| 摘要 | 第1-14页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-59页 |
| 第一章 动物的体脂沉积 | 第16-23页 |
| ·体脂过度沉积 | 第16-17页 |
| ·脂肪过度沉积的遗传基础 | 第17-20页 |
| ·脂肪过度沉积的遗传模型 | 第17-18页 |
| ·引起动物体脂过度沉积的相关基因产物及其它调节因子 | 第18-20页 |
| ·动物体重和体脂含量的自身调控 | 第20-23页 |
| ·动物体重和体脂的恒稳态与“调定点”假说 | 第20-21页 |
| ·动物体重和体脂含量的反馈调节 | 第21-23页 |
| 第二章 OB基因及其受体基因的研究进展 | 第23-47页 |
| ·OB基因 | 第23-27页 |
| ·ob基因的大小、结构、分布及表达部位 | 第23-25页 |
| ·ob基因的研究进展 | 第25-27页 |
| ·ob基因的突变 | 第25-26页 |
| ·ob基因的转基因研究 | 第26-27页 |
| ·LEPTIN--OB基因的产物 | 第27-38页 |
| ·Leptin的结构 | 第27-29页 |
| ·Leptin的氨基酸序列 | 第27-28页 |
| ·Leptin分子的二级结构 | 第28页 |
| ·Leptin分子的三级结构 | 第28-29页 |
| ·Leptin的生物学作用 | 第29-34页 |
| ·调节脂肪沉积和体脂含量 | 第29-31页 |
| ·调节生长和代谢 | 第31-32页 |
| ·调节生殖和发育 | 第32-33页 |
| ·调节免疫和造血机能 | 第33-34页 |
| ·参与应激反应 | 第34页 |
| ·ob基因与家畜生产性能的关系 | 第34-36页 |
| ·Leptin水平与脂肪沉积的关系 | 第36-38页 |
| ·OBR及其基因 | 第38-42页 |
| ·OBR的结构及特性 | 第38-40页 |
| ·OBR的生物学功能 | 第40-41页 |
| ·OBR基因研究进展 | 第41-42页 |
| ·LEPTIN及其受体的作用机制及信号转导途径 | 第42-44页 |
| ·Leptin及其受体的作用机制 | 第42-43页 |
| ·Leptin及其受体信号转导的JAK-STAT途径 | 第43-44页 |
| ·肥胖个体中的LEPTIN抵抗现象 | 第44-47页 |
| ·Leptin抵抗现象 | 第44页 |
| ·Leptin抵抗的可能机制 | 第44-47页 |
| 第三章 OB基因的表达及其影响因素 | 第47-59页 |
| ·OB基因的表达 | 第47-49页 |
| ·ob基因表达的过程 | 第47页 |
| ·ob基因表达的检测方法及其应用 | 第47-49页 |
| ·OB基因表达的影响因素 | 第49-54页 |
| ·年龄、品种和性别的差异 | 第49页 |
| ·摄食的调节 | 第49-50页 |
| ·激素及其类因子的调节 | 第50-52页 |
| ·体脂含量的调节 | 第52页 |
| ·金属元素的调控 | 第52-53页 |
| ·转录因子的调控 | 第53-54页 |
| ·细胞因子的调控 | 第54页 |
| ·其它因素的调控 | 第54页 |
| ·猪LEPTIN表达和分泌的调控 | 第54-57页 |
| ·猪前体脂肪细胞ob基因的表达 | 第55页 |
| ·猪血管间质细胞ob基因表达的激素调节 | 第55-56页 |
| ·猪胚胎ob基因表达的激素调节 | 第56-57页 |
| ·OB基因在畜牧业上应用的展望 | 第57-59页 |
| 第二部分 实验研究 | 第59-86页 |
| 第四章 瘦肉型与脂肪型猪OB基因MRNA表达丰度的研究 | 第59-71页 |
| ·实验材料与方法 | 第60-65页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-61页 |
| ·脂肪组织总RNA的提取和质量鉴定 | 第60-61页 |
| ·RNA的质量分析和定量 | 第61页 |
| ·反转录流程 | 第61-62页 |
| ·反转录 | 第62页 |
| ·RT-PCR引物设计 | 第62页 |
| ·PCR反应体系和程序 | 第62页 |
| ·Northern杂交 | 第62-64页 |
| ·cDNA探针标记的制备和检测 | 第62-63页 |
| ·RNA电泳样品的准备 | 第63页 |
| ·RNA的甲醛变性电泳 | 第63页 |
| ·转移膜和转移胶的准备 | 第63页 |
| ·转膜 | 第63-64页 |
| ·预杂交与杂交 | 第64页 |
| ·洗膜 | 第64页 |
| ·放射自显影 | 第64页 |
| ·Bandscan分析 | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-67页 |
| ·总RNA的定量和分析 | 第65-66页 |
| ·反转录及PCR结果 | 第66页 |
| ·Northern杂交后放射自显影结果 | 第66页 |
| ·Bandscan软件定量分析结果 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-71页 |
| ·脂肪型和瘦肉型猪ob基因mRNA的表达丰度 | 第68-69页 |
| ·猪肝脏组织中不表达ob基因 | 第69-70页 |
| ·Northern杂交技术 | 第70-71页 |
| 第五章 瘦肉型与脂肪型猪血清LEPTIN水平的检测 | 第71-78页 |
| ·材料与方法 | 第71-73页 |
| ·实验材料 | 第71-72页 |
| ·实验方法 | 第72-73页 |
| ·主要溶液 | 第72页 |
| ·SDS-PAGE平板电泳 | 第72-73页 |
| ·转移、封闭与杂交 | 第73页 |
| ·条带的定量分析 | 第73页 |
| ·结果与分析 | 第73-75页 |
| ·SDS-PAGE电泳结果 | 第74页 |
| ·Western杂交结果 | 第74页 |
| ·条带定量结果 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-78页 |
| ·瘦肉型与脂肪型品种血清Leptin水平的比较 | 第75-76页 |
| ·脂肪型猪ob基因表达调控的增强 | 第76页 |
| ·脂肪型猪的Leptin抵抗 | 第76-77页 |
| ·33KD蛋白 | 第77页 |
| ·Western杂交方法 | 第77-78页 |
| 第六章 猪OB基因CDNA编码区的克隆及序列分析 | 第78-86页 |
| ·材料与方法 | 第78-81页 |
| ·实验材料 | 第78-79页 |
| ·实验方法 | 第79-81页 |
| ·总RNA的提取、反转录和RT-PCR | 第79页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第79页 |
| ·PCR产物与pMD-18T载体的克隆 | 第79页 |
| ·连接产物的转化 | 第79-80页 |
| ·重组质粒的提取 | 第80页 |
| ·重组质粒的PCR和双酶切鉴定 | 第80页 |
| ·序列测定分析 | 第80页 |
| ·不同动物ob基因编码区核苷酸序列分析 | 第80-81页 |
| ·ob基因编码产物氨基酸序列分析 | 第81页 |
| ·结果与分析 | 第81-83页 |
| ·总RNA的提取、检测以及RT-PCR | 第81页 |
| ·重组质粒的PCR和双酶切鉴定 | 第81页 |
| ·序列测定结果 | 第81页 |
| ·各物种间ob基因cDNA编码区的核苷酸序列差异 | 第81-82页 |
| ·各物种间Leptin蛋白的氨基酸序列差异 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| ·各物种间ob基因cDNA编码区的核苷酸序列差异 | 第83页 |
| ·各物种间Leptin蛋白的氨基酸序列差异 | 第83-86页 |
| 结论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-104页 |
| 第三部分 附件 | 第104-116页 |
| 研究生简介 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
