| 摘要 | 第1-7页 |
| 1 中文摘要 | 第5-6页 |
| 2 英文摘要 | 第6-7页 |
| 引言与文献综述 | 第7-25页 |
| 1 生物技术在虫害控制上的应用 | 第7-11页 |
| 2 昆虫神经肽激素及其在虫害控制上的应用研究进展 | 第11-15页 |
| 3 咽侧体静体激素研究进展 | 第15-19页 |
| 4 基因串联体的构建研究 | 第19-23页 |
| 5 大肠杆菌pET22b表达系统 | 第23-24页 |
| 6 本实验的研究目的和意义 | 第24页 |
| 7 本实验的技术路线 | 第24-25页 |
| 材料与方法 | 第25-39页 |
| 1 材料与试剂 | 第25页 |
| 1．1 质粒与菌种 | 第25页 |
| 1．2 试剂 | 第25页 |
| 1．3 引物合成与测序 | 第25页 |
| 2 Grb-ast8串联体的构建 | 第25-33页 |
| 2．1 引物设计与合成 | 第25-26页 |
| 2．2 随机拼接法 | 第26页 |
| 2．3 缺口补平法 | 第26-27页 |
| 2．4 PCR方法 | 第27-33页 |
| 2．4．1 PCR反应 | 第27-28页 |
| 2．4．2 PCR产物回收 | 第28页 |
| 2．4．3 PCR拼接产物的克隆 | 第28-31页 |
| 2．4．4 重组子的筛选与鉴定 | 第31-32页 |
| 2．4．5 重组子测序 | 第32-33页 |
| 3 Grb-ast8串联体的表达 | 第33-37页 |
| 3．1 表达载体的构建 | 第33-35页 |
| 3．1．1 表达载体的扩增 | 第33页 |
| 3．1．2 表达载体线性化 | 第33页 |
| 3．1．3 Grb-ast8串联体的制备 | 第33-34页 |
| 3．1．4 线性化载体与Grb-ast8串联体的连接 | 第34页 |
| 3．1．5 连接产物的转化 | 第34-35页 |
| 3．1．6 重组子的筛选与鉴定 | 第35页 |
| 3．1．7 阳性重组克隆的保存 | 第35页 |
| 3．2 Grb-ast8串联体的表达 | 第35-36页 |
| 3．3 表达产物的SDS-PAGE | 第36-37页 |
| 4 表达产物生物活性测定 | 第37-39页 |
| 4．1 样品的制备 | 第37-38页 |
| 4．2 表达产物生物活性测定 | 第38-39页 |
| 结果与分析 | 第39-44页 |
| 1 Grb-ast8串联体的构建 | 第39-42页 |
| 1．1 随机拼接法 | 第39-40页 |
| 1．2 缺口补平法 | 第40-41页 |
| 1．3 PCR法 | 第41-42页 |
| 2 PCR产物的克隆 | 第42-43页 |
| 3 Grb-ast8串联体的表达分析 | 第43-44页 |
| 3．1 表达载体的构建 | 第43页 |
| 3．2 表达分析 | 第43页 |
| 3．2 生物活性测定 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44页 |
| 讨论 | 第44-47页 |
| 1 Grb-ast8串联体的构建 | 第44-45页 |
| 2 Grb-ast8串联体的表达 | 第45-46页 |
| 3 Grb-ast8串联体表达产物的生物活性 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 图版 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57页 |