| 摘要[中文] | 第1-9页 |
| 摘要[英文] | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-32页 |
| 1 香蕉概述 | 第11-14页 |
| ·香蕉的分类及植物学特征 | 第11页 |
| ·分类 | 第11页 |
| ·植物学特征 | 第11页 |
| ·香蕉的营养价值 | 第11-12页 |
| ·香蕉的经济价值 | 第12页 |
| ·香蕉在科学研究中的用途 | 第12-13页 |
| ·关于香蕉基因组测序 | 第13-14页 |
| 2 香蕉果实成熟的分子生物学研究进展 | 第14-20页 |
| ·采后果实乙烯生物合成相关基因克隆和调控 | 第14-15页 |
| ·采后果实成熟相关基因克隆及表达 | 第15-19页 |
| ·采用差异筛选方法分离果实成熟相关基因 | 第15-16页 |
| ·重要果实成熟相关基因的克隆与表达 | 第16-19页 |
| ·小结 | 第19-20页 |
| 3 香蕉转基因研究进展 | 第20-22页 |
| ·受体材料 | 第20页 |
| ·转化方法 | 第20-21页 |
| ·应用于转基因香蕉中的启动子 | 第21-22页 |
| 4 肌动蛋白的分子生物学 | 第22-24页 |
| 5 高等植物启动子研究进展 | 第24-31页 |
| ·启动子的基本概念 | 第24页 |
| ·植物启动子的结构特征 | 第24-25页 |
| ·转录起始位点 | 第24页 |
| ·TATA框 | 第24-25页 |
| ·G盒保守序列 | 第25页 |
| ·启动子的种类 | 第25-29页 |
| ·双向启动子和可变启动子 | 第25-26页 |
| ·环境诱导表达的启动子 | 第26页 |
| ·激素诱导表达启动子 | 第26-27页 |
| ·光诱导表达启动子 | 第27-28页 |
| ·植物防卫基因启动子 | 第28页 |
| ·植物组织特异表达启动子 | 第28-29页 |
| ·启动子的应用情况 | 第29页 |
| ·启动子的选用和改造 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 6 技术路线 | 第31-32页 |
| 第二部分 香蕉actin 1基因及启动子序列的分离与分析 | 第32-47页 |
| 1 材料与试剂 | 第32页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌种和质粒 | 第32页 |
| ·酶和生化试剂 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-39页 |
| ·actin 1的分离 | 第32-37页 |
| ·香蕉基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·聚合酶链式反应扩增actin 1基因 | 第33-34页 |
| ·引物合成 | 第33-34页 |
| ·PCR反应 | 第34页 |
| ·PCR产物的凝胶电泳观察 | 第34页 |
| ·目的片段的回收 | 第34-35页 |
| ·目的片段的克隆 | 第35-36页 |
| ·PCR产物与T-vector的连接反应 | 第35页 |
| ·感受态受体菌的制备 | 第35页 |
| ·Escherichia coli DH 5α的转化及阳性克隆的筛选 | 第35-36页 |
| ·碱法小量提取质粒 | 第36页 |
| ·重组质粒的筛选及酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组阳性克隆菌的保存 | 第37页 |
| ·目的片段的序列测定及分析 | 第37页 |
| ·actin 1启动子序列的分离 | 第37-39页 |
| ·香蕉基因组DNA的提取(CTAB法) | 第37页 |
| ·聚合酶链式反应扩增actin 1启动子片段 | 第37-38页 |
| ·引物合成 | 第38页 |
| ·PCR反应 | 第38页 |
| ·目的片段的回收 | 第38页 |
| ·目的片段的克隆 | 第38页 |
| ·碱法小量制备重组质粒 | 第38页 |
| ·重组质粒的筛选及酶切鉴定 | 第38-39页 |
| ·启动子片段的序列测定及分析 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-47页 |
| ·actin 1基因的PCR扩增 | 第39页 |
| ·actin 1启动子的PCR扩增 | 第39页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·pACT1的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·pACTP的酶切鉴定 | 第40页 |
| ·序列测定与分析 | 第40-47页 |
| ·pACT1插入DNA片段的序列测定及分析 | 第40页 |
| ·pACTP的插入DNA片段的序列测定及分析 | 第40-47页 |
| 第三部分 瞬时植物表达载体的构建 | 第47-57页 |
| 1 材料 | 第47页 |
| ·菌种和质粒 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-52页 |
| ·瞬时植物表达载体pCAMBIA-ACTP的构建 | 第47-50页 |
| ·pCAMBIA103中间载体的构建 | 第47-49页 |
| ·瞬时表达载体pCAMBIA-ACTP的构建 | 第49-50页 |
| ·瞬时植物表达载体pBI-ACTPS的构建 | 第50-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-57页 |
| ·瞬时植物表达载体pCAMBIA-ACTP的构建 | 第52-53页 |
| ·瞬时植物表达载体pBI-ACTPS的构建 | 第53-57页 |
| 第四部分 基因枪法转化香蕉及瞬时表达的研究 | 第57-66页 |
| 1 材料与设备 | 第57页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·质粒 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·设备 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-62页 |
| ·香蕉转化材料的准备 | 第57-58页 |
| ·基因枪转化 | 第58-60页 |
| ·质粒PBI121、pBI-ACTPS和pCAMBIA-ACTP的大量提取 | 第58-59页 |
| ·微弹制备 | 第59-60页 |
| ·基因枪轰击香蕉材料 | 第60页 |
| ·Gus组织化学染色 | 第60-61页 |
| ·Gus酶活力检测 | 第61-62页 |
| ·Gus提取液的制备 | 第61页 |
| ·Gus提取液蛋白含量测定 | 第61-62页 |
| ·标准曲线的制备 | 第61页 |
| ·蛋白含量测定 | 第61-62页 |
| ·酶反应 | 第62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-66页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第62页 |
| ·Gus酶活力检测 | 第62-66页 |
| ·提取液蛋白含量测定 | 第62-63页 |
| ·比色测定 | 第63-66页 |
| 第五部分 讨论 | 第66-71页 |
| 1 actin基因的聚类分析 | 第66-67页 |
| 2 actin 1启动子顺式作用元件分析 | 第67页 |
| 3 启动子活性测定方法探讨 | 第67-69页 |
| 4 嵌合载体转化香蕉的研究结果 | 第69-71页 |
| 第六部分 结论 | 第71-72页 |
| 第七部分 附录 | 第72-83页 |
| 参考文献 | 第83-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
