| 1 前言 | 第1-23页 |
| ·稻瘟菌是研究丝状病原真菌分子遗传学的模式菌株 | 第11-12页 |
| ·稻瘟菌附着胞形成机理及其在致病过程中的作用 | 第12-14页 |
| ·稻瘟菌侵染过程 | 第12-13页 |
| ·稻瘟菌附着胞形成的机理及其在致病过程中的作用 | 第13-14页 |
| ·附着胞分化相关基因研究进展 | 第14-20页 |
| ·黑色素合成相关基因 | 第15页 |
| ·分生孢子形态和产量相关基因 | 第15-16页 |
| ·稻瘟菌识别寄主表面的基因和信号传导途径 | 第16-20页 |
| ·感知物体表面理化特征的基因 | 第16-17页 |
| ·信号传导途径 | 第17-20页 |
| ·环腺苷酸(cAMP)途径 | 第17-18页 |
| ·MAP激酶途径 | 第18-19页 |
| ·其他信号途径 | 第19-20页 |
| ·T-DNA在构建突变体库中的作用 | 第20-21页 |
| ·T-DNA插入技术及其特点 | 第20-21页 |
| ·根癌农杆菌介导的真菌转化 | 第21页 |
| ·本研究的目的意义和技术路线 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·稻瘟菌 | 第23页 |
| ·水稻品种 | 第23页 |
| ·菌种和质粒 | 第23页 |
| ·酶和生化试剂 | 第23页 |
| ·微孔滤膜 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-35页 |
| ·农杆菌介导的高效转化体系的建立 | 第24-25页 |
| ·稻瘟菌孢子的培养 | 第24页 |
| ·农杆菌的诱导培养 | 第24页 |
| ·稻瘟菌和农杆菌的共培养 | 第24页 |
| ·稻瘟菌转化体的筛选和分离纯化 | 第24-25页 |
| ·菌种保藏 | 第25页 |
| ·致病相关突变体筛选及分子检测 | 第25-28页 |
| ·分生孢子的光照产孢培养 | 第25页 |
| ·育苗和接种方法 | 第25页 |
| ·调查和记载 | 第25-26页 |
| ·稻瘟菌基因组DNA的提取及检测 | 第26-27页 |
| ·质粒pBHt2的提取及检测 | 第27-28页 |
| ·T-DNA插入的分子检测 | 第28页 |
| ·突变体的生物学表型观察及遗传分析 | 第28-29页 |
| ·突变体的交配型鉴定及其分析 | 第28页 |
| ·突变体的生物学特性 | 第28-29页 |
| ·菌落生长及形态的观察 | 第29页 |
| ·分生孢子形态及产孢量的比较 | 第29页 |
| ·突变体侵染时附着胞的形态观察 | 第29页 |
| ·侵入寄主相关突变体T-DNA插入位点的侧翼序列的扩增及分析 | 第29-35页 |
| ·TAIL-PCR扩增 | 第29-31页 |
| ·TAIL-PCR扩增产物回收 | 第31-32页 |
| ·TAIL-PCR产物的克隆 | 第32-34页 |
| ·TAIL-PCR产物和载体的连接 | 第32页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的PCR法鉴定 | 第33-34页 |
| ·TAIL-PCR产物的测序和分析 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-54页 |
| ·T-DNA插入突变转化效率 | 第35页 |
| ·T-DNA插入突变体田间致病性测定结果 | 第35-37页 |
| ·稻瘟菌基因组DNA的质量检测 | 第37页 |
| ·T-DNA插入的PCR检测 | 第37-38页 |
| ·突变体有性世代形成能力 | 第38-39页 |
| ·突变体的生物学特性观察 | 第39-44页 |
| ·T-DNA插入位点的侧翼序列扩增和分析 | 第44-54页 |
| ·T-DNA插入位点的侧翼序列扩增 | 第44-46页 |
| ·TAIL-PCR产物的克隆 | 第46页 |
| ·T-DNA插入位点的侧翼序列的序列分析 | 第46-54页 |
| 4 讨论 | 第54-58页 |
| ·关于稻瘟菌的遗传转化效率和突变体库构建问题 | 第54-55页 |
| ·关于T-DNA的插入问题 | 第55页 |
| ·关于突变体的表型效应问题 | 第55-56页 |
| ·突变体有性世代形成能力 | 第56页 |
| ·TAIL-PCR技术 | 第56-58页 |
| 5 结论与进一步解决的问题 | 第58-59页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·有待进一步解决的问题 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录 突变体测序比对结果 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75页 |