| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-13页 |
| 1 引言 | 第13-26页 |
| ·共轭亚油酸 | 第13-15页 |
| ·共轭亚油酸简介 | 第13页 |
| ·共轭亚油酸的合成 | 第13-14页 |
| ·碱法异构法 | 第13-14页 |
| ·生物合成法 | 第14页 |
| ·共轭亚油酸的功能 | 第14-15页 |
| ·抵抗癌症 | 第14页 |
| ·提高骨质密度 | 第14页 |
| ·增强机体免疫力 | 第14-15页 |
| ·抗动脉粥样硬化功能 | 第15页 |
| ·减肥降脂 | 第15页 |
| ·亚油酸异构酶 | 第15-20页 |
| ·亚油酸异构酶的来源 | 第15-16页 |
| ·亚油酸异构酶的分离纯化 | 第16-17页 |
| ·亚油酸异构酶的性质 | 第17-19页 |
| ·亚油酸异构酶的适宜pH | 第17页 |
| ·亚油酸异构酶的热稳定性 | 第17页 |
| ·亚油酸异构酶的专一性 | 第17-19页 |
| ·亚油酸异构酶的分子研究进展 | 第19-20页 |
| ·生物信息学的软件分析 | 第20-22页 |
| ·生物信息学简介 | 第20页 |
| ·生物信息学的主要研究方向 | 第20-21页 |
| ·核酸序列比对（sequence Alignment） | 第20页 |
| ·生物分子进化和比较基因组学 | 第20页 |
| ·蛋白质结构比对和预测 | 第20-21页 |
| ·药物设计 | 第21页 |
| ·生物系统的建模和仿真 | 第21页 |
| ·常用的生物信息学数据库 | 第21-22页 |
| ·NCBI (National Center for Biotechnology Information) | 第21-22页 |
| ·EBI(European Bioinformatics Institute) | 第22页 |
| ·Expasy Mo1ecular Biology Server | 第22页 |
| ·北京大学生物信息服务器 | 第22页 |
| ·单链构象多态性分析技术（SSCP） | 第22-24页 |
| ·SSCP 简介及发展 | 第22-23页 |
| ·SSCP 技术的特点 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的、意义及技术路线 | 第24-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| ·实验技术路线 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-39页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·菌种 | 第26页 |
| ·主要试剂与试剂盒 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| ·培养基配方 | 第27-28页 |
| ·主要溶液 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-39页 |
| ·生长曲线的测定及绘制 | 第29页 |
| ·N~+离子束诱变法筛选乳酸菌 P8 亚油酸异构酶负突变株 | 第29-30页 |
| ·亚油酸异构酶目的基因和上游非编码区片段的扩增 | 第30-35页 |
| ·植物乳杆菌 P8 及其突变菌株的培养、收集 | 第30页 |
| ·野生型菌株和6 株负突变菌株总 DNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·野生型菌株和6 株负突变菌株亚油酸异构酶基因的扩增 | 第31-32页 |
| ·野生型菌株和6 株负突变菌株亚油酸异构酶上游非编码区的扩增 | 第32-33页 |
| ·凝胶回收PCR 产物 | 第33-34页 |
| ·测序载体的构建 | 第34-35页 |
| ·序列测定 | 第35页 |
| ·SSCP | 第35-37页 |
| ·野生型菌株和6 株负突变菌株目的基因和上游非编码区片段的酶切 | 第35-36页 |
| ·胶的制备 | 第36页 |
| ·样品的制备和上样 | 第36-37页 |
| ·银染 | 第37页 |
| ·软件分析 | 第37页 |
| ·野生型菌株和6 株负突变菌株目的基因和上游非编码区片段的测序与分析 | 第37-39页 |
| ·野生型菌株和6 株负突变菌株目的基因和上游非编码区片段的测序 | 第37-38页 |
| ·野生型菌株和6 株负突变菌株目的基因和上游非编码区序列的分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-69页 |
| ·植物乳杆菌 P8 产亚油酸异构酶负突变菌株的筛选 | 第39-43页 |
| ·植物乳杆菌 P8 的生长曲线 | 第39页 |
| ·CLA 标准曲线 | 第39-40页 |
| ·野生菌株离子注入后产 CLA 能力的测定 | 第40-43页 |
| ·亚油酸异构酶目的基因和上游非编码区片段的扩增 | 第43-65页 |
| ·植物乳杆菌 P8 和6 株负突变菌株基因组 DNA 的提取 | 第43-44页 |
| ·植物乳杆菌 P8 和6 株负突变菌株亚油酸异构酶目的基因的扩增 | 第44页 |
| ·植物乳杆菌 P8 和6 株负突变菌株亚油酸异构酶上游非编码区片段的扩增 | 第44-45页 |
| ·植物乳杆菌 P8 亚油酸异构酶基因和上游非编码区片段的测序及分析 | 第45-65页 |
| ·植物乳杆菌 P8 亚油酸异构酶基因和上游非编码区片段的连接、转化和菌落PCR 鉴定 | 第45-46页 |
| ·植物乳杆菌 P8 亚油酸异构酶基因和上游非编码区基因的序列测定及分析 | 第46-65页 |
| ·SSCP 检测 | 第65-69页 |
| ·酶切位点的确定 | 第65-66页 |
| ·亚油酸异构酶基因及其上游非编码区片段酶切 | 第66-67页 |
| ·酶切产物 SSCP 电泳 | 第67-68页 |
| ·植物乳杆菌 P8 和6 株负突变菌株亚油酸异构酶基因及其上游非编码区片段比对 | 第68-69页 |
| ·植物乳杆菌 P8 和4-26、9-8 两株碱基突变菌株亚油酸异构酶编码氨基酸序列比对 | 第69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| ·植物乳杆菌 P8 亚油酸异构酶的讨论分析 | 第69-70页 |
| ·植物乳杆菌 P8 亚油酸异构酶基因调控区讨论分析 | 第70页 |
| ·PCR 产物琼脂糖凝胶回收对SSCP 检测的影响 | 第70页 |
| ·SSCP 实验条件的探索 | 第70-71页 |
| ·SSCP 检测基因突变灵敏度 | 第71页 |
| 5 结论 | 第71页 |
| 6 创新 | 第71页 |
| 7 展望 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 作者简介 | 第78页 |
