缩略语表 | 第1-16页 |
中文摘要 | 第16-18页 |
ABSTRACT | 第18-21页 |
前言 | 第21-28页 |
第一章 脂质体体外心肌细胞靶向性的研究方法 | 第28-43页 |
第一节 乳鼠心肌细胞的原代分离培养 | 第28-31页 |
1 仪器与材料 | 第28页 |
2 实验方法 | 第28-30页 |
·乳鼠心肌细胞的原代分离培养 | 第28-29页 |
·基本原理 | 第28-29页 |
·试液的配制 | 第29页 |
·分离培养方法 | 第29页 |
·细胞存活率评定 | 第29-30页 |
·纯度评定 | 第30页 |
3 实验结果 | 第30页 |
4 讨论 | 第30-31页 |
第二节 细胞蛋白总含量的测定 | 第31-33页 |
1 仪器与材料 | 第31页 |
2 实验方法 | 第31-32页 |
·原理 | 第31页 |
·试剂配制 | 第31-32页 |
·标准曲线的绘制 | 第32页 |
·细胞裂解液中细胞蛋白含量的测定 | 第32页 |
3 实验结果 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33页 |
第三节 NBD膜荧光标记脂质体的制备及荧光强度测定 | 第33-36页 |
1 仪器与材料 | 第33-34页 |
2 实验方法 | 第34-35页 |
·NBD膜荧光标记脂质体的制备 | 第34页 |
·NBD荧光的测定 | 第34页 |
·NBD-PC标准溶液的配制 | 第34页 |
·标准曲线的绘制 | 第34页 |
·精密度测定 | 第34页 |
·脂质体荧光标记率的测定 | 第34-35页 |
3 实验结果 | 第35-36页 |
·NBD膜荧光标记脂质体的制备及荧光标记率 | 第35页 |
·NBD荧光标准曲线 | 第35-36页 |
·NBD荧光测定精密度和回收率 | 第36页 |
4 讨论 | 第36页 |
第四节 心肌细胞对脂质体摄取的测定 | 第36-39页 |
1 仪器与材料 | 第36页 |
2 实验方法 | 第36-37页 |
·心肌细胞与脂质体共同培养条件的选择 | 第36-37页 |
·心肌细胞摄取脂质体的测定方法 | 第37页 |
·样品测定 | 第37页 |
3 实验结果 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-39页 |
第五节 荷电及 PEG修饰对脂质体心肌细胞靶向性的影响 | 第39-42页 |
1 仪器与材料 | 第39页 |
2 实验方法 | 第39-40页 |
·NBD膜荧光标记脂质体的制备 | 第39页 |
·荷电及 PEG修饰对脂质体心肌细胞靶向性影响的测定 | 第39-40页 |
3 实验结果 | 第40-41页 |
·脂质体的粒径及Zeta电位 | 第40页 |
·荷电及 PEG修饰对脂质体心肌细胞靶向性的影响 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-42页 |
本章小结 | 第42-43页 |
第二章 脂质体体内心肌靶向性的研究方法 | 第43-60页 |
第一节 Calcein脂质体的制备 | 第43-46页 |
1 仪器与材料 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-44页 |
·Calcein脂质体的制备 | 第43-44页 |
·脂质体中 Calcein的含量测定 | 第44页 |
·Calcein测定标准曲线的绘制 | 第44页 |
·精密度测定 | 第44页 |
·回收率测定 | 第44页 |
·脂质体中Calcein的含量的测定 | 第44页 |
3 实验结果 | 第44-45页 |
·Calcein测定标准曲线 | 第44页 |
·精密度和回收率 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
第二节 组织中Calcein含量的测定方法 | 第46-49页 |
1 仪器与材料 | 第46页 |
2 实验方法 | 第46-47页 |
