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牛干扰素-τ基因的克隆及其在大肠杆菌中的融合表达

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
1 文献综述第13-28页
   ·IFN-τ在妊娠识别中的作用机理第13-26页
     ·溶黄体机制第13-15页
     ·IFN-τ与妊娠识别过程第15-16页
     ·IFN-τ基因的结构第16-17页
     ·IFN-τ的同源性第17页
     ·IFN-τ的表达及表达调控第17-18页
     ·IFN-τ的妊娠识别作用机制第18-26页
   ·IFN-τ基因的体外重组表达研究第26页
   ·本研究的目的意义和内容第26-28页
2 材料与方法第28-45页
   ·试验材料第28-33页
     ·试验材料的采集第28页
     ·载体与菌株第28页
     ·生物信息学网络资源及应用软件第28页
     ·主要试剂第28-29页
     ·试验溶液的配制第29-32页
     ·主要仪器设备第32-33页
   ·试验方法第33-45页
     ·基因组DNA的提取第33-34页
     ·引物设计第34页
     ·bIFN-τ基因PCR扩增第34-35页
     ·bIFN-τ基因PCR产物的克隆第35-38页
     ·测序与序列分析第38页
     ·bIFN-τ的生物信息学预测第38-39页
     ·原核重组表达质粒的构建第39-41页
     ·bIFN-τ在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物分析第41-43页
     ·重组融合蛋白的纯化第43-45页
3 结果与分析第45-66页
   ·基因组DNA的提取第45页
   ·bIFN-τ基因PCR扩增第45页
   ·重组克隆质粒的构建和鉴定第45-47页
   ·测序与序列分析第47-55页
     ·序列的碱基组成及氨基酸组成第47-48页
     ·bIFN-τ基因的聚类分析第48-52页
     ·bIFN-τ基因的同源性分析第52-55页
   ·bIFN-τ的生物信息学预测第55-60页
     ·bIFN-τ糖基化位点预测第55页
     ·bIFN-τ疏水性预测第55-56页
     ·bIFN-τ磷酸化位点预测第56页
     ·bIFN-τ二硫键预测第56-57页
     ·bIFN-τ二级结构预测第57-58页
     ·bIFN-τ三级结构预测第58-59页
     ·bIFN-τ保守结构功能域预测第59-60页
   ·原核重组表达质粒的构建和鉴定第60-62页
   ·bIFN-τ在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物分析第62-64页
     ·bIFN-τ的诱导表达第62-63页
     ·bIFN-τ诱导表达条件的优化第63页
     ·表达产物的可溶性分析第63-64页
   ·重组融合蛋白的纯化第64-66页
4 讨论第66-75页
   ·克隆片段的设计第66页
   ·克隆载体的选择第66-67页
   ·bIFN-τ基因的序列分析第67-69页
   ·bIFN-τ的生物信息学预测第69-70页
   ·表达宿主菌的选择第70-71页
   ·表达载体的选择第71-72页
   ·表达方式的选择第72-73页
   ·bIFN-τ在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物分析第73-74页
   ·重组融合蛋白的纯化第74-75页
5 结论第75-76页
参考文献第76-84页
致谢第84-85页
附录第85-89页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第89页

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