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拟南芥中两个未知基因的载体构建、原核表达、蛋白质纯化以及转基因拟南芥的研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-11页
第一部分 拟南芥未知基因PCR7、PCR9的载体构建第11-32页
 1 材料第11-15页
   ·菌株和载体第11-13页
   ·试剂第13-14页
   ·试剂配方第14-15页
 2 方法第15-24页
   ·将pGAD10-pcr7、pGAD10-pcr9质粒转入大肠杆菌DH5a第15-17页
   ·引物设计第17页
   ·菌落PCR反应扩增pcr7、pcr9片段第17-18页
   ·PCR产物的回收第18页
   ·利用pMD18-T载体克隆pcr7、pcr9基因片段第18-22页
   ·利用pBI121载体克隆pcr7、pcr9片段第22-23页
   ·利用GTK载体克隆pcr7、pcr9片段第23-24页
 3 结果与分析第24-30页
   ·菌落PCR反应检测pGAD10-pcr7、pGAD10-pcr9大肠杆菌转化子第24-25页
   ·pMD18-T载体的构建以及酶切检测第25-26页
   ·真核表达载体的构建以及双酶切检测第26-29页
   ·原核表达载体构建以及双酶切检测第29-30页
 4 讨论第30-32页
第二部分 拟南芥未知基因PCR7、PCR9基因转入拟南芥中的研究第32-42页
 1 材料第32-33页
   ·实验材料第32页
   ·菌株和载体第32页
   ·试剂配方第32-33页
 2 方法第33-35页
   ·农杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第33-34页
   ·转化农杆菌第34页
   ·重组质粒的鉴定第34页
   ·花序浸染法转化拟南芥第34-35页
   ·转基因种子筛选第35页
     ·转基因植株PCR检测第35页
   ·转基因植株生理性状统计第35页
 3 结果与分析第35-39页
   ·农杆菌转化检测第36页
   ·转基因植株的筛选第36-37页
   ·转基因植株PCR检测第37页
   ·转基因植株的生理性状分析第37-39页
 4 讨论第39-42页
   ·转基因植株构建第39-40页
   ·生理性状数据分析第40-42页
第三部分 拟南芥未知基因PCR7、PCR9的原核表达与分离纯化第42-50页
 1 材料第42-43页
   ·载体第42页
   ·试剂配方第42-43页
 2 方法第43-45页
   ·GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的诱导表达第43-44页
   ·Western-blot检测第44-45页
   ·GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的纯化第45页
 3 结果与分析第45-48页
   ·GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的SDS-PAGE电泳第45-47页
   ·GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的Western-Blot分析第47页
   ·融合蛋白的初步纯化第47-48页
 4 讨论第48-50页
文献综述第50-68页
参考文献第68-78页
在读硕士期间发表的论文第78-79页
致谢第79-80页

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