·血浆中Calcein含量测定标准曲线的绘制 | 第46页 |
·肝、脾组织中Calcein含量测定标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
·心、肺、肾组织中Calcein含量测定标准曲线的绘制 | 第47页 |
3 结果与讨论 | 第47-49页 |
·血浆及组织中Calcein含量测定标准曲线 | 第47-48页 |
·精密度与回收率 | 第48-49页 |
第三节 Calcein脂质体在小鼠体内的组织分布 | 第49-53页 |
1 仪器与材料 | 第49页 |
2 实验方法 | 第49页 |
·Calcein脂质体的制备 | 第49页 |
·血浆及组织样品制备 | 第49页 |
3 实验结果 | 第49-52页 |
4 讨论 | 第52-53页 |
第四节 粒径对脂质体心肌靶向性的影响 | 第53-56页 |
1 仪器与材料 | 第53页 |
2 实验方法 | 第53-54页 |
·Calcein脂质体的制备 | 第53页 |
·血浆及组织样品制备 | 第53-54页 |
3 实验结果 | 第54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
第五节 PEG修饰对脂质体心肌靶向性的影响 | 第56-58页 |
1 仪器与材料 | 第56页 |
2 实验方法 | 第56页 |
·Calcein脂质体的制备 | 第56页 |
·血浆及组织样品制备 | 第56页 |
·统计学处理 | 第56页 |
3 实验结果 | 第56-58页 |
4 讨论 | 第58页 |
本章小结 | 第58-60页 |
第三章 心肌靶向脂质体(PAC-L)的制备 | 第60-77页 |
第一节 导向化合物PAC的合成 | 第60-67页 |
1 仪器与材料 | 第60页 |
2 实验方法 | 第60-61页 |
·靶向化合物PAC的合成 | 第60-61页 |
·靶向化合物 PAC的结构鉴定 | 第61页 |
3 实验结果 | 第61-66页 |
·靶向化合物PAC的合成 | 第61-62页 |
·靶向化合物PAC的结构鉴定 | 第62-66页 |
4 讨论 | 第66-67页 |
第二节 PAC修饰脂质体(PAC-L)的制备 | 第67-70页 |
1 仪器与材料 | 第67页 |
2 实验方法 | 第67-68页 |
·PAC修饰脂质体(PAC-L)的制备 | 第67页 |
·PAC定量方法 | 第67-68页 |
·标准曲线的绘制 | 第67页 |
·精密度测定 | 第67页 |
·回收率测定 | 第67-68页 |
·PAC-L中PAC掺入率的测定 | 第68页 |
3 实验结果 | 第68-70页 |
·PAC测定标准曲线 | 第68-69页 |
·精密度与回收率 | 第69页 |
·PAC掺入率 | 第69-70页 |
第三节 导向化合物的活性考察 | 第70-72页 |
1 仪器与材料 | 第70页 |
2 实验方法 | 第70-71页 |
·NBD荧光标记的PAC-L的制备 | 第70页 |
·PAC对脂质体与心肌细胞亲和性影响的定性观察 | 第70页 |
·PAC加入量对PAC-L心肌细胞靶向性的影响 | 第70-71页 |
3 实验结果 | 第71-72页 |
·PAC对脂质体与心肌细胞亲和性影响的定性观察 | 第71页 |
·PAC加入量对PAC-L心肌细胞靶向性的影响 | 第71-72页 |
4 讨论 | 第72页 |
第四节 PAC对脂质体在血清中渗漏的影响 | 第72-75页 |
1 仪器与材料 | 第72-73页 |
2 实验方法 | 第73页 |
·包封 Calcein的PAC-L的制备 | 第73页 |
·PAC的加入对脂质体在血清中渗漏的影响 | 第73页 |
3 实验结果 | 第73-74页 |
4 讨论 | 第74-75页 |
第五节 PAC-L的安全性考察 | 第75-76页 |
1 仪器与材料 | 第75页 |
2 实验方法 | 第75页 |
·PAC-L的制备 | 第75页 |
·体外细胞安全性考察 | 第75页 |
