| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| ·SP的研究概况 | 第11-16页 |
| ·SP基因复制与表达策略 | 第12页 |
| ·SP的血清学特性 | 第12-13页 |
| ·SP同源性分析 | 第13页 |
| ·SP的变异 | 第13-14页 |
| ·SP与介体的关系 | 第14-15页 |
| ·SP在寄主体内的积累 | 第15-16页 |
| ·农杆菌介导的水稻转基因技术研究 | 第16-19页 |
| ·农杆菌基因转化系统的优点 | 第16页 |
| ·根癌农杆菌介导水稻转化的影响因素 | 第16-18页 |
| ·菌株 | 第16-17页 |
| ·转化受体 | 第17页 |
| ·组织培养条件 | 第17-18页 |
| ·农杆菌感染愈伤组织的方式 | 第18页 |
| ·外源基因在水稻中的遗传学行为 | 第18-19页 |
| ·外源基因的遗传 | 第18页 |
| ·外源基因的沉默 | 第18-19页 |
| ·植物病毒在植物原生质体中侵染的研究概况 | 第19-20页 |
| ·病毒核酸的合成 | 第19-20页 |
| ·病毒诱导蛋白质的合成 | 第20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-37页 |
| ·供试材料 | 第22-25页 |
| ·水稻品种 | 第22页 |
| ·菌株及质粒 | 第22页 |
| ·引物 | 第22页 |
| ·抗血清 | 第22页 |
| ·试剂及酶类 | 第22-24页 |
| ·供试培养基的配制 | 第24-25页 |
| ·组织培养培养基 | 第24页 |
| ·细菌培养基 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-37页 |
| ·根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第25-31页 |
| ·植物表达载体转入农杆菌 | 第25页 |
| ·提取质粒 | 第25-26页 |
| ·提取质粒DNA进行PCR鉴定 | 第26页 |
| ·水稻胚性愈伤组织的诱导 | 第26页 |
| ·根癌农杆菌的培养 | 第26-27页 |
| ·愈伤组织与根癌农杆菌的共培养 | 第27页 |
| ·抗性愈伤的筛选 | 第27页 |
| ·转基因植株的再生 | 第27页 |
| ·外源片段整合的初步检测 | 第27-30页 |
| ·RT-PCR Southern点杂交初步检测外源片段的转录 | 第30-31页 |
| ·SP在原生质体内的转录和表达 | 第31-37页 |
| ·毒源的繁殖 | 第31-32页 |
| ·病毒的提纯 | 第32页 |
| ·病毒的紫外吸收值的测定 | 第32页 |
| ·探针的制备 | 第32页 |
| ·悬浮细胞系的建立 | 第32-33页 |
| ·原生质体的制备 | 第33页 |
| ·RGSV接种水稻原生质体 | 第33-34页 |
| ·荧光抗体染色统计感染病毒原生质体的百分比 | 第34-35页 |
| ·Northern点杂交检测转录SP的mRNA的积累 | 第35-36页 |
| ·Dot-ELISA检测SP的表达周期 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-51页 |
| ·转基因植株的再生及检测 | 第37-44页 |
| ·转基因植株的再生 | 第37-41页 |
| ·农杆菌中SP基因的PCR鉴定 | 第37页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第37-38页 |
| ·愈伤组织的共培养 | 第38页 |
| ·抗性愈伤的筛选 | 第38-41页 |
| ·转基因植株的再生及移栽 | 第41页 |
| ·转基因植株的初步检测 | 第41-44页 |
| ·地高辛标记探针的制备 | 第41-42页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第42-43页 |
| ·转化植株的Southern点杂交检测 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR Southern点杂交检测外源片段的转录 | 第44页 |
| ·SP在原生质体内的转录和表达 | 第44-51页 |
| ·病毒的提纯及紫外吸收值测定 | 第44-45页 |
| ·细胞悬浮培养的建立 | 第45-48页 |
| ·愈伤组织的培养 | 第45-46页 |
| ·悬浮细胞的培养 | 第46-48页 |
| ·原生质体的分离和纯化 | 第48页 |
| ·荧光抗体染色统计病毒侵染原生质体百分比 | 第48页 |
| ·SP抗血清效价的测定 | 第48页 |
| ·荧光抗体染色统计病毒侵染原生质体百分比 | 第48页 |
| ·转录SP的mRNA在水稻原生质体内的积累周期 | 第48-51页 |
| ·探针的制备 | 第48页 |
| ·Northern点杂交检测mRNA | 第48-49页 |
| ·Dot-ELISA检测SP的表达周期 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-56页 |
| ·转基因水稻的再生 | 第51-54页 |
| ·影响农杆菌转化的因素 | 第51-52页 |
| ·受体组织 | 第51页 |
| ·转化植株的再生及移栽 | 第51-52页 |
| ·水稻基因组DNA的提取 | 第52页 |
| ·SP基因功能的分析 | 第52-53页 |
| ·转基因植株的抗性鉴定 | 第53-54页 |
| ·SP在原生质体内的转录和表达 | 第54-56页 |
| ·悬浮细胞的制备 | 第54页 |
| ·原生质体的制备 | 第54-55页 |
| ·SP在原生质体内的转录和表达 | 第55-56页 |
| 5 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录1 本文英文缩写词和英汉对照 | 第64-67页 |
| 附录2 本文所用试剂和缓冲液的配置 | 第67-73页 |
| 附录3 攻读硕士期间发表的论文 | 第73页 |
