| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 第一部分 人类短链脱氢酶/还原酶基因SCDR10B的克隆和功能研究 | 第10-41页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 一． 材料和试剂 | 第12-16页 |
| 1． 菌株、质粒、细胞株、实验动物 | 第12-13页 |
| 2． 实验耗材和试剂 | 第13-14页 |
| 3． 常用试剂配制 | 第14-15页 |
| 4． 引物 | 第15-16页 |
| 二． 主要的仪器设备 | 第16-17页 |
| 三． 生物学信息途径和计算机分析软件包 | 第17页 |
| 四． 技术路线和实验方法 | 第17-26页 |
| 1． 设计思路和实验流程 | 第17-18页 |
| 2． SCDR10B基因的克隆 | 第18-20页 |
| 3． Northern杂交 | 第20-21页 |
| 4． RT-PCR检测SCDR10B在不同肿瘤细胞株中的表达 | 第21-22页 |
| 5． SCDR10B重组蛋白的原核表达和纯化 | 第22-23页 |
| 6． 重组SCDR10B蛋白的酶活性分析 | 第23页 |
| 7． 多克隆抗体的制备 | 第23-24页 |
| 8． 细胞培养 | 第24页 |
| 9． 细胞瞬时转染和WesternBlot检测SCDR10B的表达 | 第24-25页 |
| 10． 免疫组化方法 | 第25-26页 |
| 五． 结果 | 第26-35页 |
| 1． 人类SCDR10B基因的克隆、鉴定以及生物信息学分析 | 第26-31页 |
| 2． SCDR10B基因的组织表达谱以及在不同肿瘤细胞株中的表达分析 | 第31-33页 |
| 3． SCDR10B重组蛋白的表达纯化,酶活性测定 | 第33-34页 |
| 4． 多克隆抗体的制备,以及Western检测 | 第34-35页 |
| 5． 免疫组化分析检测SCDR10B在肺,脑以及肺癌,脑胶质瘤,脑膜瘤中的表达 | 第35页 |
| 六． 讨论 | 第35-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 第二部分 人类LHFPL1基因的克隆和功能的初步研究 | 第41-57页 |
| 前言 | 第41-42页 |
| 一． 材料和试剂 | 第42-44页 |
| 二． 主要的仪器设备 | 第44页 |
| 三． 生物学信息途径和计算机分析软件包 | 第44页 |
| 四． 实验方法 | 第44-47页 |
| 1． 技术路线和实验方案 | 第44-45页 |
| 2． 近全长人LHFPL1基因cDNAs的获得 | 第45页 |
| 3． 多组织cDNApanel分析和RT-PCR检测LHFPL1在肝肿瘤细胞株中的表达 | 第45页 |
| 4． 生物信息学分析 | 第45-46页 |
| 5． LHFPL1重组蛋白的原核表达 | 第46页 |
| 6． 免疫荧光定位 | 第46-47页 |
| 五． 结果 | 第47-53页 |
| 1． 人类LHFPL1基因的克隆、鉴定 | 第47页 |
| 2． LHFPL1基因的染色体定位和基因组序列分析 | 第47-49页 |
| 3． LHFPL1基因的同源性分析 | 第49-50页 |
| 4． LHFPL1基因蛋白产物分析 | 第50-51页 |
| 5． LHFPL1基因的组织表达谱以及在不同肿瘤细胞株中的表达分析 | 第51-52页 |
| 6． LHFPL1蛋白的表达 | 第52-53页 |
| 7． LHFPL1基因的细胞学定位 | 第53页 |
| 六． 讨论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 第三部分 CyclophilinJ的生化特性和结构研究 | 第57-80页 |
| 前言 | 第57-59页 |
| 一． 材料和主要试剂 | 第59-60页 |
| 二． 主要仪器设备 | 第60页 |
| 三． 方法 | 第60-64页 |
| 1． CYPJ-PTXB1融合蛋白的诱导表达和纯化 | 第60-61页 |
| 2． CYPJ突变体的构建 | 第61-62页 |
| 3． CYPJ脯氨酸异构酶活性测定 | 第62页 |
| 4． 溶液核酸酶活性分析 | 第62页 |
| 5． 凝胶阻滞实验 | 第62-63页 |
| 6． 圆二色性光谱 | 第63页 |
| 7． 荧光光谱 | 第63-64页 |
| 四． 结果 | 第64-74页 |
| 1． CYPJ蛋白的表达纯化 | 第64-65页 |
| 2． CYPJ脯氨酸异构酶活性测定 | 第65-66页 |
| 3． 溶液核酸酶活性分析 | 第66-69页 |
| 4． 电泳胶移实验显示CYPJ能结合DNA | 第69-70页 |
| 5． CYPJ蛋白的CD光谱 | 第70-73页 |
| 6． CYPJ蛋白的荧光光谱 | 第73-74页 |
| 五． 讨论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-79页 |
| 小结 | 第79-80页 |
| 综述 | 第80-92页 |
| 附录1:博士期间发表的论文 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
