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沙门氏菌血清分型分子靶点的发掘及鉴定体系的建立

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
第一章 文献综述第15-42页
   ·沙门氏菌生物学特性第15-16页
   ·沙门氏菌与食品安全第16-17页
   ·沙门氏菌流行病学特征第17-18页
   ·沙门氏菌的分型第18-29页
     ·沙门氏菌的血清分型第19-26页
     ·沙门氏菌的噬菌体分型第26-27页
     ·沙门氏菌的分子分型第27-29页
   ·沙门氏菌的血清鉴定研究进展第29-35页
   ·沙门氏菌的基因组测序第35-37页
   ·几种常见血清型的介绍第37-39页
   ·研究的意义、目的及思路第39-42页
     ·研究目的和意义第39页
     ·研究思路第39-42页
第二章 血清组A-D 分子靶点的发掘及多重PCR 体系的建立第42-83页
   ·材料第43-49页
     ·运行软件第43页
     ·BLAST 软件的下载及安装第43-44页
     ·菌株第44页
     ·培养基第44-45页
     ·主要试剂及配制第45-46页
     ·仪器与设备第46-49页
   ·方法第49-62页
     ·全基因组数据的下载和本地数据库的建立第49-50页
     ·血清组A、B、C 和D 代表菌株的选择第50页
     ·全基因组序列切割方式的选择第50-51页
     ·血清组特异候选靶点的发掘第51-53页
     ·候选靶点特异性的在线验证第53-55页
     ·沙门氏菌菌株的血清组鉴定第55-56页
     ·DNA 提取及纯度分析第56-57页
     ·引物设计第57-58页
     ·PCR 反应体系及循环参数第58页
     ·引物评价第58-59页
     ·血清组多重PCR 体系的建立第59-60页
     ·血清组多重PCR 体系的特异性评价第60页
     ·血清组多重PCR 体系的灵敏度评价第60-61页
     ·人工污染食品样品检测第61-62页
   ·结果第62-78页
     ·全基因组数据的下载和本地数据库的建立第62-64页
     ·血清组A、B、C1、C2 和D 代表菌株的选择结果第64页
     ·全基因组序列的切割结果第64-65页
     ·血清组特异候选靶点的发掘第65-68页
     ·候选靶点特异性的在线验证第68页
     ·沙门氏菌菌株的血清型鉴定第68-71页
     ·引物设计及其评价第71-74页
     ·血清组多重PCR 体系的建立第74-76页
     ·血清组多重PCR 体系的特异性和灵敏度评价第76-77页
     ·人工污染食品样品检测第77-78页
   ·讨论第78-83页
     ·沙门氏菌血清组靶点发掘中筛选方式的选取及优缺点评析第78-80页
     ·沙门氏菌血清组靶点发掘中DNA 片段切割程序的不足与改进第80-81页
     ·沙门氏菌血清组多重PCR 靶点与引物的选取及检测体系的评价与分析第81-83页
第三章 8 种常见血清型分子靶点的发掘及PCR 体系的建立第83-127页
   ·材料与方法第84-96页
     ·运行软件及安装第84-85页
     ·培养基、试剂及仪器设备第85页
     ·血清型沙门氏菌的本地数据库的建立第85页
     ·常见沙门氏菌血清型及其代表菌株的选择第85页
     ·全基因组序列的切割第85页
     ·特异候选靶点的发掘第85-86页
     ·候选靶点特异性的在线验证第86页
     ·菌株第86页
     ·沙门氏菌菌株的培养第86-92页
     ·沙门氏菌分离菌株的血清型鉴定第92-93页
     ·DNA 提取及纯度分析第93-94页
     ·沙门氏菌菌株DNA 模板的PCR 检测第94页
     ·引物设计第94页
     ·引物评价第94-95页
     ·血清型多重PCR 体系的建立第95页
     ·血清型多重PCR 体系的特异性评价第95页
     ·人工污染食品样品检测第95-96页
   ·结果第96-122页
     ·本地数据库的建立第96-97页
     ·血清型代表菌株的选择结果第97-98页
     ·全基因组序列的切割与靶点发掘结果第98-101页
     ·候选靶点特异性的在线验证第101页
     ·沙门氏菌菌株的血清型鉴定第101页
     ·引物设计及特异性、灵敏度评价第101-114页
     ·血清型多重PCR 体系的建立第114-120页
     ·血清型多重PCR 体系的特异性评价第120-121页
     ·人工污染食品样品检测第121-122页
   ·讨论第122-127页
     ·沙门氏菌血清型靶点发掘评析第122-124页
     ·与文献报道的沙门氏菌血清型靶点发掘方法的对比分析第124-125页
     ·沙门氏菌血清型多重PCR 引物的选取与分析第125-127页
第四章 血清组与血清型分子靶点的功能分析第127-143页
   ·材料与方法第127-129页
     ·蛋白分析软件第127-128页
     ·靶点的蛋白序列分析第128页
     ·蛋白结构预测与功能分析第128页
     ·基因与表型相关性分析第128-129页
   ·结果第129-137页
     ·血清组靶点基因功能分析结果第129-134页
     ·血清型靶点基因功能分析结果第134-137页
   ·讨论第137-142页
     ·血清组靶点基因与各个血清组间的表型差异的相关性分析第137-138页
     ·血清组C1 的靶点基因SCH_0368 和SCH_0595 的进化分析第138-139页
     ·血清型靶点基因与各个血清型间的表型差异的相关性分析第139-142页
   ·小结第142-143页
第五章 沙门氏菌分离株的分子检测与分型第143-159页
   ·材料第144页
     ·菌株第144页
     ·试剂与仪器第144页
   ·方法第144-148页
     ·多重PCR 检测分离株第144页
     ·血清学鉴定分离株第144-145页
     ·耐药性测试验第145-146页
     ·MLST 分型第146-147页
       ·数据分析第147-148页
   ·结果第148-157页
     ·分离株鉴定结果第148-151页
     ·MLST 结果第151-155页
     ·流行病学分析第155-157页
   ·讨论第157-159页
第六章 总结与展望第159-162页
   ·主要结论第159-160页
   ·创新性第160页
   ·展望第160-162页
参考文献第162-180页
致谢第180-181页
攻读博士学位期间已录用或正整理的论文第181-184页

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