·实验结果与讨论 | 第37-40页 |
| ·小鼠神经干细胞原代和继代悬浮培养 | 第37-38页 |
| ·细胞Nestin表达及BrdU检测结果 | 第38-39页 |
| ·神经干细胞诱导分化及免疫荧光鉴定 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 3 海藻糖对神经干细胞培养过程的影响 | 第41-51页 |
| ·实验材料 | 第41-43页 |
| ·实验装置 | 第41-42页 |
| ·实验药品及试剂 | 第42页 |
| ·实验所需试剂的配制 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·神经干细胞单细胞悬液的制备 | 第43页 |
| ·24孔板培养神经干细胞 | 第43-44页 |
| ·神经干细胞生长曲线的测定 | 第44页 |
| ·细胞增值情况检测 | 第44-45页 |
| ·神经干细胞的免疫细胞化学鉴定 | 第45页 |
| ·神经干细胞诱导分化及免疫细胞化学 | 第45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-50页 |
| ·神经干细胞生长曲线与直径的关系 | 第45-47页 |
| ·海藻糖对神经干细胞生长的影响 | 第47-48页 |
| ·细胞Nestin表达及BrdU检测结果 | 第48-49页 |
| ·神经干细胞诱导分化及免疫荧光鉴定 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 4 海藻糖溶液玻璃化能力 | 第51-58页 |
| ·实验材料 | 第51-53页 |
| ·实验装置 | 第51-52页 |
| ·实验药品及试剂 | 第52-53页 |
| ·实验所需试剂的配制 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-54页 |
| ·低温冷台实验 | 第53-54页 |
| ·差示扫描量热 | 第54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-57页 |
| ·蔗糖和海藻糖玻璃化转变浓度 | 第54页 |
| ·样品玻璃化转变温度 | 第54-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 5 海藻糖对玻璃化冻存神经干细胞保护作用的初步研究 | 第58-67页 |
| ·实验材料 | 第59-61页 |
| ·实验装置 | 第59页 |
| ·实验药品 | 第59-60页 |
| ·实验所需试剂的配制 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-62页 |
| ·神经干细胞单细胞悬液的制备 | 第61页 |
| ·VS1-VS9玻璃化能力的低温冷台实验考察 | 第61页 |
| ·四种玻璃化低温保护剂冻存NSCs | 第61-62页 |
| ·VS4、VS10玻璃化冻存培养过程加入海藻糖的神经干细胞 | 第62页 |
| ·差示扫描量热 | 第62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-66页 |
| ·低温冷台观察 | 第62-64页 |
| ·最佳玻璃化保护剂的确定 | 第64-65页 |
| ·培养过程加入海藻糖对玻璃化冻存神经干细胞复苏率的影响 | 第65页 |
| ·VS4、VS10玻璃化冻存NSCs复苏后活率比较 | 第65页 |
| ·VS4、VS10玻璃化转变温度 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 附录A 英文缩略语 | 第73-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
