摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
·脱水素的性质 | 第13-14页 |
·脱水素的结构 | 第14-15页 |
·脱水素的分类 | 第15-16页 |
·脱水素的分布和亚细胞定位 | 第16-17页 |
·脱水素的表达调控 | 第17-19页 |
·脱水素的功能和作用机制 | 第19-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 银杏脱水素基因(GbDHN)的克隆 | 第25-46页 |
·实验材料 | 第25-27页 |
·植物材料及处理 | 第25页 |
·菌株和载体 | 第25页 |
·培养基和抗生素 | 第25-26页 |
·酶,试剂盒及分子量标准 | 第26页 |
·引物 | 第26-27页 |
·仪器和设备 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-35页 |
·CTAB法提取银杏DNA | 第27-28页 |
·CTAB法提取银杏的RNA | 第28-29页 |
·GbDHN cDNA序列的克隆 | 第29-31页 |
·GbDHN全长DNA序列的克隆 | 第31-32页 |
·GbDHN5’侧翼区序列的克隆 | 第32-33页 |
·电泳检测后,回收的片段连接、转化、筛选、测序 | 第33-34页 |
·GbDHN Southern杂交 | 第34页 |
·GbDHN基因表达图谱分析 | 第34-35页 |
·生物信息学分析 | 第35页 |
·结果与讨论 | 第35-46页 |
·GbDHN全长cDNA序列的克隆和分析 | 第35-37页 |
·GbDHN的DNA序列和5’侧翼区的克隆和分析 | 第37-38页 |
·GbDHN的5’侧翼区顺式作用元件分析 | 第38-40页 |
·GbDHN的亲水性分析 | 第40页 |
·GbDHN的二级结构分析 | 第40-41页 |
·GbDHN同源分析 | 第41-43页 |
·GbDHN Southern blot分析 | 第43-44页 |
·GbDHN表达图谱分析 | 第44-46页 |
第三章 油菜脱水素基因(BnDHN ERD10)的克隆 | 第46-65页 |
·实验材料 | 第46-48页 |
·植物材料及处理 | 第46页 |
·菌株和载体 | 第46页 |
·培养基和抗生素 | 第46页 |
·酶,试剂盒及分子量标准 | 第46-47页 |
·引物 | 第47页 |
·仪器和设备 | 第47-48页 |
·实验方法 | 第48-54页 |
·TRIZOL法提取油菜总RNA | 第48-49页 |
·CTAB法提取油菜的DNA | 第49-50页 |
·BnDHN ERD10全长cDNA的克隆 | 第50-52页 |
·BnDHN ERD10 5’侧翼区序列的克隆 | 第52-53页 |
·特异目的条带回收后,连接、转化、筛选,测序的具体操作见2.2 | 第53页 |
·BnDHN ERD10表达图谱分析 | 第53-54页 |
·生物信息学分析 | 第54页 |
·结果与讨论 | 第54-65页 |
·BnDHN ERD10全长cDNA序列的克隆和分析 | 第54-56页 |
·BnDHN ERD10的5’侧翼区的克隆和分析 | 第56-57页 |
·BnDHN ERD10的亲水性分析 | 第57-58页 |
·BnDHN ERD10的二级结构分析 | 第58-59页 |
·同源分析 | 第59-61页 |
·BnDHN ERD10表达图谱分析 | 第61-65页 |
第四章 荠菜脱水素基因(CbDHN)的克隆 | 第65-80页 |
·实验材料 | 第65-67页 |
·植物材料及处理 | 第65页 |
·菌株和载体 | 第65页 |
·培养基和抗生素 | 第65-66页 |
·酶,试剂盒及分子量标准 | 第66页 |
·引物 | 第66-67页 |
·仪器和设备 | 第67页 |
·实验方法 | 第67-72页 |
·试剂盒提取荠菜总RNA | 第67-68页 |
·CTAB法提取荠菜的DNA | 第68页 |
·CbDHN全长cDNA的克隆 | 第68-71页 |
·CbDHN表达图谱分析 | 第71页 |
·生物信息学分析 | 第71-72页 |
·结果与讨论 | 第72-80页 |
·CbDHN全长cDNA序列的克隆和分析 | 第72-74页 |
·CbDHN的亲水性分析 | 第74页 |
·CbDHN的二级结构分析 | 第74-75页 |
·同源分析 | 第75-77页 |
·CbDHN表达图谱分析 | 第77-80页 |
第五章 植物表达载体的构建和遗传转化进展 | 第80-98页 |
·前言 | 第80页 |
·实验材料 | 第80-82页 |
·菌株和质粒 | 第80-81页 |
·酶,试剂及分子量标准 | 第81页 |
·引物 | 第81页 |
·植物材料及培养基 | 第81-82页 |
·实验方法 | 第82-88页 |
·植物表达载体的构建 | 第82-84页 |
·叶盘法转化烟草 | 第84-85页 |
·转基因苗的检测 | 第85-87页 |
·转基因烟草植株的抗冻分析 | 第87-88页 |
·结果和讨论 | 第88-98页 |
·植物表达载体的构建及分析 | 第88-93页 |
·转基因烟草苗的分子检测 | 第93-96页 |
·转基因烟草植株的抗冻分析 | 第96-98页 |
总结 | 第98-100页 |
参考文献 | 第100-109页 |
附录 | 第109-111页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第111-113页 |
致谢 | 第113-115页 |
攻读博士学位期间参与的其他工作 | 第115-116页 |