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青岛文昌鱼TRP14和ycaCR基因的表达和功能鉴定

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 文献综述第11-51页
 1 文昌鱼——新兴模式动物第11-23页
 2 硫氧还蛋白及相关蛋白研究进展第23-39页
 3 ycaC 蛋白及相关蛋白的研究进展第39-51页
第二章 青岛文昌鱼 TRP14 基因的表达及活性测定第51-101页
 1 前言第51-52页
 2 材料与方法第52-80页
   ·材料第52页
   ·实验方法第52-80页
     ·文昌鱼肠 cDNA 文库的构建与测序第52-53页
     ·序列比较与系统进化分析第53页
     ·Nortern blot第53-61页
     ·切片原位分析 TRP14 基因在成体文昌鱼组织中的表达第61-66页
     ·蛋白质表达第66-76页
     ·多克隆抗体的制备第76-77页
     ·抗体的特异性和文昌鱼体液蛋白的 Western blot 检测第77-78页
     ·文昌鱼 TRP14 蛋白的免疫组织化学检测第78-79页
     ·胰岛素还原酶活性测定第79-80页
     ·荧光活性检测第80页
     ·结构预测第80页
 3 结果第80-99页
   ·文昌鱼 TRP14 cDNA 的确定和序列分析第80-85页
   ·文昌鱼 TRP14 蛋白的基因组结构第85-87页
   ·重组蛋白的表达、纯化及其性质分析第87-92页
   ·蛋白的多克隆抗体制备及 Western blot 检测第92-93页
   ·文昌鱼 TRP14 基因的组织特异性表达第93-99页
 4 讨论第99-101页
第三章 青岛文昌鱼 ycaCR 基因的表达及功能分析第101-129页
 1 前言第101-102页
 2 材料与方法第102-107页
   ·文库的测序第102页
   ·序列比较与系统进化分析第102页
   ·Northern blot 与切片原位杂交第102页
   ·蛋白质表达第102-103页
   ·多克隆抗体的制备,免疫组织化学检测第103页
   ·蛋白质高级结构预测第103页
   ·AmphiycaCR 可能的活性测定第103-106页
   ·蛋白质相互作用——His tag pull down第106页
   ·质谱分析第106页
   ·AmphiycaCR 的亚细胞定位第106-107页
 3 结果第107-127页
   ·文昌鱼 ycaCR cDNA 的确定和序列分析第107-113页
   ·文昌鱼 ycaCR 蛋白的基因组结构第113-115页
   ·重组蛋白的表达及纯化第115-118页
   ·AmphiycaCR 的活性第118页
   ·蛋白质相互作用——pull down第118-120页
   ·蛋白的多克隆抗体制备及 Western blot 检测第120-121页
   ·文昌鱼 ycaCR 基因的组织表达第121-127页
 4 讨论第127-129页
总结第129-131页
参考文献第131-146页
附录第146-153页
参研项目及发表论文第153-154页
作者简介第154-155页
致谢第155页

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