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心肌靶向脂质体的研究

缩略语表第1-16页
中文摘要第16-18页
ABSTRACT第18-21页
前言第21-28页
第一章 脂质体体外心肌细胞靶向性的研究方法第28-43页
 第一节 乳鼠心肌细胞的原代分离培养第28-31页
  1 仪器与材料第28页
  2 实验方法第28-30页
   ·乳鼠心肌细胞的原代分离培养第28-29页
     ·基本原理第28-29页
     ·试液的配制第29页
     ·分离培养方法第29页
   ·细胞存活率评定第29-30页
   ·纯度评定第30页
  3 实验结果第30页
  4 讨论第30-31页
 第二节 细胞蛋白总含量的测定第31-33页
  1 仪器与材料第31页
  2 实验方法第31-32页
   ·原理第31页
   ·试剂配制第31-32页
   ·标准曲线的绘制第32页
   ·细胞裂解液中细胞蛋白含量的测定第32页
  3 实验结果第32-33页
  4 讨论第33页
 第三节 NBD膜荧光标记脂质体的制备及荧光强度测定第33-36页
  1 仪器与材料第33-34页
  2 实验方法第34-35页
   ·NBD膜荧光标记脂质体的制备第34页
   ·NBD荧光的测定第34页
     ·NBD-PC标准溶液的配制第34页
     ·标准曲线的绘制第34页
     ·精密度测定第34页
   ·脂质体荧光标记率的测定第34-35页
  3 实验结果第35-36页
   ·NBD膜荧光标记脂质体的制备及荧光标记率第35页
   ·NBD荧光标准曲线第35-36页
   ·NBD荧光测定精密度和回收率第36页
  4 讨论第36页
 第四节 心肌细胞对脂质体摄取的测定第36-39页
  1 仪器与材料第36页
  2 实验方法第36-37页
   ·心肌细胞与脂质体共同培养条件的选择第36-37页
   ·心肌细胞摄取脂质体的测定方法第37页
   ·样品测定第37页
  3 实验结果第37-38页
  4 讨论第38-39页
 第五节 荷电及 PEG修饰对脂质体心肌细胞靶向性的影响第39-42页
  1 仪器与材料第39页
  2 实验方法第39-40页
   ·NBD膜荧光标记脂质体的制备第39页
   ·荷电及 PEG修饰对脂质体心肌细胞靶向性影响的测定第39-40页
  3 实验结果第40-41页
   ·脂质体的粒径及Zeta电位第40页
   ·荷电及 PEG修饰对脂质体心肌细胞靶向性的影响第40-41页
  4 讨论第41-42页
 本章小结第42-43页
第二章 脂质体体内心肌靶向性的研究方法第43-60页
 第一节 Calcein脂质体的制备第43-46页
  1 仪器与材料第43页
  2 实验方法第43-44页
   ·Calcein脂质体的制备第43-44页
   ·脂质体中 Calcein的含量测定第44页
     ·Calcein测定标准曲线的绘制第44页
     ·精密度测定第44页
     ·回收率测定第44页
     ·脂质体中Calcein的含量的测定第44页
  3 实验结果第44-45页
   ·Calcein测定标准曲线第44页
   ·精密度和回收率第44-45页
  4 讨论第45-46页
 第二节 组织中Calcein含量的测定方法第46-49页
  1 仪器与材料第46页
  2 实验方法第46-47页
   ·血浆中Calcein含量测定标准曲线的绘制第46页
   ·肝、脾组织中Calcein含量测定标准曲线的绘制第46-47页
   ·心、肺、肾组织中Calcein含量测定标准曲线的绘制第47页
  3 结果与讨论第47-49页
   ·血浆及组织中Calcein含量测定标准曲线第47-48页
   ·精密度与回收率第48-49页
 第三节 Calcein脂质体在小鼠体内的组织分布第49-53页
  1 仪器与材料第49页
  2 实验方法第49页
   ·Calcein脂质体的制备第49页
   ·血浆及组织样品制备第49页
  3 实验结果第49-52页
  4 讨论第52-53页
 第四节 粒径对脂质体心肌靶向性的影响第53-56页
  1 仪器与材料第53页
  2 实验方法第53-54页
   ·Calcein脂质体的制备第53页
   ·血浆及组织样品制备第53-54页
  3 实验结果第54页
  4 讨论第54-56页
 第五节 PEG修饰对脂质体心肌靶向性的影响第56-58页
  1 仪器与材料第56页
  2 实验方法第56页
   ·Calcein脂质体的制备第56页
   ·血浆及组织样品制备第56页
   ·统计学处理第56页
  3 实验结果第56-58页
  4 讨论第58页
 本章小结第58-60页
