第一章 问题提出及前人研究进展 | 第1-23页 |
·芪合成酶相关研究进展 | 第11-13页 |
·芪合成酶(STS)的酶学性质 | 第11-12页 |
·芪合成酶基因的研究 | 第12页 |
·芪合成酶(STS)的产物白藜芦醇研究进展 | 第12-13页 |
·乙醛脱氢酶基因研究进展 | 第13-14页 |
·基因体外表达技术研究进展 | 第14-17页 |
·基因体外表达技术的应用 | 第14页 |
·基因体外表达系统 | 第14-17页 |
·大肠杆菌表达系统 | 第14-16页 |
·酵母表达系统 | 第16-17页 |
·昆虫细胞表达系统 | 第17页 |
·哺乳动物细胞表达系统 | 第17页 |
·重组蛋白包涵体复性研究进展 | 第17-20页 |
·包涵体的形成机制 | 第17-18页 |
·包涵体的复性方法研究进展 | 第18-20页 |
·抗体技术在植物研究中的应用 | 第20-22页 |
·抗体技术应用于植物体内目标成分的精细定位 | 第21页 |
·抗体技术用于转基因植物的检测 | 第21-22页 |
·抗体技术用于植物抗病感病检测 | 第22页 |
·本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-34页 |
·实验材料 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·PCR 模板与引物 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-34页 |
·芪合成酶基因cDNA 全长序列的PCR 扩增 | 第23-24页 |
·目的基因DNA 片段的回收和克隆 | 第24-27页 |
·目的基因DNA 片段的回收 | 第24页 |
·回收片段与克隆载体(pGEM-T-easy)的连接反应 | 第24页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备与连接产物的转化 | 第24-26页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第26页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第26-27页 |
·原核表达载体构建 | 第27页 |
·目标片段的回收 | 第27页 |
·目的基因与pGEX-4T-1 载体的连接及转化 | 第27页 |
·重组原核表达载体酶切鉴定 | 第27页 |
·芪合成酶基因和乙醛脱氢酶基因在大肠杆菌中的诱导融合表达 | 第27-29页 |
·芪合成酶融合蛋白包涵体复性,纯化 | 第29-30页 |
·目的融合蛋白可溶性检测 | 第29页 |
·包涵体的变复性实验与目的融合蛋白的纯化 | 第29-30页 |
·芪合成酶融合蛋白多克隆抗体的制备 | 第30-32页 |
·芪合成酶融合蛋白表达产量的测定 | 第30-31页 |
·免疫实验及多克隆抗血清的获得 | 第31-32页 |
·芪合成酶融合蛋白多克隆抗体的Western blot 检测 | 第32-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-42页 |
·中国野生葡萄芪合成酶基因和乙醛脱氢酶基因的体外扩增 | 第34-36页 |
·乙醛脱氢酶基因和芪合成酶基因的PCR 扩增 | 第34页 |
·乙醛脱氢酶基因和芪合成酶基因的克隆和测序 | 第34-36页 |
·芪合成酶基因和醛脱氢酶基因在大肠杆菌中的诱导融和表达 | 第36-39页 |
·芪合成酶融合蛋白包涵体复性与纯化 | 第39页 |
·目的蛋白多克隆抗血清制备 | 第39-42页 |
·目的蛋白包涵体产量的测定 | 第39-40页 |
·抗原的制备 | 第40-41页 |
·多克隆抗血清的Western blot 检测 | 第41-42页 |
第四章 讨论 | 第42-44页 |
·乙醛脱氢酶基因和芪合成酶基因的原核表达 | 第42页 |
·芪合成酶融合蛋白的复性 | 第42-43页 |
·多克隆抗血清的制备 | 第43-44页 |
第五章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |