摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
前言 | 第12-22页 |
1 铜绿微囊藻简介和蓝藻生物钟研究进展 | 第12-18页 |
·铜绿微囊藻简介 | 第12-13页 |
·生物钟介绍 | 第13页 |
·蓝藻生物钟研究进展 | 第13-18页 |
2 酵母双杂交系统介绍 | 第18-21页 |
·酵母双杂交原理 | 第18-20页 |
·用于酵母双杂交筛选的铜绿微囊藻基因组文库 | 第20-21页 |
3 本论文研究的目的和意义 | 第21-22页 |
材料与方法 | 第22-45页 |
1 实验材料 | 第22-31页 |
2 实验方法 | 第31-45页 |
实验流程 | 第45-46页 |
实验结果与分析 | 第46-66页 |
1 铜绿微囊藻基因文库的构建 | 第46-49页 |
·铜绿微囊藻染色体DNA的不完全酶切 | 第46页 |
·基因组文库构建 | 第46-49页 |
2 重组质粒pGBKT_7-kaiC的有效性检测 | 第49-50页 |
3 利用酵母双杂交筛选与生物钟蛋白KaiC相互作用的蛋白 | 第50-57页 |
·筛选基因组文库中与KaiC的相互作用蛋白 | 第50-52页 |
·回复验证阳性克隆的有效性 | 第52页 |
·测序结果分析 | 第52-57页 |
4 集胞藻PCC 6803的ompR基因的克隆、表达及其与KaiC相互作用的验证 | 第57-62页 |
·集胞藻PCC 6803的ompR基因的克隆表达 | 第57-60页 |
·蛋白OmpR与KaiC相互作用的检验 | 第60-62页 |
5 铜绿微囊藻藻中c196基因的克隆、表达及其与KaiC蛋白相互作用的验证 | 第62-66页 |
·铜绿微囊藻c196基因基因的扩增 | 第62-63页 |
·重组表达载体的构建 | 第63-64页 |
·GST-C196蛋白的表达与纯化 | 第64页 |
·Far-western验证C196与KaiC间的相互作用 | 第64-66页 |
讨论 | 第66-71页 |
1 铜绿微囊藻基因文库的构建 | 第66-67页 |
2 酵母双杂交的筛选 | 第67-69页 |
3 基因组文库筛选的蛋白功能 | 第69-71页 |
小结与展望 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-78页 |
附录 | 第78-83页 |
致谢 | 第83页 |