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香蕉延长因子1A(EF-1A)基因全长cDNA的克隆及其特征分析

1 前言第1-24页
   ·香蕉概述第7-8页
     ·香蕉的分类第7页
     ·香蕉的生物学特性第7-8页
     ·香蕉的经济价值第8页
   ·香蕉果实采后生理学及分子生物学研究现状第8-13页
     ·香蕉采后生理学的研究第8-9页
     ·香蕉采后分子生物学的研究第9-13页
       ·采后果实乙烯生物合成相关基因的克隆第9页
       ·采用差异筛选方法分离果实成熟相关基因第9-10页
       ·重要基因的克隆与表达第10-13页
   ·延长因子研究进展第13-20页
     ·蛋白质合成延伸因子的生理作用第14-17页
     ·蛋白质合成过程中延长因子的作用机制第17-18页
     ·延伸因子的修饰和抑制第18-20页
       ·eEF1的翻译后修饰第18-19页
       ·eEF2的修饰和抑制第19-20页
   ·植物蛋白质合成延伸因子的应用第20-21页
     ·发现新型杀菌剂第20页
     ·研究系统发育第20页
     ·作为细胞生长发育状况的指标第20-21页
   ·香蕉中延长因子的研究进展第21页
   ·cDNA文库的筛选研究概况第21-22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
   ·技术路线第23-24页
2 材料与方法第24-33页
   ·实验材料、试剂与仪器第24页
     ·材料第24页
     ·试剂第24页
     ·仪器设备第24页
   ·实验方法第24-33页
     ·cDNA文库的筛选第24-30页
       ·引物的设计第24页
       ·对cDNA文库的初步筛选第24-26页
       ·库的稀释第26页
       ·列PCR第26页
       ·孔PCR第26-27页
       ·孔稀释第27页
       ·铺平板第27-28页
       ·噬菌体斑的鉴定第28页
       ·转入E.coli BM25.8第28页
       ·质粒DNA的微量提取第28-29页
       ·PCR鉴定第29-30页
       ·序列测定第30页
     ·基因表达特征分析第30-33页
       ·RNA的提取第30-31页
       ·cDNA第一链的合成第31-32页
       ·PCR扩增第32-33页
         ·引物设计第32页
         ·反应体系及程序第32-33页
3 结果与分析第33-44页
   ·cDNA文库的筛选第33-35页
     ·筛库结果第33页
     ·序列测序结果第33-35页
   ·生物信息学分析第35-42页
     ·CDZ02与SSH片段BR-85进行同源性分析第35-36页
     ·同源性分析第36-38页
     ·用GENSCAN对序列进行ORF分析第38-39页
     ·保守结构域分析第39-41页
     ·香蕉与其他生物延长因子1A的氨基酸序列同源性比较第41-42页
     ·基因登录Genebank第42页
   ·RNA的提取第42-43页
   ·RT-PCR方法分析EF1A基因的表达第43-44页
     ·EF1A基因在香蕉不同器官和果实成熟不同阶段的表达第43页
     ·凝胶电泳图象的Scion image软件分析第43-44页
4 讨论第44-48页
   ·多基因编码香蕉延长因子1A第44-45页
   ·RT-PCR用于基因表达研究第45-46页
   ·香蕉中延长因子1A(EF1A)的表达第46-48页
5 结论第48-49页
参考文献第49-55页
附录第55-61页
 缩写词(ABBREVIATION)第55-56页
 测序图第56-61页
致谢第61页

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