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一株苝醌类光敏剂产生菌AL18的cDNA文库的构建

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
引言第9-11页
1.文献综述第11-26页
   ·光敏剂的概念、种类及作用第11-16页
     ·光敏剂的概念第11页
     ·光敏剂的种类第11-12页
     ·光敏剂的作用第12-16页
   ·苝醌衍生物研究进展第16-18页
     ·苝醌类衍生物的光敏性第17页
     ·苝醌类衍生物的合成第17-18页
   ·聚酮生物合成研究进展第18-20页
     ·组合生物合成第18页
     ·聚酮生物合成酶第18-20页
   ·cDNA文库的构建方法进展第20-25页
     ·固相cDNA文库第21-22页
     ·差示cDNA文库第22页
     ·抑制消减杂交第22-23页
     ·Oligo—capping方法构建cDNA文库第23-24页
     ·SMART技术在cDNA文库构建中的应用第24-25页
   ·本课题的研究目的和意义第25-26页
2.材料与方法第26-39页
   ·实验材料第26-27页
     ·供试材料第26页
     ·主要试剂及酶第26页
     ·主要仪器设备第26-27页
   ·实验方法第27-39页
     ·材料准备第27页
     ·总RNA的提取第27-30页
     ·总RNA质量检测第30页
     ·cDNA第一链的合成第30-31页
     ·LDPCR扩增cDNA第31页
     ·蛋白酶K消化第31-32页
     ·Sfi Ⅰ消化第32页
     ·用CHROMA SPINTM—400进行cDNA大小片段的分级分离第32-34页
     ·dscDNA与λTriplEx2载体连接第34-35页
     ·文库包装第35页
     ·菌株培养第35-36页
     ·测定未扩增文库的滴度值和重组克隆百分率第36页
     ·文库的扩增第36-37页
     ·扩增文库的滴度值检测第37-39页
3.结果与分析第39-43页
   ·总RNA的提取第39页
     ·不同提取方法总RNA质量的比较第39页
   ·dscDNA的合成第39-40页
   ·dscDNA的分级第40-41页
   ·cDNA文库的滴度第41页
   ·噬菌体蓝白斑筛选第41-43页
4.讨论第43-46页
   ·总RNA的提取第43-44页
   ·cDNA的合成第44页
     ·重悬CHROMA SPIN~(TM)—400层析柱第44页
     ·测定未扩增文库的滴度值第44页
   ·SMART技术构建cDNA文库的优点第44-45页
   ·今后研究工作的展望第45-46页
结论第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52-53页
附录第53-55页
作者简介第55页
攻读学位期间发表的文章第55页

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