0 前言 | 第1-25页 |
1 淋巴囊肿病毒的纯化 | 第25-31页 |
1.1 材料和方法 | 第25-26页 |
1.1.1 实验材料 | 第25页 |
1.1.2 实验方法 | 第25-26页 |
1.1.2.1 病毒的提纯 | 第25-26页 |
1.1.2.2 病毒的负染观察 | 第26页 |
1.2 结果 | 第26-29页 |
1.3 讨论 | 第29-31页 |
2 淋巴囊肿病毒核酸的提取和酶切图谱分析 | 第31-37页 |
2.1 材料和方法 | 第31-33页 |
2.1.1 实验材料 | 第31页 |
2.1.2 实验方法 | 第31-33页 |
2.1.2.1 病毒核酸的提取 | 第31-32页 |
2.1.2.2 核酸浓度的测定 | 第32页 |
2.1.2.3 病毒DNA的限制性内切酶图谱分析 | 第32-33页 |
2.2 结果 | 第33-35页 |
2.3 讨论 | 第35-37页 |
3 淋巴囊肿病毒的PCR检测技术 | 第37-46页 |
3.1 材料和方法 | 第37-39页 |
3.1.1 实验材料 | 第37页 |
3.1.2 实验方法 | 第37-39页 |
3.1.2.1 健康牙鲆组织DNA的提取 | 第37页 |
3.1.2.2 PCR引物的设计 | 第37-38页 |
3.1.2.3 以P1/P2为引物的一步PCR反应及退火温度的优化 | 第38-39页 |
3.1.2.4 巢式PCR反应及退火温度的优化 | 第39页 |
3.1.2.5 特异性实验 | 第39页 |
3.1.2.6 灵敏度实验 | 第39页 |
3.2 结果 | 第39-44页 |
3.3 讨论 | 第44-46页 |
4 淋巴囊肿病毒的斑点杂交(Dot-Blot)检测技术和Southern杂交分析 | 第46-56页 |
4.1 材料和方法 | 第46-50页 |
4.1.1 实验材料 | 第46页 |
4.1.2 实验方法 | 第46-50页 |
4.1.2.1 引物 | 第46页 |
4.1.2.2 PCR法快速制备DIG标记探针 | 第46-47页 |
4.1.2.3 DIG标记探针的纯化 | 第47-48页 |
4.1.2.4 用LCDV DIG标记探针斑点杂交法(Dot-Blot)的建立 | 第48-49页 |
4.1.2.5 用LCDV DIG标记探针的灵敏度实验 | 第49页 |
4.1.2.6 淋巴囊肿病毒的Southern杂交分析 | 第49-50页 |
4.1.2.7 对几种已知淋巴囊肿病毒主要核衣壳蛋白(Major capsid protein,mcp)基因序列酶切位点的分析 | 第50页 |
4.2 结果 | 第50-54页 |
4.3 讨论 | 第54-56页 |
5 淋巴囊肿病毒的原位杂交检测技术 | 第56-63页 |
5.1 材料和方法 | 第56-60页 |
5.1.1 实验材料 | 第56页 |
5.1.2 实验方法 | 第56-60页 |
5.1.2.1 载玻片和盖玻片的准备 | 第56页 |
5.1.2.2 淋巴囊肿病毒的核酸探针原位杂交检测技术 | 第56-58页 |
5.1.2.3 组织切片的苏木精—曙红染色 | 第58-60页 |
5.2 结果 | 第60页 |
5.3 讨论 | 第60-63页 |
6 淋巴囊肿病流行情况的调查 | 第63-77页 |
6.1 材料和方法 | 第63-65页 |
6.1.1 实验材料 | 第63页 |
6.1.2 实验方法 | 第63-65页 |
6.1.2.1 甲醛固定组织DNA的提取 | 第63-64页 |
6.1.2.2 运用PCR和原位杂交技术检测不同感染状态的患病牙鲆 | 第64页 |
6.1.2.3 运用PCR技术检测不同地区患病牙鲆 | 第64页 |
6.1.2.4 运用PCR技术检测不同患病鱼鲆 | 第64-65页 |
6.2 结果 | 第65-74页 |
6.3 讨论 | 第74-77页 |
参考文献 | 第77-86页 |
附录 | 第86-89页 |
致谢 | 第89页 |