| 原创性声明 | 第1页 |
| 学位论文版权使用授权书 | 第3-4页 |
| 目录 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1 葡萄病毒病研究进展 | 第13-19页 |
| ·葡萄扇叶病 | 第13-14页 |
| ·病毒属性 | 第13-14页 |
| ·染病症状 | 第14页 |
| ·病毒传播 | 第14页 |
| ·病毒危害 | 第14页 |
| ·葡萄卷叶病 | 第14-17页 |
| ·病毒属性 | 第14-16页 |
| ·染病症状 | 第16页 |
| ·病毒传播 | 第16页 |
| ·病毒危害 | 第16-17页 |
| ·葡萄斑点病 | 第17-18页 |
| ·病毒属性 | 第17页 |
| ·染病症状 | 第17页 |
| ·病毒传播 | 第17-18页 |
| ·病毒危害 | 第18页 |
| ·葡萄茎痘病 | 第18页 |
| ·病原属性 | 第18页 |
| ·染病症状 | 第18页 |
| ·病毒传播 | 第18页 |
| ·病毒危害 | 第18页 |
| ·葡萄栓皮病 | 第18-19页 |
| ·病原属性 | 第19页 |
| ·染病症状 | 第19页 |
| ·病毒传播 | 第19页 |
| ·病毒危害 | 第19页 |
| 2 葡萄脱毒方法研究进展 | 第19-24页 |
| ·热处理脱毒 | 第19-20页 |
| ·茎尖培养 | 第20-21页 |
| ·热处理 + 茎尖培养 | 第21页 |
| ·玻璃化超低温 + 茎尖培养 | 第21-23页 |
| ·材料处理 | 第21-22页 |
| ·玻璃化保护剂 | 第22-23页 |
| ·病毒抑制剂的应用 | 第23页 |
| ·花药培养 | 第23-24页 |
| 3 葡萄主要病毒的检测方法 | 第24-29页 |
| ·生物学检测 | 第24-25页 |
| ·血清学检测 | 第25-26页 |
| ·分子生物学检测 | 第26-29页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第26-28页 |
| ·核酸分子杂交技术(核酸探针检测法) | 第28-29页 |
| 第二章 葡萄扇叶病毒的检测技术研究 | 第29-44页 |
| 1 材料及试剂 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·试剂 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-35页 |
| ·Dot-ELISA法检测葡萄扇叶病毒 | 第30页 |
| ·双链RNA(dsRNA)检测 | 第30-31页 |
| ·葡萄总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·改进的CTAB法提取样品总RNA | 第31页 |
| ·SDS-酸酚法 | 第31-32页 |
| ·分步离心法 | 第32页 |
| ·RNA的质量检测 | 第32页 |
| ·RT-PCR检测葡萄扇叶病毒和卷叶病毒 | 第32-34页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·cDNA合成 | 第33页 |
| ·PCR扩增 | 第33-34页 |
| ·IC-RT-PCR检测葡萄扇叶病毒 | 第34页 |
| ·目的片段的回收、克隆测序及序列分析 | 第34-35页 |
| ·PCR产物的检测与回收 | 第34页 |
| ·回收片段与PMD19-T载体(TaKaRa)的连接 | 第34-35页 |
| ·质粒的转化 | 第35页 |
| ·测序 | 第35页 |
| ·测序分析 | 第35页 |
| ·聚类分析 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-42页 |
| ·Dot-ELISA法检测葡萄扇叶病毒 | 第35-36页 |
| ·dsRNA检测 | 第36-37页 |
| ·RNA提取方法的比较 | 第37-38页 |
| ·cDNA的合成 | 第38-39页 |
| ·PCR检测葡萄扇叶病毒 | 第39-40页 |
| ·克隆测序及核苷酸序列分析 | 第40-42页 |
| ·克隆测序 | 第40页 |
| ·核苷酸序列同源性比较 | 第40-42页 |
| ·葡萄扇叶病毒氨基酸序列聚类分析 | 第42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| ·葡萄总 RNA提取方法 | 第42-43页 |
| ·葡萄扇叶病毒的检测方法 | 第43页 |
| ·病毒的变异分析 | 第43-44页 |
| 第三章 葡萄扇叶病毒的脱除 | 第44-55页 |
| 1 材料 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-46页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·葡萄试管苗的获得与继代 | 第44-45页 |
| ·热处理 | 第45页 |
| ·热处理 + 茎尖培养 | 第45页 |
| ·热处理 + 病毒抑制剂 + 茎尖培养 | 第45页 |
| ·超低温处理 + 茎尖培养 | 第45-46页 |
| ·病毒检测 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-53页 |
| ·葡萄试管苗的获得 | 第46页 |
| ·热处理前培养时间对试管苗成活率的影响 | 第46-47页 |
| ·茎尖大小和暗培养天数对热处理 + 茎尖培养中葡萄茎尖生长的影响 | 第47-49页 |
| ·热处理 + 病毒抑制剂 + 茎尖培养脱毒法茎尖成活率 | 第49-50页 |
| ·超低温 + 茎尖培养脱毒法的茎尖成活率 | 第50-51页 |
| ·几种脱毒方法脱毒效果比较 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 全文结论 | 第55-56页 |
| 创新点 | 第56-57页 |
| 图版 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
