中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-11页 |
第一部分 拟南芥未知基因PCR7、PCR9的载体构建 | 第11-32页 |
1 材料 | 第11-15页 |
·菌株和载体 | 第11-13页 |
·试剂 | 第13-14页 |
·试剂配方 | 第14-15页 |
2 方法 | 第15-24页 |
·将pGAD10-pcr7、pGAD10-pcr9质粒转入大肠杆菌DH5a | 第15-17页 |
·引物设计 | 第17页 |
·菌落PCR反应扩增pcr7、pcr9片段 | 第17-18页 |
·PCR产物的回收 | 第18页 |
·利用pMD18-T载体克隆pcr7、pcr9基因片段 | 第18-22页 |
·利用pBI121载体克隆pcr7、pcr9片段 | 第22-23页 |
·利用GTK载体克隆pcr7、pcr9片段 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-30页 |
·菌落PCR反应检测pGAD10-pcr7、pGAD10-pcr9大肠杆菌转化子 | 第24-25页 |
·pMD18-T载体的构建以及酶切检测 | 第25-26页 |
·真核表达载体的构建以及双酶切检测 | 第26-29页 |
·原核表达载体构建以及双酶切检测 | 第29-30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
第二部分 拟南芥未知基因PCR7、PCR9基因转入拟南芥中的研究 | 第32-42页 |
1 材料 | 第32-33页 |
·实验材料 | 第32页 |
·菌株和载体 | 第32页 |
·试剂配方 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-35页 |
·农杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第33-34页 |
·转化农杆菌 | 第34页 |
·重组质粒的鉴定 | 第34页 |
·花序浸染法转化拟南芥 | 第34-35页 |
·转基因种子筛选 | 第35页 |
·转基因植株PCR检测 | 第35页 |
·转基因植株生理性状统计 | 第35页 |
3 结果与分析 | 第35-39页 |
·农杆菌转化检测 | 第36页 |
·转基因植株的筛选 | 第36-37页 |
·转基因植株PCR检测 | 第37页 |
·转基因植株的生理性状分析 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-42页 |
·转基因植株构建 | 第39-40页 |
·生理性状数据分析 | 第40-42页 |
第三部分 拟南芥未知基因PCR7、PCR9的原核表达与分离纯化 | 第42-50页 |
1 材料 | 第42-43页 |
·载体 | 第42页 |
·试剂配方 | 第42-43页 |
2 方法 | 第43-45页 |
·GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的诱导表达 | 第43-44页 |
·Western-blot检测 | 第44-45页 |
·GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的纯化 | 第45页 |
3 结果与分析 | 第45-48页 |
·GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第45-47页 |
·GST-pcr7、GST-pcr9融合蛋白的Western-Blot分析 | 第47页 |
·融合蛋白的初步纯化 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
文献综述 | 第50-68页 |
参考文献 | 第68-78页 |
在读硕士期间发表的论文 | 第78-79页 |
致谢 | 第79-80页 |