第三章 心肌靶向脂质体(PAC-L)的制备第60-77页
 第一节 导向化合物PAC的合成第60-67页
  1 仪器与材料第60页
  2 实验方法第60-61页
   ·靶向化合物PAC的合成第60-61页
   ·靶向化合物 PAC的结构鉴定第61页
  3 实验结果第61-66页
   ·靶向化合物PAC的合成第61-62页
   ·靶向化合物PAC的结构鉴定第62-66页
  4 讨论第66-67页
 第二节 PAC修饰脂质体(PAC-L)的制备第67-70页
  1 仪器与材料第67页
  2 实验方法第67-68页
   ·PAC修饰脂质体(PAC-L)的制备第67页
   ·PAC定量方法第67-68页
     ·标准曲线的绘制第67页
     ·精密度测定第67页
     ·回收率测定第67-68页
   ·PAC-L中PAC掺入率的测定第68页
  3 实验结果第68-70页
   ·PAC测定标准曲线第68-69页
   ·精密度与回收率第69页
   ·PAC掺入率第69-70页
 第三节 导向化合物的活性考察第70-72页
  1 仪器与材料第70页
  2 实验方法第70-71页
   ·NBD荧光标记的PAC-L的制备第70页
   ·PAC对脂质体与心肌细胞亲和性影响的定性观察第70页
   ·PAC加入量对PAC-L心肌细胞靶向性的影响第70-71页
  3 实验结果第71-72页
   ·PAC对脂质体与心肌细胞亲和性影响的定性观察第71页
   ·PAC加入量对PAC-L心肌细胞靶向性的影响第71-72页
  4 讨论第72页
 第四节 PAC对脂质体在血清中渗漏的影响第72-75页
  1 仪器与材料第72-73页
  2 实验方法第73页
   ·包封 Calcein的PAC-L的制备第73页
   ·PAC的加入对脂质体在血清中渗漏的影响第73页
  3 实验结果第73-74页
  4 讨论第74-75页
 第五节 PAC-L的安全性考察第75-76页
  1 仪器与材料第75页
  2 实验方法第75页
   ·PAC-L的制备第75页
   ·体外细胞安全性考察第75页
   ·体内安全性考察第75页
  3 结果与讨论第75-76页
   ·体外安全性第75-76页
   ·体内安全性第76页
 本章小结第76-77页
第四章 PAC-L的体外心肌细胞靶向性研究第77-90页
 第一节 脂质浓度及培养时间对心肌细胞摄取PAC-L的影响第77-80页
  1 仪器与材料第77页
  2 实验方法第77-78页
   ·PAC-L的制备及特征第77页
   ·脂质浓度对心肌细胞摄取的影响第77-78页
   ·培养时间对心肌细胞摄取的影响第78页
  3 实验结果第78-79页
   ·PAC-L的特征第78页
   ·脂质浓度对心肌细胞摄取的影响第78页
   ·培养时间对心肌细胞摄取的影响第78-79页
  4 讨论第79-80页
 第二节 PAC-L的心肌细胞靶向性及机理研究第80-85页
  1 仪器与材料第80页
  2 实验方法第80-81页
   ·NBD荧光标记的PAC-L的制备第80页
   ·Esmolol对心肌细胞摄取PAC-L的影响第80页
   ·心肌细胞与非心肌细胞对PAC-L的摄取第80页
   ·缺氧对心肌细胞摄取PAC-L的影响第80页
   ·PAC-L对心肌细胞摄取方式的影响第80-81页
  3 结果与讨论第81-85页
   ·Esmolol对心肌细胞摄取PAC-L的影响第81页
   ·心肌细胞与非心肌细胞对PAC-L的摄取第81-82页
   ·缺氧对心肌细胞摄取PAC-L的影响第82-83页
   ·PAC-L对心肌细胞摄取方式的影响第83-85页
 第三节 PEG修饰对心肌细胞摄取PAC-L的影响第85-86页
  1 仪器与材料第85页
  2 实验方法第85页
   ·NBD荧光标记的PAC-L的制备第85页
   ·PEG修饰对心肌细胞摄取的影响第85页
  3 实验结果第85页
  4 讨论第85-86页
 第四节 PAC-L对缺氧心肌细胞的保护作用第86-88页
  1 仪器与材料第86页
  2 实验方法第86-87页
   ·PAC-L的制备第86页
   ·PAC-L对缺氧心肌细胞的保护作用第86-87页
  3 实验结果第87页
  4 讨论第87-88页
 本章小结第88-90页
第五章 PAC-L的体内心肌靶向性研究第90-107页
 第一节 PAC-L在小鼠体内的组织分布及心肌靶向性评价第90-97页
  1 仪器与材料第90页
  2 实验方法第90-91页
   ·包封 Calcein的PAC-L的制备第90-91页
   ·血浆及组织样品制备第91页
   ·靶向性评价第91页
  3 结果与讨论第91-97页
   ·Plain-L和PAC-L的粒径及 Zeta电位第91页
