摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-51页 |
1 文昌鱼——新兴模式动物 | 第11-23页 |
2 硫氧还蛋白及相关蛋白研究进展 | 第23-39页 |
3 ycaC 蛋白及相关蛋白的研究进展 | 第39-51页 |
第二章 青岛文昌鱼 TRP14 基因的表达及活性测定 | 第51-101页 |
1 前言 | 第51-52页 |
2 材料与方法 | 第52-80页 |
·材料 | 第52页 |
·实验方法 | 第52-80页 |
·文昌鱼肠 cDNA 文库的构建与测序 | 第52-53页 |
·序列比较与系统进化分析 | 第53页 |
·Nortern blot | 第53-61页 |
·切片原位分析 TRP14 基因在成体文昌鱼组织中的表达 | 第61-66页 |
·蛋白质表达 | 第66-76页 |
·多克隆抗体的制备 | 第76-77页 |
·抗体的特异性和文昌鱼体液蛋白的 Western blot 检测 | 第77-78页 |
·文昌鱼 TRP14 蛋白的免疫组织化学检测 | 第78-79页 |
·胰岛素还原酶活性测定 | 第79-80页 |
·荧光活性检测 | 第80页 |
·结构预测 | 第80页 |
3 结果 | 第80-99页 |
·文昌鱼 TRP14 cDNA 的确定和序列分析 | 第80-85页 |
·文昌鱼 TRP14 蛋白的基因组结构 | 第85-87页 |
·重组蛋白的表达、纯化及其性质分析 | 第87-92页 |
·蛋白的多克隆抗体制备及 Western blot 检测 | 第92-93页 |
·文昌鱼 TRP14 基因的组织特异性表达 | 第93-99页 |
4 讨论 | 第99-101页 |
第三章 青岛文昌鱼 ycaCR 基因的表达及功能分析 | 第101-129页 |
1 前言 | 第101-102页 |
2 材料与方法 | 第102-107页 |
·文库的测序 | 第102页 |
·序列比较与系统进化分析 | 第102页 |
·Northern blot 与切片原位杂交 | 第102页 |
·蛋白质表达 | 第102-103页 |
·多克隆抗体的制备,免疫组织化学检测 | 第103页 |
·蛋白质高级结构预测 | 第103页 |
·AmphiycaCR 可能的活性测定 | 第103-106页 |
·蛋白质相互作用——His tag pull down | 第106页 |
·质谱分析 | 第106页 |
·AmphiycaCR 的亚细胞定位 | 第106-107页 |
3 结果 | 第107-127页 |
·文昌鱼 ycaCR cDNA 的确定和序列分析 | 第107-113页 |
·文昌鱼 ycaCR 蛋白的基因组结构 | 第113-115页 |
·重组蛋白的表达及纯化 | 第115-118页 |
·AmphiycaCR 的活性 | 第118页 |
·蛋白质相互作用——pull down | 第118-120页 |
·蛋白的多克隆抗体制备及 Western blot 检测 | 第120-121页 |
·文昌鱼 ycaCR 基因的组织表达 | 第121-127页 |
4 讨论 | 第127-129页 |
总结 | 第129-131页 |
参考文献 | 第131-146页 |
附录 | 第146-153页 |
参研项目及发表论文 | 第153-154页 |
作者简介 | 第154-155页 |
致谢 | 第155页 |