| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 主要缩写词表 | 第13-15页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-39页 |
| 1 植物次生代谢转录因子的基本概念 | 第18-21页 |
| ·转录因子的结构与功能 | 第18-20页 |
| ·转录因子的活性 | 第20-21页 |
| ·植物次生代谢转录因子的分离与鉴定 | 第21页 |
| 2 与次生代谢相关的转录因子的研究 | 第21-39页 |
| ·苯丙氨酸代谢途径的转录因子的研究 | 第21-33页 |
| ·苯丙氨酸代谢途径相关转录因子的主要类型 | 第22-23页 |
| ·黄酮类生物合成途径的转录调控 | 第23-30页 |
| ·黄酮类化合物的生物合成途径 | 第24页 |
| ·目前已发现参与黄酮合成途径的转录因子 | 第24-30页 |
| ·参与木质素合成途径的转录因子 | 第30-33页 |
| ·木质素合成途径 | 第32页 |
| ·参与木质素合成途径的转录调控因子的研究 | 第32-33页 |
| ·吲哚生物碱代谢途径转录因子 | 第33-39页 |
| ·长春碱生物合成途径 | 第34页 |
| ·参与长春新碱生物合成途径调控的转录因子 | 第34-39页 |
| 第二章 银杏中与木质素合成途径及苯丙氨酸代谢途径相关的GbMYB1转录因子的克隆 | 第39-57页 |
| 前言 | 第39-40页 |
| 1 材料与方法 | 第40-46页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·菌株和载体 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-42页 |
| ·银杏总RNA的抽提和质量检测 | 第42-43页 |
| ·银杏总DNA的抽提和质量检测 | 第43-44页 |
| ·DNA片段的回收、连接、克隆和测序 | 第44-45页 |
| ·GbMYB1目的基因的克隆 | 第45页 |
| ·GbMYB1基因的Southern blotting分析 | 第45-46页 |
| ·生物信息分析 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-55页 |
| ·GbMYB1全长cDNA的获得及分析 | 第46-52页 |
| ·GbMYB1的二维和三维结构分析 | 第52-53页 |
| ·GbMYB1基因的Southern blot分析 | 第53-55页 |
| 3 总结 | 第55-57页 |
| 第三章 银杏中木质素合成途径及苯丙氨酸代谢途径相关的转录因子GbMYB1的功能分析 | 第57-84页 |
| 1 材料与方法 | 第57-68页 |
| ·植物材料 | 第57页 |
| ·菌株和载体 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57-61页 |
| ·仪器和设备 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-68页 |
| ·GbMYB1基因的表达谱分析 | 第61页 |
| ·拟南芥的种植和转化方法 | 第61-63页 |
| ·GbMYB1∶∶GFP融合蛋白在洋葱细胞表皮亚细胞定位 | 第63-64页 |
| ·融合蛋白的诱导表达和纯化 | 第64-65页 |
| ·凝胶滞后实验 | 第65-67页 |
| ·拟南芥切片化学法染色 | 第67页 |
| ·荧光定量PCR方法 | 第67-68页 |
| 2 结果与讨论 | 第68-84页 |
| ·GbMYB1基因的表达分析 | 第68-69页 |
| ·GbMYB1∶∶GFP融合蛋白的亚细胞定位 | 第69-70页 |
| ·GbMYB1基因的原核表达及蛋白纯化 | 第70-73页 |
| ·GbMYB1蛋白与顺式元件的体外结合实验(凝胶滞后) | 第73-74页 |
| ·过量表达GbMYB1基因拟南芥转基因植株的表型和功能分析 | 第74-79页 |
| ·过量表达GbMYB1基因拟南芥转基因植株的下游基因调控分析 | 第79-84页 |
| 第四章 与银杏GbMYB1转录因子进化关系相近的拟南芥突变体的表型和功能研究 | 第84-93页 |
| 前言 | 第84页 |
| 1 材料与方法 | 第84-88页 |
| ·植物材料 | 第84页 |
| ·试剂 | 第84-86页 |
| ·仪器和设备 | 第86页 |
| ·实验方法 | 第86-88页 |
| ·拟南芥突变体的种植方法 | 第86-87页 |
| ·拟南芥突变体切片观察 | 第87页 |
| ·拟南芥突变体总RNA提取和反转录 | 第87页 |
| ·荧光定量PCR方法 | 第87-88页 |
| 2 结果和讨论 | 第88-93页 |
| ·拟南芥突变体的表型分析 | 第88页 |
| ·拟南芥突变体的化学分析 | 第88-90页 |
| ·拟南芥突变体苯丙氨酸途径和木质素途径关键酶基因的定量分析 | 第90-93页 |
| 第五章 酵母单杂交方法筛选东北红豆杉中与甲基茉莉酸诱导相关转录因子的研究 | 第93-109页 |
| 前言 | 第93-94页 |
| 1 材料与方法 | 第94-102页 |
| ·植物材料和处理方法 | 第94页 |
| ·菌株和载体 | 第94页 |
| ·试剂盒、酶和引物 | 第94-96页 |
| ·试剂和培养基 | 第96-97页 |
| ·试验方法 | 第97-102页 |
| ·东北红豆杉cDNA双链文库的构建 | 第97-99页 |
| ·东北红豆杉cDNA双链的均一化处理 | 第99-100页 |
| ·酵母单杂交文库的构建 | 第100-101页 |
| ·酵母单杂交文库的筛选 | 第101-102页 |
| ·测序 | 第102页 |
| 2 结果与分析 | 第102-106页 |
| ·鱼饵质粒的构建 | 第102-104页 |
| ·东北红豆杉ds cDNA文库的构建和均一化处理 | 第104页 |
| ·3-AT浓度的确定 | 第104-105页 |
| ·酵母单杂交文库的构建 | 第105页 |
| ·筛选获得的putative转录因子片段 | 第105-106页 |
| ·putative转录因子全长获得 | 第106页 |
| 3 讨论 | 第106-109页 |
| 第六章 总结与展望 | 第109-113页 |
| 1 研究总结 | 第109-111页 |
| 2 本文创新点 | 第111页 |
| 3 后续研究方向 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-124页 |
| 附录 | 第124-127页 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 | 第127-128页 |
| 致谢 | 第128-130页 |
