1 引言 | 第1-16页 |
·传染性法氏囊病病毒的基本特性 | 第8-10页 |
·IBDV的生物学特性 | 第8-9页 |
·IBDV的培养特性 | 第9页 |
·流行病学临床症状及病理变化 | 第9-10页 |
·传染性法氏囊病病毒的分子生物学特性 | 第10-12页 |
·IBDV基因组的结构特征 | 第10页 |
·IBDV蛋白及其作用 | 第10-12页 |
·IBDV疫苗的研究进展及存在问题 | 第12-13页 |
·传染性法氏囊病病毒的检测方法 | 第13-15页 |
·原代病毒的细胞分离培养 | 第13页 |
·琼脂扩散试验 | 第13页 |
·荧光抗体技术 | 第13页 |
·ELISA | 第13-14页 |
·中和试验 | 第14页 |
·核酸(RNA)电泳 | 第14页 |
·核酸探针技术 | 第14页 |
·逆转录—聚合酶链反应技术(RT-PCR) | 第14页 |
·套式-PCR技术(nested-PCR) | 第14-15页 |
·本课题研究的目的意义 | 第15-16页 |
2 材料和方法 | 第16-27页 |
·材料 | 第16页 |
·所需主要试剂 | 第16-17页 |
·主要仪器 | 第17页 |
·细胞培养所需主要试剂的配制 | 第17-18页 |
·病毒的培育 | 第18-19页 |
·病毒IBDV-bdv,IBDV-bdjz株的处理 | 第18页 |
·IBDV囊毒在鸡胚的传代 | 第18-19页 |
·鸡胚毒在CEF的传代及细胞适应毒的培育 | 第19页 |
·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第19页 |
·CEF适应毒的培育 | 第19页 |
·病毒的纯化 | 第19页 |
·病毒的生物学特性 | 第19-21页 |
·易感鸡感染试验 | 第19-20页 |
·琼扩试验 | 第20页 |
·免疫指数测定 | 第20页 |
·组织学病变观察 | 第20-21页 |
·病毒的理化学特性 | 第21-22页 |
·电镜观察 | 第21页 |
·乙醚敏感试验 | 第21页 |
·氯仿敏感性试验 | 第21页 |
·耐酸性试验 | 第21页 |
·耐热性试验 | 第21-22页 |
·病毒蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第22页 |
·SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳所需主要试剂的配制 | 第22页 |
·病毒结构蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第22页 |
·病毒RNA的提取 | 第22-24页 |
·采用SDS-蛋白酶K法提取病毒总RNA | 第23页 |
·异硫氰酸胍法提取病毒基因组RNA | 第23页 |
·TRNzol法提取病毒基因组RNA | 第23-24页 |
·RT-PCR检测 | 第24-27页 |
·RT-PCR检测所需主要试剂的配制 | 第24页 |
·VP2高变区的扩增 | 第24-25页 |
·套式PCR(nested-PCR) | 第25页 |
·RT-PCR产物鉴定 | 第25-26页 |
·序列测定分析 | 第26-27页 |
3 结果与分析 | 第27-33页 |
·鸡胚稳定性试验 | 第27页 |
·临床症状 | 第27页 |
·琼脂扩散试验 | 第27页 |
·免疫指数测定 | 第27-28页 |
·病理组织学变化 | 第28页 |
·电镜观察结果 | 第28-29页 |
·培养病毒的理化特性结果 | 第29页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳-提纯前后 | 第29页 |
·核酸电泳图 | 第29-30页 |
·序列分析 | 第30-31页 |
·亲源关系分析 | 第31-33页 |
4 讨论 | 第33-36页 |
·病毒特性 | 第33页 |
·病毒的纯化 | 第33页 |
·病理切片的观察 | 第33-34页 |
·病毒蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳: | 第34页 |
·病毒基因组的提取与RT-PCR技术 | 第34页 |
·亲源关系分析讨论 | 第34-36页 |
5 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-48页 |
在读期间发表的学术论文 | 第48-49页 |
作者简历 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
附录 | 第51-54页 |