·体内安全性考察 | 第75页 |
3 结果与讨论 | 第75-76页 |
·体外安全性 | 第75-76页 |
·体内安全性 | 第76页 |
本章小结 | 第76-77页 |
第四章 PAC-L的体外心肌细胞靶向性研究 | 第77-90页 |
第一节 脂质浓度及培养时间对心肌细胞摄取PAC-L的影响 | 第77-80页 |
1 仪器与材料 | 第77页 |
2 实验方法 | 第77-78页 |
·PAC-L的制备及特征 | 第77页 |
·脂质浓度对心肌细胞摄取的影响 | 第77-78页 |
·培养时间对心肌细胞摄取的影响 | 第78页 |
3 实验结果 | 第78-79页 |
·PAC-L的特征 | 第78页 |
·脂质浓度对心肌细胞摄取的影响 | 第78页 |
·培养时间对心肌细胞摄取的影响 | 第78-79页 |
4 讨论 | 第79-80页 |
第二节 PAC-L的心肌细胞靶向性及机理研究 | 第80-85页 |
1 仪器与材料 | 第80页 |
2 实验方法 | 第80-81页 |
·NBD荧光标记的PAC-L的制备 | 第80页 |
·Esmolol对心肌细胞摄取PAC-L的影响 | 第80页 |
·心肌细胞与非心肌细胞对PAC-L的摄取 | 第80页 |
·缺氧对心肌细胞摄取PAC-L的影响 | 第80页 |
·PAC-L对心肌细胞摄取方式的影响 | 第80-81页 |
3 结果与讨论 | 第81-85页 |
·Esmolol对心肌细胞摄取PAC-L的影响 | 第81页 |
·心肌细胞与非心肌细胞对PAC-L的摄取 | 第81-82页 |
·缺氧对心肌细胞摄取PAC-L的影响 | 第82-83页 |
·PAC-L对心肌细胞摄取方式的影响 | 第83-85页 |
第三节 PEG修饰对心肌细胞摄取PAC-L的影响 | 第85-86页 |
1 仪器与材料 | 第85页 |
2 实验方法 | 第85页 |
·NBD荧光标记的PAC-L的制备 | 第85页 |
·PEG修饰对心肌细胞摄取的影响 | 第85页 |
3 实验结果 | 第85页 |
4 讨论 | 第85-86页 |
第四节 PAC-L对缺氧心肌细胞的保护作用 | 第86-88页 |
1 仪器与材料 | 第86页 |
2 实验方法 | 第86-87页 |
·PAC-L的制备 | 第86页 |
·PAC-L对缺氧心肌细胞的保护作用 | 第86-87页 |
3 实验结果 | 第87页 |
4 讨论 | 第87-88页 |
本章小结 | 第88-90页 |
第五章 PAC-L的体内心肌靶向性研究 | 第90-107页 |
第一节 PAC-L在小鼠体内的组织分布及心肌靶向性评价 | 第90-97页 |
1 仪器与材料 | 第90页 |
2 实验方法 | 第90-91页 |
·包封 Calcein的PAC-L的制备 | 第90-91页 |
·血浆及组织样品制备 | 第91页 |
·靶向性评价 | 第91页 |
3 结果与讨论 | 第91-97页 |
·Plain-L和PAC-L的粒径及 Zeta电位 | 第91页 |
·PAC-L在小鼠体内的组织分布 | 第91-92页 |
·PAC-L的心肌靶向性评价 | 第92-97页 |
第二节 PEG修饰的PAC-L在小鼠体内的组织分布及心肌靶向性评价 | 第97-106页 |
1 仪器与材料 | 第97页 |
2 实验方法 | 第97页 |
·包封 Calcein的PAC-L_(PEG)的制备 | 第97页 |
·血浆及组织样品制备 | 第97页 |
·靶向性评价 | 第97页 |
·统计学处理 | 第97页 |
3 结果与讨论 | 第97-106页 |
·Plain-L_(PEG)和 PAC-L_(PEG)的粒径及 Zeta电位 | 第97-98页 |
·PAC-L_(PEG)在小鼠体内的组织分布 | 第98页 |
·PAC-L_(PEG)的心肌靶向性评价 | 第98-106页 |
本章小结 | 第106-107页 |
第六章 bFGF心肌靶向脂质体的制备 | 第107-121页 |
第一节 bFGF的活性及含量测定方法 | 第107-111页 |
1 仪器与材料 | 第107页 |
