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河北省传染性法氏囊病病毒地方株的分离与鉴定

1 引言第1-16页
   ·传染性法氏囊病病毒的基本特性第8-10页
     ·IBDV的生物学特性第8-9页
     ·IBDV的培养特性第9页
     ·流行病学临床症状及病理变化第9-10页
   ·传染性法氏囊病病毒的分子生物学特性第10-12页
     ·IBDV基因组的结构特征第10页
     ·IBDV蛋白及其作用第10-12页
   ·IBDV疫苗的研究进展及存在问题第12-13页
   ·传染性法氏囊病病毒的检测方法第13-15页
     ·原代病毒的细胞分离培养第13页
     ·琼脂扩散试验第13页
     ·荧光抗体技术第13页
     ·ELISA第13-14页
     ·中和试验第14页
     ·核酸(RNA)电泳第14页
     ·核酸探针技术第14页
     ·逆转录—聚合酶链反应技术(RT-PCR)第14页
     ·套式-PCR技术(nested-PCR)第14-15页
   ·本课题研究的目的意义第15-16页
2 材料和方法第16-27页
   ·材料第16页
   ·所需主要试剂第16-17页
   ·主要仪器第17页
   ·细胞培养所需主要试剂的配制第17-18页
   ·病毒的培育第18-19页
     ·病毒IBDV-bdv,IBDV-bdjz株的处理第18页
     ·IBDV囊毒在鸡胚的传代第18-19页
   ·鸡胚毒在CEF的传代及细胞适应毒的培育第19页
     ·鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备第19页
     ·CEF适应毒的培育第19页
   ·病毒的纯化第19页
   ·病毒的生物学特性第19-21页
     ·易感鸡感染试验第19-20页
     ·琼扩试验第20页
     ·免疫指数测定第20页
     ·组织学病变观察第20-21页
   ·病毒的理化学特性第21-22页
     ·电镜观察第21页
     ·乙醚敏感试验第21页
     ·氯仿敏感性试验第21页
     ·耐酸性试验第21页
     ·耐热性试验第21-22页
   ·病毒蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第22页
     ·SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳所需主要试剂的配制第22页
     ·病毒结构蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第22页
   ·病毒RNA的提取第22-24页
     ·采用SDS-蛋白酶K法提取病毒总RNA第23页
     ·异硫氰酸胍法提取病毒基因组RNA第23页
     ·TRNzol法提取病毒基因组RNA第23-24页
   ·RT-PCR检测第24-27页
     ·RT-PCR检测所需主要试剂的配制第24页
     ·VP2高变区的扩增第24-25页
     ·套式PCR(nested-PCR)第25页
     ·RT-PCR产物鉴定第25-26页
     ·序列测定分析第26-27页
3 结果与分析第27-33页
   ·鸡胚稳定性试验第27页
   ·临床症状第27页
   ·琼脂扩散试验第27页
   ·免疫指数测定第27-28页
   ·病理组织学变化第28页
   ·电镜观察结果第28-29页
   ·培养病毒的理化特性结果第29页
   ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳-提纯前后第29页
   ·核酸电泳图第29-30页
   ·序列分析第30-31页
   ·亲源关系分析第31-33页
4 讨论第33-36页
   ·病毒特性第33页
   ·病毒的纯化第33页
   ·病理切片的观察第33-34页
   ·病毒蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳:第34页
   ·病毒基因组的提取与RT-PCR技术第34页
   ·亲源关系分析讨论第34-36页
5 结论第36-37页
参考文献第37-48页
在读期间发表的学术论文第48-49页
作者简历第49-50页
致谢第50-51页
附录第51-54页

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