| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-27页 |
| 第一章 猪瘟及猪瘟病毒研究进展 | 第11-27页 |
| ·猪瘟概况 | 第11-12页 |
| ·猪瘟病毒病原学特征研究进展 | 第12-14页 |
| ·猪瘟病毒的形态结构及理化特性 | 第12页 |
| ·CSFV 的侵入及复制 | 第12-14页 |
| ·猪瘟病毒分子生物学研究进展 | 第14-23页 |
| ·CSFV 的基因组结构及其研究进展 | 第14-16页 |
| ·CSFV 基因组编码的蛋白质结构及功能 | 第16-20页 |
| ·NS3 蛋白在病毒的复制及非结构蛋白加工中的作用 | 第20-21页 |
| ·非结构蛋白NS3 与瘟病毒感染细胞出现CPE 的关系 | 第21-23页 |
| ·猪瘟的诊断及疫苗研究进展 | 第23-27页 |
| ·猪瘟诊断研究进展 | 第23-24页 |
| ·猪瘟疫苗研究进展 | 第24-27页 |
| 试验研究 | 第27-58页 |
| 第二章 猪瘟病毒石门株NS3 基因的表达纯化及动物免疫试验 | 第27-43页 |
| ·材料 | 第27-31页 |
| ·菌株与质粒 | 第27-28页 |
| ·工具酶和试剂 | 第28页 |
| ·仪器与设备 | 第28页 |
| ·主要溶液的配置 | 第28-31页 |
| ·方法与步骤 | 第31-38页 |
| ·引物设计与合成 | 第31页 |
| ·重组质粒pMD18-T - NS3 的构建 | 第31-33页 |
| ·重组表达载体pET - NS3 的构建与鉴定 | 第33-34页 |
| ·NS3 基因在大肠杆菌中的优化表达 | 第34页 |
| ·表达蛋白的鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·纯化的重组蛋白的鉴定 | 第36-37页 |
| ·动物免疫实验及抗血清的制备 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·NS3 基因PCR 扩增结果 | 第38页 |
| ·重组质粒pMD18-T - NS3 的鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组表达载体pET - NS3 的鉴定 | 第39页 |
| ·重组原核表达载体序列测定 | 第39页 |
| ·表达蛋白及纯化后重组蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第39-40页 |
| ·表达条件的优化 | 第40页 |
| ·表达蛋白的Western blot 分析 | 第40页 |
| ·重组蛋白含量的计算 | 第40页 |
| ·小鼠最佳免疫途径的确定 | 第40-41页 |
| ·抗血清效价的测定 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·原核表达条件的优化 | 第41-42页 |
| ·小鼠免疫程序的优化 | 第42-43页 |
| 第三章 抗猪瘟病毒NS3 蛋白单克隆抗体的制备及其特性鉴定 | 第43-58页 |
| ·材料 | 第43-45页 |
| ·细胞系 | 第43页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·主要试剂及器械 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第44页 |
| ·杂交瘤细胞培养中主要溶液的配置 | 第44-45页 |
| ·方法与步骤 | 第45-52页 |
| ·重组蛋白间接ELISA 检测方法的建立 | 第45-47页 |
| ·细胞融合 | 第47-49页 |
| ·杂交瘤细胞的选择性培养 | 第49页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第49页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第49-50页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第50-51页 |
| ·小鼠腹水的制备 | 第51页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定 | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52-56页 |
| ·重组蛋白间接ELISA 检测方法的建立 | 第52-53页 |
| ·细胞融合与筛选 | 第53-54页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 缩略语 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