2 实验方法 | 第107-110页 |
·bFGF活性测定方法 | 第107-108页 |
·MTT活性检测法原理 | 第107-108页 |
·MTT法测定bFGF活性 | 第108页 |
·bFGF原液活性测定 | 第108页 |
·bFGF含量测定方法 | 第108-110页 |
·ELISA测定原理 | 第108-109页 |
·ELISA测定bFGF含量 | 第109页 |
·标准曲线的绘制 | 第109-110页 |
3 结果与讨论 | 第110-111页 |
·bFGF原液活性测定 | 第110页 |
·ELISA测定bFGF含量标准曲线 | 第110-111页 |
第二节 bFGF心肌靶向脂质体的制备 | 第111-119页 |
1 仪器与材料 | 第111-112页 |
2 实验方法 | 第112-114页 |
·bFGF脂质体的制备方法 | 第112页 |
·bFGF脂质体制备方法对蛋白活性的影响 | 第112页 |
·bFGF脂质体包封率的测定 | 第112页 |
·影响bFGF脂质体包封率的因素考察 | 第112-113页 |
·Chol对包封率的影响 | 第112页 |
·SPG对包封率的影响 | 第112页 |
·PAC对包封率的影响 | 第112-113页 |
·PDS-Chol对包封率的影响 | 第113页 |
·PEG对包封率的影响 | 第113页 |
·蔗糖对包封率及粒径的影响 | 第113页 |
·bFGF脂质体基本处方的确定 | 第113页 |
·bFGF脂质体的稳定性考察 | 第113页 |
·统计学处理 | 第113-114页 |
3 结果与讨论 | 第114-119页 |
·bFGF脂质体制备方法对蛋白活性的影响 | 第114-115页 |
·影响bFGF脂质体包封率的因素考察 | 第115-118页 |
·Chol对包封率的影响 | 第115页 |
·SPG对包封率的影响 | 第115-116页 |
·PAC对包封率的影响 | 第116页 |
·PDS-Chol对包封率的影响 | 第116页 |
·PEG对包封率的影响 | 第116-117页 |
·蔗糖对包封率及粒径的影响 | 第117-118页 |
·bFGF脂质体处方 | 第118页 |
·bFGF脂质体的稳定性 | 第118-119页 |
本章小结 | 第119-121页 |
第七章 bFGF心肌靶向脂质体的初步药效学考察 | 第121-142页 |
第一节 bFGF心肌靶向脂质体在大鼠心、肺的分布考察 | 第121-129页 |
1 仪器与材料 | 第121页 |
2 实验方法 | 第121-122页 |
·bFGF脂质体的制备 | 第121页 |
·组织样品制备 | 第121-122页 |
·免疫组化染色 | 第122页 |
·图像分析 | 第122页 |
3 实验结果 | 第122-129页 |
·bFGF免疫组化染色 | 第122-127页 |
·图像分析 | 第127-129页 |
4 讨论 | 第129页 |
第二节 bFGF心肌靶向脂质体对心肌保护作用的初步药效学考察 | 第129-141页 |
1 仪器与材料 | 第129页 |
2 实验方法 | 第129-131页 |
·bFGF脂质体的制备 | 第129-130页 |
·组织样品制备 | 第130页 |
·心肌组织病理学检查 | 第130页 |
·血清乳酸脱氢酶含量测定 | 第130页 |
·心肌组织胶原含量测定 | 第130页 |
·心肌组织丙二醛含量测定 | 第130-131页 |
·心肌组织 ATP酶含量测定 | 第131页 |
3 实验结果 | 第131-140页 |
·心肌组织病理学变化 | 第131-137页 |
·血清乳酸脱氢酶含量 | 第137页 |
·心肌组织胶原含量 | 第137页 |
·心肌组织丙二醛含量 | 第137页 |
·心肌组织 ATP酶含量 | 第137-140页 |
4 讨论 | 第140-141页 |
本章小结 | 第141-142页 |
全文结论 | 第142-144页 |
参考文献 | 第144-151页 |
致谢 | 第151-152页 |
作者简介 | 第152-153页 |