   ·PAC-L在小鼠体内的组织分布第91-92页
   ·PAC-L的心肌靶向性评价第92-97页
 第二节 PEG修饰的PAC-L在小鼠体内的组织分布及心肌靶向性评价第97-106页
  1 仪器与材料第97页
  2 实验方法第97页
   ·包封 Calcein的PAC-L_(PEG)的制备第97页
   ·血浆及组织样品制备第97页
   ·靶向性评价第97页
   ·统计学处理第97页
  3 结果与讨论第97-106页
   ·Plain-L_(PEG)和 PAC-L_(PEG)的粒径及 Zeta电位第97-98页
   ·PAC-L_(PEG)在小鼠体内的组织分布第98页
   ·PAC-L_(PEG)的心肌靶向性评价第98-106页
 本章小结第106-107页
第六章 bFGF心肌靶向脂质体的制备第107-121页
 第一节 bFGF的活性及含量测定方法第107-111页
  1 仪器与材料第107页
  2 实验方法第107-110页
   ·bFGF活性测定方法第107-108页
     ·MTT活性检测法原理第107-108页
     ·MTT法测定bFGF活性第108页
   ·bFGF原液活性测定第108页
   ·bFGF含量测定方法第108-110页
     ·ELISA测定原理第108-109页
     ·ELISA测定bFGF含量第109页
     ·标准曲线的绘制第109-110页
  3 结果与讨论第110-111页
   ·bFGF原液活性测定第110页
   ·ELISA测定bFGF含量标准曲线第110-111页
 第二节 bFGF心肌靶向脂质体的制备第111-119页
  1 仪器与材料第111-112页
  2 实验方法第112-114页
   ·bFGF脂质体的制备方法第112页
   ·bFGF脂质体制备方法对蛋白活性的影响第112页
   ·bFGF脂质体包封率的测定第112页
   ·影响bFGF脂质体包封率的因素考察第112-113页
     ·Chol对包封率的影响第112页
     ·SPG对包封率的影响第112页
     ·PAC对包封率的影响第112-113页
     ·PDS-Chol对包封率的影响第113页
     ·PEG对包封率的影响第113页
     ·蔗糖对包封率及粒径的影响第113页
   ·bFGF脂质体基本处方的确定第113页
   ·bFGF脂质体的稳定性考察第113页
   ·统计学处理第113-114页
  3 结果与讨论第114-119页
   ·bFGF脂质体制备方法对蛋白活性的影响第114-115页
   ·影响bFGF脂质体包封率的因素考察第115-118页
     ·Chol对包封率的影响第115页
     ·SPG对包封率的影响第115-116页
     ·PAC对包封率的影响第116页
     ·PDS-Chol对包封率的影响第116页
     ·PEG对包封率的影响第116-117页
     ·蔗糖对包封率及粒径的影响第117-118页
   ·bFGF脂质体处方第118页
   ·bFGF脂质体的稳定性第118-119页
 本章小结第119-121页
第七章 bFGF心肌靶向脂质体的初步药效学考察第121-142页
 第一节 bFGF心肌靶向脂质体在大鼠心、肺的分布考察第121-129页
  1 仪器与材料第121页
  2 实验方法第121-122页
   ·bFGF脂质体的制备第121页
   ·组织样品制备第121-122页
   ·免疫组化染色第122页
   ·图像分析第122页
  3 实验结果第122-129页
   ·bFGF免疫组化染色第122-127页
   ·图像分析第127-129页
  4 讨论第129页
 第二节 bFGF心肌靶向脂质体对心肌保护作用的初步药效学考察第129-141页
  1 仪器与材料第129页
  2 实验方法第129-131页
   ·bFGF脂质体的制备第129-130页
   ·组织样品制备第130页
   ·心肌组织病理学检查第130页
   ·血清乳酸脱氢酶含量测定第130页
   ·心肌组织胶原含量测定第130页
   ·心肌组织丙二醛含量测定第130-131页
   ·心肌组织 ATP酶含量测定第131页
  3 实验结果第131-140页
   ·心肌组织病理学变化第131-137页
   ·血清乳酸脱氢酶含量第137页
   ·心肌组织胶原含量第137页
   ·心肌组织丙二醛含量第137页
   ·心肌组织 ATP酶含量第137-140页
  4 讨论第140-141页
 本章小结第141-142页
全文结论第142-144页
参考文献第144-151页
致谢第151-152页
作者简介第152-153页

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