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白菜抗虫基因工程及bar基因的遗传飘移研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
图表目录第10-13页
缩略词汇表第13-14页
第一章 绪论第14-26页
   ·研究目的和意义第14页
   ·国内外研究现状第14-26页
     ·抗虫基因工程第14-18页
     ·白菜类植物的转基因技术第18-22页
     ·芸薹属转基因作物的生态安全性评价第22-26页
第二章 白菜抗虫基因工程第26-66页
 1 植物表达抗虫基因载体的构建第26-31页
   ·材料与方法第26页
     ·菌株和质粒第26页
     ·酶和试剂第26页
     ·载体构建第26页
   ·结果与分析第26-31页
     ·载体pBBBast-PinⅡ的构建第26-27页
     ·载体pBBBast-SIP的构建第27-29页
     ·双价抗虫载体pBBBast-PinⅡ-SIP的构建第29-31页
 2 结球白菜的叶盘法转化及转化株的评价第31-43页
   ·材料第31页
   ·方法第31-33页
     ·无菌苗及外植体的获得第31页
     ·培养基制备第31页
     ·外植体转化第31-32页
     ·不定芽诱导及抗性株筛选第32页
     ·抗性株的分子鉴定第32-33页
     ·通过抗性株的游离小孢子培养获得纯合材料第33页
     ·转化植株的抗虫性测定第33页
   ·实验 结果和分析第33-40页
     ·影响结球白菜不定芽再生频率的因素第33-36页
     ·结球白菜的PinⅡ基因转化及转化株筛选第36页
     ·抗性株的分子鉴定第36-37页
     ·抗性株的小孢子培养及再生株中bar基因的遗传分离第37-38页
     ·PinⅡ转基因植株的抗虫性测定第38-40页
   ·讨论第40-43页
     ·结球白菜的不定芽再生及基因转化第40-41页
     ·转基因结球白菜的抗虫性第41-43页
 3 不结球白菜的真空渗入转化及转化株的评价第43-66页
   ·材料准备第43页
     ·“49菜心”准备第43页
     ·农杆菌液的准备第43页
   ·方法第43-45页
     ·真空渗入转化第43-44页
     ·处理植株的栽培管理第44页
     ·抗性株的筛选第44页
     ·转化株的分子鉴定第44-45页
     ·转化株的遗传分析及抗虫性鉴定第45页
   ·结果与分析第45-62页
     ·pinⅡ基因的转化情况第45页
     ·SIP及PinⅡ-SIP基因的转化情况第45-46页
     ·转基因株的分子鉴定第46-50页
     ·影响转化率的几个因素第50-55页
     ·抗性株后代外源基因的遗传分析第55-59页
     ·pinⅡ转基因植株的小菜蛾饲喂实验第59-62页
   ·讨论第62-66页
     ·关于真空渗入转化第62-63页
     ·关于转基因植株第63-64页
     ·关于抗虫性第64-66页
图版1第66-69页
第三章 转基因白菜中外源基因的遗传飘逸研究第69-92页
 1 材料与方法第69-72页
   ·试验材料第69-70页
     ·转基因白菜第69页
     ·十字花科常见野生杂草第69页
     ·十字花科常见栽培作物第69-70页
   ·研究方法第70-72页
     ·传粉试验第70-71页
     ·杂种筛选及形态观察第71页
     ·氯酚红(chlorophenol red,CR)实验第71页
     ·PCR鉴定第71页
     ·Southern杂交第71页
     ·减数分裂观察第71-72页
     ·杂种花粉量、花粉形态及活力第72页
     ·种子在释放田间的无意散落及生存力调查第72页
     ·转基因白菜种子田间贮藏活力实验第72页
 2 结果与分析第72-90页
   ·转基因白菜的田间性状第72-74页
     ·生物学性状第72-74页
     ·转基因表达性状第74页
   ·野生条件下转基因白菜外源基因漂移的可能性第74-77页
     ·我国常见十字花科野生植物第74-76页
     ·常见十字花科栽培作物及其生物学特性第76-77页
     ·野生条件下转基因白菜与近缘植物自然杂交可能性评价第77页
   ·栽培条件下转基因白菜基因漂移的可能性第77-90页
     ·温室人工授粉条件下杂种形成能力第77-82页
     ·人工授粉条件下入侵基因的传递能力第82-84页
     ·转基因白菜花粉流的田间试验第84-89页
     ·转基因白菜种子的库存持久力实验第89-90页
 3 讨论第90-92页
   ·插入基因对白菜的影响第90页
   ·基因漂移风险性第90-91页
     ·人工授粉引起的基因流动第90-91页
     ·自然授粉条件下的基因流分析第91页
   ·侵入基因在群落中的保持能力第91页
   ·控制措施第91-92页
图版2第92-97页
结论第97-98页
参考文献第98-106页
致谢第106-107页
个人简介第107-111页

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