几种蔬菜ACC氧化酶基因的克隆与鉴定
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-27页 |
| 1 课题的提出 | 第14页 |
| 2 前人研究工作 | 第14-26页 |
| ·乙烯的生物合成及其影响因素 | 第14-16页 |
| ·乙烯的生理作用 | 第16-19页 |
| ·调控乙烯的研究进展 | 第19-24页 |
| ·RNAi研究进展 | 第24-26页 |
| 3 本研究的目的及内容 | 第26-27页 |
| 第二章 番茄ACC氧化酶基因的克隆与鉴定 | 第27-64页 |
| 1 前言 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-36页 |
| ·植物材料、菌株、质粒、试剂 | 第28页 |
| ·LeACOll基因的克隆 | 第28页 |
| ·LeACOll基因的表达分析 | 第28-29页 |
| ·LeACOll基因上游启动子的克隆 | 第29页 |
| ·LeACOll基因植物表达载体构建 | 第29-35页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第35页 |
| ·转基因番茄植株的分子检测 | 第35-36页 |
| ·LeACOll基因启动子序列鉴定与分析 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-60页 |
| ·LeACOll基因的克隆及序列分析 | 第36-41页 |
| ·LeACOll基因上游启动子的克隆及分析 | 第41-42页 |
| ·LeACOll基因在番茄不同组织中的表达分析 | 第42-43页 |
| ·LeACOll基因植物表达载体的构建 | 第43-46页 |
| ·转基因番茄植株的获得 | 第46-47页 |
| ·转基因番茄植株的分子鉴定 | 第47-52页 |
| ·上游启动子区调控元件分析 | 第52-57页 |
| ·转基因植株叶片乙烯生成速率分析 | 第57-58页 |
| ·转基因植株后代的遗传分析 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| ·三种载体在内源抑制上的不同 | 第60-61页 |
| ·遗传转化上的难题 | 第61-62页 |
| ·上游调控序列的克隆方法 | 第62-63页 |
| ·启动子元件 | 第63-64页 |
| 第三章 黄瓜ACC氧化酶基因的克隆及鉴定 | 第64-81页 |
| 1 前言 | 第64-65页 |
| 2 材料与方法 | 第65-68页 |
| ·植物材料 | 第65页 |
| ·黄瓜总DNA的提取 | 第65页 |
| ·黄瓜ACO基因及上游序列的PCR扩增 | 第65页 |
| ·序列分析 | 第65页 |
| ·Southern杂交分析 | 第65-66页 |
| ·RT-PCR及Northern杂交分析 | 第66页 |
| ·RNAi载体构建 | 第66页 |
| ·黄瓜的遗传转化 | 第66-68页 |
| ·转基因黄瓜植株的分子杂交 | 第68页 |
| ·RNAi转基因黄瓜植株的形态观察 | 第68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-78页 |
| ·黄瓜ACO基因及其上游序列的获得 | 第68-69页 |
| ·黄瓜CsACO4基因的序列分析 | 第69-72页 |
| ·CsACO基因推断的氨基酸序列的系统进化分析 | 第72页 |
| ·CsACO4基因在黄瓜基因组中的分布 | 第72-73页 |
| ·CsACO4基因表达分析 | 第73-75页 |
| ·CsACO4基因RNAi载体的构建 | 第75页 |
| ·转基因黄瓜植株的获得 | 第75-76页 |
| ·转基因黄瓜植株的分子检测 | 第76-77页 |
| ·转基因材料的表型观察 | 第77-78页 |
| 4 讨论 | 第78-81页 |
| ·同源序列克隆 | 第78页 |
| ·上游序列的表达调控 | 第78-79页 |
| ·ACC氧化酶与黄瓜性别分化的关系 | 第79页 |
| ·黄瓜遗传转化的难点及如何提高阳性率 | 第79-81页 |
| 第四章 花椰菜ACC氧化酶基因的克隆及遗传转化 | 第81-93页 |
| 1 前言 | 第81-82页 |
| ·问题的提出 | 第81页 |
| ·前人研究进展 | 第81-82页 |
| ·研究的内容 | 第82页 |
| 2 材料与方法 | 第82-85页 |
| ·材料 | 第82-83页 |
| ·花椰菜ACO基因的克隆 | 第83页 |
| ·序列测定及同源性分析 | 第83页 |
| ·BoACO基因表达检测 | 第83页 |
| ·BoACO基因RNAi载体的构建 | 第83页 |
| ·花椰菜下胚轴的遗传转化 | 第83-85页 |
| ·转基因花椰菜植株的分子检测 | 第85页 |
| ·转基因花椰菜植株叶片ACC氧化酶活性的测定 | 第85页 |
| 3 结果与分析 | 第85-91页 |
| ·ACO基因的克隆及序列分析 | 第85-86页 |
| ·BoACO的组织特异性分析 | 第86-87页 |
| ·BoACO基因的RNA干涉载体构建 | 第87-88页 |
| ·转基因花椰菜植株的获得 | 第88页 |
| ·转基因花椰菜植株的分子检测 | 第88-90页 |
| ·转基因花椰菜植株的ACC氧化酶活性分析 | 第90-91页 |
| 4 讨论 | 第91-93页 |
| ·RNAi对内源基因的抑制 | 第91页 |
| ·花椰菜的遗传转化 | 第91-93页 |
| 第五章 3种蔬菜ACC氧化酶基因之间的比较 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-106页 |
| 附录 | 第106-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
