英文缩略词表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-14页 |
英文摘要 | 第14-20页 |
引言 | 第20-22页 |
第一部分 趋化因子受体5在1型糖尿病发生发展中的作用机制研究 | 第22-77页 |
前言 | 第22-25页 |
实验材料 | 第25-30页 |
1 实验动物 | 第25页 |
2 主要化学药品和生物试剂 | 第25-27页 |
3 主要试剂的配制 | 第27-30页 |
实验方法 | 第30-40页 |
1 糖尿病NOD鼠T细胞培养 | 第30页 |
2 CCR5在糖尿病NOD鼠T细胞的表达 | 第30-31页 |
3 CCR5-RNAi质粒的构建及筛选 | 第31-32页 |
4 DEAE-dextran法转染CCR5-RNAi质粒 | 第32-33页 |
5 流式细胞仪检测转染shRNAi质粒后CCR5含量的变化 | 第33-34页 |
6 流式细胞仪分选转染CCR5-shRNA-1质粒后的GFP~+和GFP~-T细胞 | 第34页 |
7 GFP~+和GFP~-T细胞RT-PCR检测CCR5的变化 | 第34-36页 |
8 GFP~+和GFP~-T细胞细胞周期的检测 | 第36页 |
9 GFP~+和GFP~-T细胞Th1和Th2细胞因子的检测 | 第36-37页 |
10 分别过继CCR5~+、CCR5~-和CCR5~(+/-)T细胞于NOD.scid鼠观察糖尿病发病情况 | 第37-40页 |
实验结果 | 第40-58页 |
1 糖尿病NOD鼠T细胞培养 | 第40-41页 |
2 CCR5在糖尿病NOD鼠T细胞的表达 | 第41-42页 |
3 CCR5-RNAi质粒的构建及筛选 | 第42-43页 |
4 DEAE-dextran法转染CCR5-RNAi质粒 | 第43-44页 |
5 流式细胞仪检测转染shRNAi质粒后CCR5含量的变化 | 第44-46页 |
6 流式细胞仪分选转染CCR5-shRNA-1质粒后的GFP~+和GFP~-T细胞 | 第46-48页 |
7 GFP~+和GFP~-T细胞RT-PCR检测CCR5的变化 | 第48-49页 |
8 GFP~+和GFP~-T细胞细胞周期的检测 | 第49-50页 |
9 转染CCR5-shRNA-1质粒对T细胞分泌细胞因子的影响 | 第50-51页 |
10 流式细胞仪分选CCR5~+和CCR5~-T细胞 | 第51页 |
11 CCR5~+T细胞对TIDM发病的影响 | 第51-58页 |
讨论 | 第58-69页 |
1 研究CCR5与1型糖尿病关系的必要性 | 第58-60页 |
2 应用RNAi技术研究CCR5与1型糖尿病的可行性 | 第60-63页 |
3 糖尿病NOD鼠T细胞CCR5 RNAi后的生物学变化 | 第63-65页 |
4 CCR5参与1型糖尿病病程的作用机理探讨 | 第65-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
第二部分 趋化因子受体5在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义 | 第77-87页 |
前言 | 第77-78页 |
试剂和仪器 | 第78-80页 |
1 主要试剂 | 第78页 |
2 主要试剂配制 | 第78-79页 |
3 主要仪器 | 第79-80页 |
实验方法 | 第80-81页 |
1 CCR5免疫组化的检测 | 第80页 |
2 ELISA检测相关趋化因子的含量 | 第80-81页 |
实验结果 | 第81-83页 |
1 CCR5在乳腺浸润性导管癌上的表达 | 第81-82页 |
2 乳腺浸润性导管癌患者血清中相关趋化因子的含量 | 第82-83页 |
讨论 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-87页 |
第三部分 胸腺素原a的克隆表达和初步活性测定 | 第87-98页 |
前言 | 第87-88页 |
试剂和仪器 | 第88-90页 |
1 主要试剂 | 第88页 |
2 主要试剂配制 | 第88-89页 |
3 主要仪器 | 第89-90页 |
实验方法 | 第90-94页 |
1 ProTα基因的RT-PCR扩增 | 第90页 |
2 ProTαPCR产物胶回收 | 第90-91页 |
3 PCR产物及载体pBV220的双酶切 | 第91页 |
4 ProTα的在大肠杆菌中的诱导表达 | 第91-93页 |
5 rhProTα的活性测定 | 第93-94页 |
实验结果 | 第94-96页 |
1 RT-PCR扩增ProTα序列的电泳结果 | 第94页 |
2 ProTα在大肠杆菌中的表达 | 第94-95页 |
3 表达产物活性的初步测定 | 第95-96页 |
讨论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
附录一 文献综述(一) | 第99-119页 |
文献综述(二) | 第110-119页 |
附录二 RNAi质粒测序报告 | 第119-122页 |
附录三 博士就读期间发表的论文 | 第122-126页 |